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PCR技術在臨床檢驗中的應用

2014-04-29 00:00:00施清蓉陳易智劉偉
醫學信息 2014年38期

摘要:聚合酶鏈反應又叫DNA擴增技術。進入到21世紀以來,在標本中,分析研究與鑒定檢測特定的體外基因擴增技術重要方法就是PCR技術。近些年以來,這項技術在許多研究領域以及臨床的應用中都發揮著重要作用;同時PCR技術在遺傳病診斷與傳染病病原體鑒定以及癌基因治療等眾多方面均有十分重大的貢獻。本文主要是對PCR技術在臨床檢驗中的應用進行分析和探討。

關鍵詞:PCR技術;臨床檢驗;應用

1 PCR技術的概述

PCR技術的基本原理是在擴增區域的兩端,用兩條互補的雙鏈DNA模板引物,利用DNA聚合酶,引物會引發互補的DNA鏈。在這個過程中,一條引物所引發的DNA鏈可以合成另外一條新的DNA鏈, 循環反復多次以后,導致這兩條引物之間的DNA大量復制[1]。PCR技術的循環反應主要是由變性和退火以及延伸這三個基本步驟組成的循環。

PCR技術在基層疾病檢測中的應用,是當今社會較為常見的。對于肝炎病毒、腸道病毒、呼吸道系統感染、性病病原體等檢測,PCR技術的敏感度精確度要比傳統方法高。

2 PCR 技術在臨床檢驗中的應用

2.1PCR技術在傳染性疾病檢測中的應用 目前我國典型的消化系統感染性疾病包括肝炎、胃炎等。引發肝炎的病原體主要為乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒等。使用PCR法對血清中的乙肝病毒進行檢測的優勢主要體現在早期診斷,并且在酶標試劑無法檢測的情況下,PCR可以檢出,大大縮短窗口前,使得患者能夠得到早期診斷和治療[2]。

2.2 PCR技術在腫瘤方面的應用 現階段,腫瘤的發病分子機制還不是完全的清楚。PCR技術在腫瘤相關基因和腫瘤病毒病因以及腫瘤相關抑癌基因的研究方面,都已經得到了非常好的成果。根據相關的資料表明,鼻咽癌與Burkitt淋巴瘤以及EB病毒是有關系的;泌尿道腫瘤與食管腫瘤等以及人乳頭瘤病毒是有關系的[3];原發性肝癌和乙型肝炎病毒是有關聯的。通過癌基因或者基因變化的檢測,人體癌的演變時,可以以腫瘤作為標志物直接應用在臨床檢測。現階段,已經建立起以PCR技術為基礎,新的分子生物學技術,用來鑒定人體基因突變,也可以用來檢測比如糞、痰等各種體液中的突變基因。

2.3 PCR技術在呼吸系統感染性疾病上的應用 呼吸道系統疾病為比較常見的一種疾病,隨著現代醫學領域的不斷進步與發展,已經發現了呼吸道系統疾病是誘發腸病毒的重要因素之一。PCR能夠對呼吸道病原體進行系統、快速的檢測,并予以鑒定,具有較高的特異性以及敏感性。運用PCR反應,能夠同時檢測出很多種病原體,在臨床呼吸道疾病中可以達到快速進行檢測的要求。對呼吸道疾病診斷與治療起到非常重要的作用。目前檢測的金標準仍然是結核菌培養法。但是培養法消耗的時間較長,并且會受到藥物影響,所以在實際的使用當中有一定的限制,而PCR技術在檢測結核菌方面具有簡便、敏感、特異等優勢。

2.4PCR技術在遺傳病檢測中的應用 所謂遺傳病就是因為在父母的生殖細胞中,遺傳的物質發生了改變而引起的,基本上是因遺傳的因素所決定。通常表現先天性或者是后天的發病,比如:多趾、先天聾啞、先天愚型血友病等等。遺傳病完全因為遺傳的因素決定了它的發病情況,并在新嬰兒出生后一定的時間內發病,但是有些情況會是在孩子幾年甚至幾十年以后,才會發生明顯的癥狀。因為遺傳病的發病具有隱藏性,其可預見性比較差[4],所以想要尋找出一種能夠最早檢測手段是非常重要的。在早產這個情況的診斷前能夠最大限度的減少遺傳病胎兒的發生率。而PCR技術具有特異性強、敏感性高、操作簡便等優點,再加上可以和生物學上多種分子技術加以配合來使用,已經是遺傳病基因的診斷中非常常用并且最有效的方法了。

2.5PCR技術在性病檢測中的應用 經典的性傳播疾病包括梅毒、淋病等。傳統的檢測方法存在費用高、費時長、準確性不高等問題,使用PCR法能夠快速、簡便、準確的檢測。

3結論

綜上所述,PCR技術在臨床檢驗中取得了突破性的進展,其在各個領域的應用價值會隨著其技術的更新而不斷提高。這不僅標志著醫學領域的技術設備進入一個嶄新的高度,也是人類對疾病預防與控制上的能力提高具有著重大意義。雖然PCR技術已經在臨床檢驗中運用了很長時間,但是目前還是被看作輔助臨床的診斷方法。而伴隨生物學中分子理論的飛速發展, PCR技術和新的材料以及自動化的科學越來越緊密[5],并且融合在新工藝的設計中,漸漸凸顯了以精細化和自動化為代表的發展趨勢。PCR技術及其相關的產業將會在臨床的檢驗中迎來嶄新的、更好的發展契機。

參考文獻:

[1]LANGMANN T,MAUERER R,SCHMITZ G.Human ATP -binding cassette transporter TaqMan low -density array: analysis of macrophage differentiation and foam cell formation [J].Clin Chem,2013,52(2):310 -313.

[2]龔弘局,綜述,金家貴,等.聚合酶鏈反應在醫學檢驗中的應用和進展[J]檢驗醫學與臨床,2012,7(11):1131-1133.

[3]汪洋,官琳琳,邵淑娟,等.實時熒光定量PCR在腫瘤研究中的應用[J].腫瘤,2011,24(2):196-197.

[4]GYORFFY B,SUROWIAK P,KIESSLICH O,et a.l Gene ex-pression profiling of 30 cancer cell lines predicts resistance towards 11 anticancer drugs at clinically achieved concentrations[J].Int J Cancer,2013,118(7):1699-1712.

[5]陸利民,李海雁,汪蓉,姚泰.采用單堿基突變模板作為內對照對組織中mRNA水平進行PCR定量.生理學報,2013,49(2):235~240.編輯/許言

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