噬菌體生物擴增法對老年結核性胸膜炎的診斷價值

摘要：目的 利用噬菌體生物擴增法來檢測老年結核性胸膜炎患者胸腔液標本，繼而探究此檢測方法的臨床診斷價值。方法 選取我院結核科2012年5月～2014年5月收治的60例老年結核性胸膜炎患者胸腔積液為研究對象，按照收治時間分為對照組與研究組各30例，對照組采用常規(guī)檢測方法；研究組采用噬菌體生物擴增法進行檢測，對比兩組患者胸腔積液標本檢測結果。結果 研究組患者通過采用噬菌體生物擴增法來進行胸腔積液標本的檢測，陽性檢出19例，檢出率63.3%，明顯高于對照組12例，40%，標本檢測取得了比較理想的檢測效果，兩組患者檢測結果經統(tǒng)計學處理具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結論 噬菌體生物擴增法診斷老年結核性胸膜炎取得了比較理想的診斷結果，值得在實際臨床診斷工作中推廣使用。

關鍵詞：噬菌體生物擴增法；老年結核性胸膜炎；胸腔積液標本；檢出率

老年結核性胸膜炎在實際臨床診斷中較為常見，而且隨著我國老齡化問題日益嚴峻，其發(fā)病率呈現明顯上升趨勢。老年結核性胸膜炎患者胸腔積液中結核菌檢測結果對診斷患者以及后續(xù)治療方案制定具有重要的指導作用。然而常規(guī)檢測方法在檢測老年結核性胸膜炎標本時，由于患者胸腔積液中結核分枝桿菌陽性檢出率較低，嚴重影響了實際檢測結果，對患者治療工作以及醫(yī)院造成了較為嚴重的影響。噬菌體生物擴增法（Phage amplified biologically assay，PhaB）是近些年來興起的一種細菌學快速診斷技術，被廣泛應用于結核性胸膜炎等結核病早期病原學診斷并取得了比較矚目的成果，患者陽性結核菌檢出率明顯提高，具有較高的臨床應用價值[1]。我院結核科通過對2012年5月～2014年5月收治的老年結核性胸膜炎患者實施噬菌體生物擴增法檢測，結合分枝桿菌陽性檢出率高達63.3%，取得了比較理想的臨床診斷結果，對判定患者病癥以及制定后續(xù)治療方案具有重要的指導意義，有效推動了結核科臨床診斷工作進一步發(fā)展。現將結果報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料 我院結核科2012年5月～2014年5月收治了60例老年結核性胸膜炎患者，其中男性38例，女性22例，年齡42～66歲，平均年齡（54±10）歲。按照我國頒布的《肺結核診斷與治療指南》標準規(guī)定，所有患者均符合以下標準：①實際臨床結核中毒癥狀較為明顯，胸腔滲出液主要以淋巴細胞為主；②經過抗結核治療工作后，胸腔積液吸收速度較快；③經過不間斷追蹤觀察排除了其他疾病[2]。按照收治時間分為對照組與研究組各30例，兩組患者一般資料無統(tǒng)計學差異（P>0.05），具有可比性。

1.2方法 采集所有老年結核性胸膜炎患者胸腔積液標本（均未進行抗癆治療），對照組采用常規(guī)檢測方法；研究組采用噬菌體生物擴增法，取0.1 ml噬菌體與患者胸腔待檢測菌液作用一段時間，之后加入0.1 ml殺毒劑混勻，在室溫條件下作用一段時間，加入5 ml液體培養(yǎng)基與1 ml具有指示性作用的指示細胞，混勻后和等量溶化了的瓊脂混合，待冷卻成型后置于37℃條件下培養(yǎng)16～24 h，計算噬菌斑總體數量。將兩組通過不同檢測方法所得出的檢測結果進行比對，以方便接下來的診斷工作。

1.3統(tǒng)計學方法 本次研究當中的所有數據均采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進行處理，計數資料采用χ2檢驗，P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2結果

研究組患者通過采用噬菌體生物擴增法來進行胸腔積液標本的檢測，陽性檢出19例，檢出率63.3%，明顯高于對照組12例，40%，標本檢測取得了比較理想的檢測效果，兩組患者檢測結果經統(tǒng)計學處理具有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表1。

3討論

結核性胸膜炎是臨床比較常見的結核病，由于其具有廣泛的傳染性，不僅對患者自身身體健康造成了較為嚴重的影響，同時對社會危害較大。我國是一個人口眾多的國家，一旦結核病大面積傳染蔓延開來，將會對社會秩序穩(wěn)定以及國民經濟建設造成較為嚴重的損害，因此結核病的防治工作顯得尤為重要。而控制該病發(fā)病率以及傳染的關鍵就在于早發(fā)現、早治療[3]。傳統(tǒng)檢測方法諸如涂片法、以PCR為代表的生物學診斷技術對結核性胸膜炎的診斷曾經起到了重要的診斷作用，然而隨著科學技術的不斷進步以及傳統(tǒng)檢測方法標本污染，試劑盒質量標準化等原因造成了大量假陽性或假陰性檢測結果出現，導致傳統(tǒng)檢測方法廣受質疑，不僅對患者自身病癥沒有起到良好的診斷治療作用，也導致醫(yī)患糾紛不斷發(fā)生，嚴重干擾了醫(yī)院以及結核科工作正常開展，產生的影響較為深遠[4]。

噬菌體生物擴增法（Phage amplified biologically assay，PhaB）是由Welson等于1997年建立的一種快速MTB檢測技術，其所主要應用的分枝桿菌噬菌體為D29，主要是由于D29不僅可以感染緩慢生長的MTB，還能夠感染恥垢、金色、偶然、胞內、草分枝桿菌等少數幾種快速生長的NTM[5]。通過使用噬菌體生物擴增法能夠快速檢測結核性胸膜炎胸腔積液標本，繼而達到診斷的目的，臨床應用價值較高。

根據目前已有研究資料表明，應用噬菌體生物擴增法能夠快速診斷結核性胸膜炎，可以區(qū)別死菌與活菌，具有明顯的優(yōu)越性，其主要的檢測原理為：結合分枝桿菌噬菌體只能感染具有活性特征的分枝桿菌，如患者胸腔積液中含有活性分枝桿菌，則分枝桿菌噬菌體將會吞噬分枝桿菌，相應檢測結果能夠清晰可見；如果檢測樣本中未含有活性分枝桿菌，則分枝桿菌噬菌體將會被隨后加入的殺菌劑全部殺死，因此后續(xù)加入的提示細胞由于未受到噬菌體感染，只能在培養(yǎng)皿中進行繁殖，不存在噬菌斑[6]。因此運用生物擴增法能夠快速檢測標本中的結合分枝桿菌，繼而檢出陽性分枝桿菌以為結核性胸膜炎患者診斷結果以及后續(xù)治療方案的制定提供數據資料參考，很大程度上提高了檢出率，促進了臨床診斷工作進一步發(fā)展，所起到的促進作用較為顯著[7]。通過本次研究，研究組患者通過采用噬菌體生物擴增法來進行胸腔積液標本的檢測，陽性檢出19例，檢出率63.3%，明顯高于對照組12例，40%，標本檢測取得了比較理想的檢測效果，證明了使菌體生物擴增法的實際診斷價值，能夠保障患者切身利益。

隨著我國老齡化問題日益嚴峻，老年結核性胸膜炎發(fā)病幾率逐年上升，已經成為了目前臨床診斷中較為常見的疾病之一。由于胸膜活檢的病理組織學以及胸腔鏡診斷陽性檢出率較高，但是需要進行有創(chuàng)性檢查，老年患者自身身體情況不允許采用對身體機能傷害較大的有創(chuàng)性檢測，導致此種檢測方法無法運用到常規(guī)檢查之中[8]。因此，隨著噬菌體生物擴增法研究與應用日臻成熟，其所具有的檢測結果比較準確，陽性結合分枝桿菌檢出率高、檢測方法簡便、經濟成本較低等特點成為了目前結核性胸膜炎患者尤其是老年患者的首選檢測方法，在很大程度上保護了老年結核性胸膜炎患者身體機能不受損傷，提高了實際的檢測效果。根據已有的研究資料分析，常規(guī)檢測方法中，涂片結合分枝桿菌檢出率目前僅為0～20%，胸腔積液檢測標本陽性檢出率也僅為8.5%～40%，對診斷老年結核性胸膜炎患者影響較大，無法滿足實際臨床診斷需求，已經逐漸退出臨床診斷使用[9]。

經過本次研究，進一步證實了噬菌體生物擴增法所具有的實際臨床診斷價值，老年結合性胸膜炎診斷結果準確、科學，為患者后續(xù)臨床治療提供了重要的數據支持，在實際臨床應用中取得了比較矚目的效果。不僅提高了患者自身陽性結核分枝桿菌檢出率，也為臨床主治醫(yī)生診斷工作提供了很大程度上的便利，值得在臨床診斷中推廣使用[10]。

參考文獻：

[1]張周云，熊國亮.噬菌體生物擴增法對結核病臨床診斷的意義[J].實驗與檢驗醫(yī)學，2010，12（01）：33-34.

[2]何建，李博文，向啟云，等.噬菌體生物擴增法對結核性胸膜炎的診斷價值[J].傳染病信息，2010，12（01）：33-35.

[3]徐建輝，陳永浩，陳志成.噬菌體生物擴增法與腺苷脫氨酶聯(lián)合檢測鑒別診斷老年結核性胸腔積液的價值[J].現代醫(yī)院，2010，12（12）：67-69.

[4]張威，溫華，康健，等.應用噬菌體生物擴增法診斷結核性胸膜炎臨床價值研究[A]中華醫(yī)學會、中華醫(yī)學會呼吸病學分會.中華醫(yī)學會呼吸病學年會-2011（第十二次全國呼吸病學學術會議）論文匯編[C].中華醫(yī)學會、中華醫(yī)學會呼吸病學分會，2011：1.

[5]韓春云，潘林梅，紀曉婷.噬菌體生物擴增法快速檢測結核分枝桿菌的臨床應用附182例分析[J].臨床肺科雜志，2011，12（03）：476.

[6]關巍.支氣管肺泡灌洗液噬菌體生物擴增法對老年不典型肺結核的診斷價值[J].中國老年學雜志，2011，12（09）：1637-1638.

[7]馮爽，劉樹業(yè)，張立，等.噬菌體生物擴增法與常規(guī)方法在結核分枝桿菌檢測中的比較[J].實用預防醫(yī)學，2011，12（05）：920-922.

[8]張威，溫華，康健.噬菌體生物擴增法在結核性胸膜炎早期診斷中的研究[J].山東醫(yī)藥，2011，12（24）：99-100.

[9]卿克勤，韓敏，樂軍.結核分枝桿菌噬菌體快速檢測方法的臨床應用評價[J].檢驗醫(yī)學，2012，12（09）：760-763.

[10]結核病臨床診治進展年度報告（2012年）（第一部分結核病臨床診斷）[J].中國防癆雜志，2013，12（06）：405-426.

編輯/肖慧