十一味益腎降糖片對DN大鼠血清CysC影響的實驗研究

摘要：目的 探討十一味益腎降糖片對DN大鼠血清CysC的影響作用。方法 采用高糖高脂飲食加鏈脲佐菌素腹腔注射的方法建立Ⅲ期DN大鼠模型，設(shè)立空白組（A組）、模型組（ B組）、十一味益腎降糖片組（C組）、厄貝沙坦治療組（D組）。灌胃12W后，檢測各組大鼠空腹血糖（FBG）、血清胱抑素（CysC）等指標。結(jié)果 十一味益腎降糖片可改善DN大鼠的一般狀況，降低FBG、CysC等指標。結(jié)論 十一味益腎降糖片可降低Ⅲ期DN大鼠FBG、CysC等指標；減輕腎臟病理損害，顯著保護腎臟功能。

關(guān)鍵詞：十一味益腎降糖片；糖尿病腎病；腎損傷

糖尿病腎病（Diabetic Nephropathy，DN）是糖尿病微血管病變最危險的并發(fā)癥之一[1]。近幾十年來中醫(yī)藥防治DN的研究取得了積極進展，且逐漸顯示出較大的潛力和廣闊應(yīng)用前景。我們通過前期臨床觀察十一味益腎降糖片治療早期糖尿病腎病，已取得較好的臨床療效[2]。因此本研究以十一味益腎降糖片對Ⅲ期DN大鼠模型進行干預(yù)，以厄貝沙坦為對照，觀察其對早期DN的干預(yù)作用，探討其對DN可能的作用機制，為進一步臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1資料與方法

1.1一般資料 選用清潔級雄性SD大鼠60只，2～3周齡，體重（80±5）g，購于河南省實驗動物中心，許可證號：SCXK（豫）2010-0002。

1.2藥物與試劑 十一味益腎降糖片（黃芪、生地黃、鬼箭羽等） 0.3g/片，由開封市中醫(yī)院制劑室提供；厄貝沙坦片75mg/片，由修正藥業(yè)集團提供；各指標交由開封市中醫(yī)院檢驗室；鏈脲佐菌素（STZ）由Sigma公司提供。

1.3方法 選用雄性SD大鼠40只，適應(yīng)性飼養(yǎng)1w后，隨機分為四組：空白組（A組）、模型組（B組）、十一味益腎降糖片組（C組）、厄貝沙坦組（D組）。A組給予普通飼料喂養(yǎng)，B～D組分別給予高脂高糖飼料喂養(yǎng)。4w后，各組過夜禁食14h（不禁水），稱重后B～D組分別給予一次性腹腔注射STZ55mg/kg （溶于0.1mol/L、pH4.5的枸椽酸鈉緩沖液中），A組給予相應(yīng)量生理鹽水。72h后連續(xù)三次（0d，1d，2d）尾尖取血測定血糖均≥16.7mol/L， 尿糖強陽性（+++～++++） ， 24h尿量為造模前的150%和24h尿蛋白排泄>30mg/24h，則造模成功。模型建立1w后，C組以十一味益腎降糖片（450mg·kg-1·d-1）藥液灌胃，D組以厄貝沙坦（25mg·kg-1·d-1）藥液灌胃，A、B組灌以相應(yīng)量生理鹽水。第12w末將各組大鼠分別置于代謝籠中 （禁食不禁水），之后分別眶下取血5ml，測定大鼠各生化指標。最后將動物全部折頸處死。

1.4統(tǒng)計學方法 采用SPSS 17.0進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標準差（x±s）表示，統(tǒng)計顯著性水平為P<0.05，有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

2.1一般情況 A組大鼠飲食正常，反應(yīng)敏捷，皮毛柔順有光澤，肌肉豐滿，尿量正常。造模后B～D組均出現(xiàn)明顯的多飲、多尿、多食癥狀，并逐漸出現(xiàn)精神萎靡，皮毛粗糙，反應(yīng)遲鈍，少動抱團等狀況。灌胃后：C、D組的大鼠精神不同程度轉(zhuǎn)好，皮毛仍略粗糙，活動趨向正常；A組大鼠精神狀態(tài)如前；B組大鼠則見多飲、多尿、多食癥狀，精神萎靡，皮毛無光澤，形體消瘦，反應(yīng)遲鈍等表現(xiàn)。期間，A組無死亡，B組死亡2只（造模失敗），C組死亡1只，D組死亡1只，均為灌胃導(dǎo)致死亡，無統(tǒng)計學意義。

2.2十一味益腎降糖片對DN大鼠各項生化指標的影響 至灌胃第12w末，A組大鼠的FBG、CysC均正常；與B組相比，有顯著性差異（P<0.05）。給予灌胃后，C、D組各指標仍高于正常范圍。與B組相比，C、D組的FBG、CysC均明顯降低，有顯著性差異（P<0.05）；C、D組間比較無顯著性差異（P>0.05），見表1。

3討論

DN早期病理改變是腎小球體積增大、腎小球毛細血管基底膜增厚和腎小球細胞外基質(zhì)增多[3]。DN早期常無臨床癥狀，常規(guī)腎功能檢查多無異常。一旦出現(xiàn)臨床表現(xiàn)時，預(yù)后較差。因此，早期診斷和動態(tài)觀察DN的發(fā)生與發(fā)展有重要意義。

胱抑素C在腎小球受損早期或輕度受損時，它較血清BUN、Cr有更高的敏感性和特異性，對于評價腎小球濾過率有非常重要的價值[4]。

十一味益腎降糖片是根據(jù)\"脾腎虛損是DN的病機基礎(chǔ)，氣陰兩虛、陰陽兩虛是DN病理機制，瘀血、痰濁、水濕是兼加之邪\"的觀點，研制而成的中藥制劑（豫藥制字Z04020164）。本研究發(fā)現(xiàn)，該制劑能夠改善DN大鼠的一般狀況，降低FBG、CysC等。說明其可減輕DN腎臟病理損害、有效保護腎臟。本研究證實該藥有較好的改善DN大鼠腎功能的作用，其機理可能與降低血糖、改善腎臟組織病理結(jié)構(gòu)，阻止腎小球硬化的發(fā)生有關(guān)，為進一步開展DN的臨床治療提供更加詳實、可靠的佐證。

參考文獻：

[1]何雪梅，蔣洪敏.血清同型半胱氨酸、胱抑素C及尿微量白蛋白聯(lián)合檢測在糖尿病早期腎病中的意義[J].實用預(yù)防醫(yī)學，2010，1（17）：41-43.

[2]婁靜.龐國明主任醫(yī)師治療糖尿病腎病臨床三法[J].中醫(yī)臨床研究，2004，4（4）：57-58.

[3]Eikmans M， Baelde JJ， de Heer E， et al. ECM homeostasis in renal diseases： a genomic approach[J].J Pathol， 2003，200（4）：526-36.

[4]吳曉蓮.血清胱抑素C對2型糖尿病腎損傷的早期診斷意義[J].浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志，2007，17（8）：493-494.

編輯/申磊