盾葉薯蕷皂苷元的提取與含量測定

摘 要：自上世紀70年代起，我國就開始在皂苷元生產上采用自然發酵、酸水解、酶解、微生物法等方法對薯蕷干品原料處理提取皂苷元。本文對薯蕷鮮品原料提取皂苷元方法進行了探討，以期改進生產工藝，提高皂苷元提取效率。

關鍵詞：盾葉薯蕷；提取方法；含量測定

薯蕷皂苷元是從薯蕷屬植物的根莖中所含甾體皂苷經酸水解、萃取獲得，因其具有溶血、降血脂、抗菌等作用而備受重視，是重要的醫藥化工原料。盾葉薯蕷（Dioscorea Zingiberensis C.H.Wright）俗稱“黃姜”，是我國主要的種植品種，也是薯蕷皂苷含量較高、栽培種植面積較廣的一種品種。

一、試驗材料

鮮品盾葉薯蕷為湖北十堰周邊區域栽培2～3年的原料，由十堰方坤工貿有限公司提供。儀器：722S分光光度計（上海精密科學儀器有限公司），JJ-2高速組織搗碎機（金壇市恒豐儀器廠），索氏提取器。試劑：無水乙醇、乙酸酐、H2SO4、CHCL3、120#溶劑汽油、分析純鹽酸、L.B試劑。

二、試驗方法和結果分析

1.試驗方法

將鮮品原料用搗碎機粉碎至1～5毫米顆粒，植物體內自身的酶在一定環境條件下酶解部分淀粉、糖等物質，同時可以把皂苷分子從植物組織中游離出來。在水解過程中，排除一些水解干擾因素，降低酸的濃度、縮短水解時間，其回收率高于干品原料。

2.試驗工藝路線

鮮品→清洗泥沙→勻漿機粉碎至1～5毫米→發酵酶解37℃3至5天→酸水解4～6h→水解物洗至中性→干燥→干燥產物用120#溶劑汽油回流10h→粗皂苷元用乙醇結晶得到薯蕷皂甙元。盾葉薯蕷鮮品按3.（2）方法，做三次提取，每次500g，平均數為3.93g，占鮮品含量為0.78%，溶點在195℃以上，符合標準要求。

3.分光光度法做含量測定

（1）顯色試劑（Liebermann-Barcharacl）反應。

（2）標準溶液吸光度測定。配成100g/L的標準溶液，從標準液中取1ml，滴入25ml容量瓶中，用CHCl3滴加到刻度，塞上軟木塞放入50℃恒溫水浴40分鐘，取出冷至室溫，用L.B試劑做空白對照，在460nm處進做比色測定，讀取吸光度。以縱坐標為吸光度，橫坐標為含量做標準曲線。

（3）待測溶液取10g鮮品粉碎，加入50ml 15%H2SO4，回流4h，過濾水解物洗至中性烘干。溶于200mlCHCL3回流30分鐘，提取液在1升容量瓶中定容后，取1ml，按3.（2）方法操作，讀取吸光度。

（4）標準曲線的繪制。精密吸取對照溶液10～100×10-6g/ml一組，按3.（2）方法測得的吸光度數據進行處理，以吸光度（y）對薯蕷皂苷元濃度x回歸，得回歸方程：y=0.01988x-0.1953，γ=0.9998。再以（y）為縱坐標，x為橫坐標作標準曲線繪制。線性范圍15～100×10-6g/ml，標準誤差估計為0.00103。

（5）標準曲線法測定結果分析。按3.（3）方法將樣品制備得的樣液用3.（2）方法在460nm處測定吸收度，依標準曲線繪圖算其濃度數值后，以下面公式計算薯蕷中皂苷元的含量。

鮮品盾葉薯蕷皂苷元含量%=■×100%

實驗數據如下表：

■

三、小結

盾葉薯蕷屬于多年生草本植物，隨著該植物生長齡級的增加和淀粉等多糖物質質量的增加，其糖苷含量越來越高。薯蕷鮮品生產工藝，一是可以破壞維管束、木栓細胞和粘液細胞并容易截短纖維，有利于激活酶作用，粉碎粒度可為1～5mm，勻漿機功率選800r/min；二是有利于濾棄纖維渣及大分子團的淀粉沉降，使水溶性糖苷處于懸浮游離態，利用薯蕷植物內源酶和外源酶自然發酵。發酵后的上清液回流循環使用，懸浮液濃縮，發酵溫度控制在38℃±2℃值和發酵時間不易超過3～5天為最好；最后是減輕涼曬加工的勞動強度或霉變損耗，減少生產皂素廠家的堆酵場地，而且更有利于縮短水解時間。

參考文獻：

[1]郭劍偉.薯蕷皂素提取工藝研究進展[J].藥學專論，2011，20（18）：13-15.

[2]彭司勛.藥物化學[M].北京：化學工業出版社，1998：400-447.

[3]湯興利.盾葉薯蕷皂素提取工藝及檢測方法研究進展[J].中藥材，2004，27（11）：877-880.