【摘要】目的 探究臨床常規檢驗中如何準確檢測糞便隱血,為臨床治療提供可靠的診斷依據。方法:選取消化內科收治的100例臨床住院患者,采用化學法和膠體金免疫法實施糞便隱血檢測。結果:化學法假陽性率為15%,膠體金免疫法假陰性率為 11%。結論:飲食、藥物等因素會干擾化學法檢測結果造成假陽性;膠體金免疫法有靈敏度高、抗干擾能力強等特點,但易受抗原濃度影響造成假陰性。因此,常規檢測中應結合使用兩種方法,可提高臨床檢測的準確性。
【關鍵詞】隱血;檢測;膠體金免疫法
【中圖分類號】R4 【文獻標識碼】B 【文章編號】1671-8801(2014)02-0116-02
隱血指腸道或消化道有潛在出血且肉眼觀察不到血色;紅細胞被分解,顯微鏡下也無法準確判斷出血情況。糞便隱血檢驗是臨床上檢測腸道潰瘍、消化道出血、惡性腫瘤的常用指標之一[1]。過去臨床上普遍采用化學法檢測糞便隱血,但化學法易受藥物、飲食等因素干擾造成假陽性結果。近年臨床上應用膠體金免疫法可排除上述干擾,但實際發現膠體金免疫法假陰性結果易誤導臨床診療。本組研究對比分析兩種檢測法,為臨床提供準確可靠的診斷依據。
1 材料與方法
1.1 檢測試劑 化學法:3%過氧化氫溶液與鄰聯甲苯胺冰醋酸試劑;免疫法:膠體金免疫法糞便隱血檢測試劑盒,附帶一次性驗便杯與取樣棒。以上兩種試劑均符合《全國臨床檢驗操作規程》配制標準[2]。
1.2 檢測標本來源 選取2012年3月~6月收治的100例臨床住院患者所留新鮮糞便標本,其中男性58例,女性52例,年齡40~72歲,平均61.2歲。
1.3 方法及結果判斷 化學法:用采樣棒從患者糞便6個不同部位取樣,涂在白色干凈的濾紙片上,順次滴加3%過氧化氫溶液與鄰聯甲苯胺冰醋酸試劑各1~2滴,呈現藍色則為陽性。免疫法:預先將驗便杯中放入0.5毫升蒸餾水,用采樣棒從患者糞便6個不同部位取樣并放入驗便杯中攪拌均勻,取出單條膠體金試紙插入驗便杯中,5min后觀察入出現兩條紅線即為陽性[3]。
2 結果
2.1 本組研究中化學法陽性而免疫法陰性的患者為26例,其中11例已確診為腸道或消化道出血,糞便性狀糞便為帶血便或柏油樣便,其他15例無腸道或消化道出血反應,考慮為藥物或食物引起的假陽性,可見化學法的假陽性率為15%;免疫法的假陰性為11%。
2.2 本組研究中化學法陰性而免疫法陽性的患者為6例, 均已確診為腸道或消化道出血。但免疫法不受外界因素干擾,無假陽性結果。考慮為患者糞便樣本中血紅蛋白含量低于化學法檢測下限所致,可見免疫法的檢測靈敏度高于化學法。
3 討論
臨床常規檢測一直沿用化學法,基本原理是血紅蛋白中含有鐵血紅素,能催化試劑中的過氧化氫釋放新生成的氧素氧化色源物質顯色[4]。顯色的時間與深淺可大致判定血紅蛋白含量,可報告范圍是(±~++++),臨床上由此大致診斷患者出血量大小。但化學法檢測易受到諸多因素干擾,比如臨床檢測前3h食用肉類、動物肝臟、維生素C、鐵劑或富含過氧化酶的蔬菜,瓜果都可能造成檢測結果的假陽性。臨床檢測對此類情況無法控制,容易造成臨床誤診。此外,檢測中配制的冰醋酸在一定環境下容易形成冰晶,易對操作人員構成不同程度傷害。
膠體金免疫法近些年憑借高靈敏性、高特異性等優點被廣泛應用于臨床檢測。膠體金免疫法不宜受到藥物、飲食等外在因素的感染,易早期檢測患者糞便樣本中的血紅蛋白,且試劑穩定易于保存。此法基本原理是應用單克隆或多克隆的雙抗體夾心膠體金顯色技術。膠體金試紙條纖維素膜上標記為抗人血紅蛋白抗體,只能與人血紅蛋白特異性結合,而不與其他動物血紅蛋白結合。因此,免疫法檢測糞便隱血時只與含有人的血紅蛋白結合反應呈陽性反應,特異性很高,不會出現假陽性。本組研究顯示6例腸道或消化道出血患者免疫法檢測陽性而化學法為陰性,可見化學法對微量濃度血紅蛋白下限無法檢測。證明膠體金免疫法相比化學法檢測靈敏度高。
膠體金免疫法中的檢測試紙條所含抗人血紅蛋白抗體含量有限,故此法受檢測線范圍限制。當受檢糞便中的血紅蛋白含量低于試紙條中抗人血紅蛋白抗體濃度時,形成的氧素氧化色源物質減少,以致于出現假陰性結果,即后帶現象[5]。消化道出血患者漏出液所含血紅蛋白在消化道中停滯時間過長,受到蛋白質和胃酸的共同作用,可能被充分水解或完全消化而失去抗原決定簇;同時腸道內外特異性細菌的作用也可使血紅蛋白失活,導致假陰性結果。本組研究中11例確診的消化道出現患者免疫法檢測為陰性驗證了上述兩種現象的可能性。免疫法檢測只能定性,不能定量檢測;對檢測消化道出血患者的臨床療效觀察具有局限性;抗原抗體易受到溫度影響,當氣溫偏低時糞便陰性樣本容易出現陽性結果延后[6]。
綜上所述,本組研究中化學檢測法的陽性檢測率較高,但易受到諸多因素干擾,造成臨床誤診;免疫法具體特異性強、靈敏度高的優點,但假陰性結果也易造成臨床誤診。因此,臨床檢測中建議兩種方法結合使用,對帶血便或柏油便而膠體檢測法為陰性的樣本可用化學法檢測補充。此外,消化道出血患者病情不斷演變,單次送檢糞便樣本不能全面反映腸道或消化道出血的真實情況,臨床上對疑有隱匿且消化道出血、腸道潰瘍的惡性腫瘤患者應連續采集3次樣本做追蹤檢測,以便獲取準確的檢測結果為臨床診斷提供可靠的參考依據。
參考文獻:
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