清腦益智方對谷氨酸損傷神經元保護作用的體外實驗分析

【摘要】目的：分析清腦益智方對多發梗塞性癡呆或血管性癡呆的實驗效果觀察。方法：采用體外細胞培養方法，分析中藥對谷氨酸損神經元的作用。結果：清腦益智方對星形膠質細胞的增殖沒有影響（3H-TdR），并且能夠顯著提高谷氨酸損傷后神經元的存活率；提高細胞的存活能力；降低孵育液中LDH的含量【1】。結論：經本實驗研究，清腦益智方能夠起到對神經元的較好的保護效果。

【關鍵詞】神經元損傷；谷氨酸；清腦益智方；實驗研究

【中圖分類號】R4 【文獻標識碼】B 【文章編號】1671-8801（2014）02-0077-02

清腦益智方在臨床中多應用于多發梗塞性癡呆或血管性癡呆患者的治療當中。此次實驗為探討清腦益智方的作用機理，采用含有中藥有效成分的腦脊液，利用神經元谷氨酸損傷模型從神經膠質細胞和神經元互相作用的角度進行離體實驗研究。

1 材料與方法

1.1 體外培養【2】

2 結果

2.1 中藥對谷氨酸損傷神經元存活的影響

谷氨酸損傷模型組神經元死亡率明顯高于空白對照組，再加入中藥腦脊液培養液后，神經元死亡率明顯下降，而正常腦脊液培養液組未見次變化。

2.2 中藥對谷氨酸損傷神經元培養液中乳酸脫氫酶含量的影響

谷氨酸損傷模型組培養液中LDH含量明顯高于空白對照組，在加入中藥腦脊液培養液后，LDH含量較模型組明顯下降。

2.3 中藥對星形膠質細胞增殖的影響

正常腦脊液和中藥腦脊液對星形膠質細胞的增殖均無影響，但正常血清和中藥血清均出現對星形膠質細胞的增殖抑制作用。如表1；2.4 中藥對星形膠質細胞增殖的影響正常腦脊液和中藥腦脊液對星形膠質細胞的增殖均無影響，但是正常血清和中藥血清均出現對星形膠質細胞的增殖抑制作用。如表2；

表1 各組OD值比較

3 討論

膠質細胞構成中樞神經元生存的微環境，對神經元的發育、生長以及損傷后再生發揮重要作用。在一些體外實驗中已被證明，星形膠質細胞可被某些因素誘導而分泌神經營養因子。本實驗結果表明，中藥清腦益智方通過星形膠質細胞間接地對谷氨酸損傷神經元起到保護作用，推論可能是由于中藥清腦益智方刺激星形膠質細胞分泌神經營養因子所致。清腦益智方主要針對中風后腦內瘀熱化毒、毒損腦絡所設，對于興奮性氨基酸引起的神經興奮毒性，并非直接針對病因治療，而是對于興奮毒性造成的神經元這樣一種結果間接的發揮其整合調節作用。

作為一種藥理實驗方法和手段，中藥血清藥理為我們拓展了思路，但它對于血腦障礙以內的細胞是否也同樣適用？目前報道仍較少。本實驗研究結果發現，無論是空白血清還是中藥血清均沒有出現明顯的治療作用，遵循血清藥理學的思路，我們采用腦脊液來開展研究，結果顯示此種方法可以克服血清藥理學的某些局限，姑且稱這種方法為“中藥腦脊液藥理學”。

參考文獻：

[1]梅建勛，張伯禮，陸融. 清腦益智方對谷氨酸損傷神經元保護作用的體外實驗觀察[J]中藥新藥與臨床藥理，2001.12（04）：252-255

[1]Aleksandra PG，Donald B，EtsuroU.The inhibitory ef-fects of amyloid on glutamate and glucose by cultured astrocytes[J].Brain Res，1977，754：65-71.

[1]Sreit WJ.The role of microglia in brain injury[J]. Neuro-toxicology，

1996，17（3-4）：671-678.