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婦科千金片對大鼠盆腔炎子宮超微結構的研究

2014-04-29 00:00:00吳強
循證護理 2014年20期

【摘要】目的:探討婦科千金片治療盆腔炎的作用機制。方法:選用Wistar大鼠,行子宮內接種混合菌液造急性盆腔炎模型。將大鼠隨機分為空白組、假手術組、模型組、婦科千金片低、中、高劑量組、婦炎康組、羅紅霉素組,藥物治療后,取子宮組織,采用超微電鏡觀察組織病理變化。結果:正常組、假手術組的子宮內膜細胞超微結構正常;模型組的子宮內膜上皮細胞脫落、壞死、變性、纖維增生;婦科千金片低、中劑量組的子宮內膜上皮細胞水腫、脫落、壞死,纖維增生。婦科千金片高劑量組子宮內膜間質細胞線粒體水腫、空泡化外,均正常。婦炎康組子宮內膜上皮脫落、膠原纖維增生、間質細胞胞漿水腫、細胞萎縮、粘膜下層細胞線粒體廣泛空泡化;羅紅霉素組子宮內膜細胞超微結構基本正常。結論:婦科千金片對盆腔炎模型大鼠均有一定的治療作用。

【關鍵詞】婦科千金片;急性盆腔炎;超微結構

婦科千金片對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌和白色念珠菌均有抑菌作用,對環磷酰胺所致免疫低下的小鼠,具有增加小鼠血清溶血抗體、提高小鼠細胞吞噬百分率和吞噬指數的作用[1]。為了進一步探討其藥理作用, 我們運用超微電鏡觀察組織病理變化。將婦科千金片對大鼠盆腔炎模型子宮內膜細胞超微結構的影響進行了實驗研究, 現將結果報告如下。

1.1 實驗動物 雌性Wistar大鼠120只,體重180~220g,鼠齡8周,由上海西普爾—必凱實驗動物有限公司提供(SPF級,合格證號2008-0016),每籠圈5只。

1.2造模及分組 將實驗大鼠分別稱重,腹部常規消毒,10%烏拉坦按0.075ml/kg體重,大鼠腹腔注射,待大鼠麻醉后,用1ml注射器針頭抽取0.2ml含3×109個/ml的混合菌液(此混合菌液由金黃色葡萄球菌、大腸桿菌,解脲脲原體),左手持鼠尾提起大鼠,用10ml注射器的針頭于陰道底部的子宮頸分叉處小心進入一側宮腔內,針頭宮腔內來回抽拉2次,然后朝卵巢方向推注菌液0.1ml,同樣操作步驟將0.lml菌液注入另一側子宮,注射完畢后,明膠海綿放置于陰道底部的子宮頸,以防菌液漏出。假手術組,手術操作同上,但針頭進入子宮后不來回抽動,注射等量0.9%生理鹽水,空白組不予任何處理。

大鼠造模造模術后第4天隨機分為正常組、假手術組各10只,模型組、婦科千金片低、中、高劑量組、婦炎康組、羅紅霉素組各9只。按大鼠與人等效劑量換算方法計算出各大鼠給藥劑量,各藥均配成10ml/kg給藥溶液,每天定時經口灌胃給藥治療,每日1次,連續21天。

1.3 收集標本

給藥結束后的第2天,以10%烏拉坦0.075ml/kg 腹腔注射麻醉。取大鼠子宮組織稱重,用2.5%戊二醛固定,4℃冰箱保存,供電鏡觀察子宮內膜組織的超微結構。

1.4 檢測方法

大鼠子宮內膜超微結構的電鏡標本制作程序:子宮組織用2.5%戊二醛固定24小時,2%鋨酸2小時,50%、70%、90%、100%丙酮梯度脫水,每級10分鐘,純環氧樹脂包埋劑(Epon812、MNA、DMP-30、DDSA)包埋成塊,60℃修塊定位,超薄切片(厚度為500A°),電子染色,透射電鏡觀察子宮內膜組織的超微結構,拍照。

2 結果與分析

電鏡觀察結果:正常組子宮內膜上皮柱狀排列、皮下固有層正常,微絨毛正常;假手術組子宮內膜上皮細胞、皮下固有層正常;模型組子宮內膜上皮細胞脫落、壞死、變性、纖維增生;婦科千金片低劑量組子宮內膜上皮細胞水腫、脫落、壞死,纖維增生;中劑量組子宮內膜上皮有少量微絨毛、間質細胞水腫;高劑量組子宮內膜間質細胞線粒體水腫,空泡化外,均正常;婦炎康組子宮內膜上皮脫落、膠原纖維增生、間質細胞胞漿水腫、細胞萎縮、粘膜下層細胞線粒體廣泛空泡化;羅紅霉素組子宮粘膜下層、腺體及間質細胞正常。

3 討論

正常大鼠子宮內膜上皮的超微結構:上皮細胞呈柱狀,形態規則、一致,細胞排列整齊,細胞基底面位于基底膜上,細胞頂部圍成腺腔;分泌細胞頂部呈圓頂狀,游離面的微絨毛短少且直、直徑大小一致,頂部胞質中可見較多大小不一的電子致密顆粒;纖毛細胞游離面的纖毛短而少,結構典型,纖毛的基底小體位于頂部胞質內;胞質內線粒體為卵形或長形;粗面內質網分散,其池短而窄;細胞核規則,呈卵圓形,位于細胞中部,輪廓平滑;核仁明顯,呈網線狀;核質著色淡、均勻。基底膜完整、清晰,較平直[2] 。有研究盆腔炎模型大鼠子宮內膜上皮細胞的超微結構:微絨毛明顯大量脫失,黏膜上皮明顯變薄,柱狀上皮矮平,線粒體及粗面內質網減少,糖原顆粒明顯減少,胞核雙層膜結構局部融合,黏膜下炎細胞浸潤[3]。

本研究模型組大鼠的子宮的內膜上皮細胞脫落、壞死、變性、纖維增生,顯示模型成功。婦科千金片高劑量組及羅紅霉素組的子宮內膜上皮細胞均較模型組有所好轉,顯示婦科千金片對大鼠急性急性盆腔炎有一定的治療作用。至于婦炎康對大鼠急性盆腔炎子宮內膜上皮細胞的作用不明顯,尚有待擴大樣本,進一步研究。

參考文獻:

[1] 張祖蕩,潘善慶.婦科千金片的藥效學研究.湖南中醫雜志[J].1998,14(2):57。

[2] 張延齡.細胞凋亡與外科.國外醫學外科學分冊[J].1998,25(l):2-4。

[3] 王歷,李秀明. 桃核承氣湯治療熱郁血瘀型盆腔炎大鼠的實驗研究[J].2007,35(5):30-31。

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