淺談高效液相色譜法及在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用

郝瑞雯

摘 要：高效液相色譜法是一種對(duì)物質(zhì)進(jìn)行有效分離的技術(shù)方法，其在藥品檢驗(yàn)領(lǐng)域已經(jīng)得到了廣泛的應(yīng)用。在檢測器自動(dòng)化程度不斷提高的過程中，各種現(xiàn)代化技術(shù)的出現(xiàn)必將會(huì)推動(dòng)高效液相色譜法的飛速發(fā)展。本文主要對(duì)高效液相色譜法的概念與特點(diǎn)進(jìn)行了分析，其后對(duì)其在藥品檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用進(jìn)行了分析，以供參考。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜法；藥品檢驗(yàn)；應(yīng)用

一、高效液相色譜法概述

高效液相色譜法，簡稱HPLC，作為色譜法的一個(gè)重要分支，工作機(jī)理主要是運(yùn)用高壓輸液泵實(shí)現(xiàn)流動(dòng)相向固定色譜柱的注入，然后讓進(jìn)樣閥完成待檢測樣品的注入。在流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱之后，會(huì)將色譜柱內(nèi)待測樣品的成分進(jìn)行分離，并依次進(jìn)入檢測器中。因此，HPLC是通過對(duì)檢測樣品的分離，實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的化學(xué)分析。

二、高效液相色譜法的特點(diǎn)

高效液相色譜法具有“三高一廣一快”的特點(diǎn)。高壓：HPLC的流動(dòng)相為液體，流經(jīng)色譜柱時(shí)，受到的阻力較大，為了能迅速通過色譜柱，必須對(duì)載液加高壓；高效：分離效能高。可選擇固定相和流動(dòng)相以達(dá)到最佳分離效果，比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍；高靈敏度：紫外檢測器可達(dá)0.01ng，進(jìn)樣量在μL數(shù)量級(jí)；應(yīng)用范圍廣：百分之七十以上的有機(jī)化合物可用高效液相色譜分析，特別是高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性、熱穩(wěn)定性差化合物的分離分析，顯示出優(yōu)勢；分析速度快、載液流速快：較經(jīng)典液體色譜法速度快得多，通常分析一個(gè)樣品在15～30分鐘，有些樣品甚至在5分鐘內(nèi)即可完成，一般小于1小時(shí)。

三、高效液相色譜法在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用

（一）HPLC法在測定藥品含量中的應(yīng)用

在對(duì)藥品中各組分、各雜質(zhì)含量的測定時(shí)，應(yīng)用HPLC進(jìn)行測定，可以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。比如在進(jìn)行吡羅昔康含量含量測定時(shí)，由于這種藥品是一種酰胺類化合物，因而極其被水解與氧化，其水溶液的化學(xué)性質(zhì)極不穩(wěn)定，因而可以用HPLC法進(jìn)行測定。在實(shí)際操作中，可以選擇0.01mol/L的鹽酸甲醇溶液作為溶劑，從而在保證吡羅昔康的溶解度的基礎(chǔ)上，增加了其溶液的穩(wěn)定性，為檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性提供了保證；運(yùn)用HPLC法測定螺旋霉素發(fā)酵液中有機(jī)酸含量，可以為螺旋霉素代謝機(jī)制的分析提供數(shù)據(jù)支持；運(yùn)用HPLC法測定鹽酸萘甲唑啉鼻用劑型中的鹽酸萘甲唑啉含量，首先運(yùn)用乙腈將凝膠基質(zhì)中的高分子物質(zhì)析出，解決了液相柱被高分子物質(zhì)阻塞的問題，減少了檢測中的干擾因素。

（二）HPLC法在抗生素物質(zhì)檢測中的應(yīng)用

第一，檢測抗生素當(dāng)中的雜質(zhì)，保證抗生素藥效符合標(biāo)準(zhǔn)。在臨床上，通過對(duì)抗生素類藥物引發(fā)不良反應(yīng)的成分進(jìn)行檢測，主要是由于抗生素原料中的降解產(chǎn)物、中間體以及聚合物等，這些都會(huì)造成使用者引發(fā)不良反應(yīng)。通過HPLC法對(duì)抗生素類藥物進(jìn)行檢驗(yàn)，對(duì)于藥物中雜質(zhì)的限量控制具有重要意義；第二，檢測非抗生素類藥物中的抗生素含量。運(yùn)用HPLC法可以對(duì)各種藥物中的抗生素含量進(jìn)行檢測，進(jìn)而將其控制在合理的范圍內(nèi)，防止抗生素的濫用。

（三）HPLC法在手性藥物質(zhì)量中的應(yīng)用

不同手性藥物在體內(nèi)發(fā)揮的作用不同，一種可能是高效低毒的，而另一種可能有毒害作用。手性制藥就是利用化合物的這種原理，開發(fā)出藥效高、副作用小、藥物的專一性高的藥物。一般情況下獲得手性化合物有以下幾種方法：天然物的提取、生物合成、外消旋體拆分、不對(duì)稱合成等方法。目前，手性藥物常見的分析手段中最有效的是色譜分離方法，主要有高效液相色譜、高效毛細(xì)管電泳色譜及超臨界流體色譜等。總之，HPLC在手性藥物代謝、質(zhì)量控制及手性新藥研究等方面發(fā)揮重要作用，具有十分廣闊的應(yīng)用和發(fā)展前景。

（四）HPLC法在藥物鑒別中的應(yīng)用

由于不同的藥物其藥用價(jià)值也有所差別，因而必須要做好藥物的鑒別工作，保證做到物盡其用。HPLC法在藥物鑒別中的應(yīng)用主要是通過對(duì)藥物保留時(shí)間的分析，得出藥物定性的參數(shù)，包括組分的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)。比如在對(duì)南北五味子鑒別的過程中，其固定相為C18柱，流動(dòng)相是比例為65：35的甲醇-水，對(duì)于流速應(yīng)控制在1.0mL/min，對(duì)于檢測波長應(yīng)選擇250nm，從而對(duì)南北五味子各組分的含量進(jìn)行檢測。由此可以看出，在藥物鑒定中應(yīng)用HPLC法，可以為藥物的鑒別提供新的技術(shù)與思路方法，實(shí)現(xiàn)藥物鑒別的高效發(fā)展。

（五）HPLC法在檢測中藥質(zhì)量中的應(yīng)用

中藥的成分復(fù)雜，質(zhì)量檢測難度大，常規(guī)的檢測方法很難取得準(zhǔn)確的檢測結(jié)果，而運(yùn)用HPLC法能夠有效解決中藥成分多樣性、分離難度大的問題，已經(jīng)成為測定中藥有效成分含量的有效方法之一。HPLC法能夠快速分離中藥的待測成分與其他雜質(zhì)，為中藥質(zhì)量檢查、成分鑒別以及含量測定奠定基礎(chǔ)。因此，HPLC法在中藥質(zhì)量檢測中的應(yīng)用，轉(zhuǎn)變了傳統(tǒng)看、摸、聞、嘗的中藥性狀特征鑒別方法，使得中藥有效成分得以定量控制，從而有利于促使中藥質(zhì)量檢測向現(xiàn)代化、標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化的方向發(fā)展。

四、結(jié)語

綜上所述，隨著我國經(jīng)濟(jì)技術(shù)的不斷發(fā)展以及人們生活質(zhì)量水平的提高，我國在醫(yī)療衛(wèi)生與醫(yī)療藥物方面取得了較大的發(fā)展，因此做好藥品的檢驗(yàn)工作具有重要的意義。本文主要分析了高效液相色譜法在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用，主要從測定藥品含量、檢測有關(guān)物質(zhì)、抗生素檢測、手性藥物質(zhì)量檢測、藥物鑒別以及檢測中藥質(zhì)量方面進(jìn)行了分析，以期研究人員重視高效液相色譜法的應(yīng)用。

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