病毒感染與川崎病的相關性探討

高樹英，李新愛，李瑞燕

(1莒縣人民醫院，山東莒縣276500;2濟南護理職業學院)

川崎病(KD)又稱皮膚黏膜淋巴結綜合征，是一種病因未明，好發于5歲以下兒童的發熱出疹性疾病，大多數學者認為可能是由病原微生物入侵具有遺傳易感性的患兒，通過超抗原、熱休克蛋白等觸發體內異常免疫反應而引起［1］。流行病學調查顯示其發病率逐年升高［2，3］;冠狀動脈并發癥發生率較高［4］。KD急性期表現與很多病毒感染的臨床表現非常相近。文獻報道上呼吸道感染與KD發生有關［5］;呼吸道病毒感染的KD患兒發生冠狀動脈損害的機率更高［6］。2007年1月～2011年12月，我們收治KD患兒80例，現分析其病毒感染情況及其與KD發生的關系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2007年1月～2011年12月住院的80例KD患兒為觀察組，均依據日本KD研究委員會制定的標準［7］納入;同期住院的發熱性疾病(包括口腔炎、上呼吸道感染、肺炎等)患兒100例為對照組。入選患兒男100例，女80例，年齡4個月～10歲，平均3歲1個月;兩組患兒年齡比較無統計學差異。

1.2 病毒感染檢測 臨床收集KD患兒靜脈血，離心(2 500 r/min)后去除上清液，提取沉淀細胞備用。取各組細胞各107個提取總RNA，加入1 mL裂解液，離心取上清，加氯仿，離心后取水相，加無水乙醇后離心，加去蛋白液、漂洗液，最后收集RNA，測定各組總RNA。按RT-PCR說明書加入1 μg總RNA，建立20 μL逆轉錄體系。PCR擴增使用總體積為20 μL的反應體系。目的基因為EB病毒、單純皰疹病毒、冠狀病毒OC43/229E和NL63、呼吸道合胞病毒A和B、副流感病毒1和4。擴增條件為95 ℃變性3 min，95 ℃ 、30 s，60 ℃、30 s，72 ℃、50 s，25個循環，72 ℃、5 min;以 β-actin為內參;取8 μL擴增產物于1.5%瓊脂糖凝膠電泳鑒定。實驗材料:PCR擴增儀(BIO-RAD產品)，電泳儀(BIORAD產品)，凝膠成像分析儀(BIO-RAD產品)，總RNA提取試劑盒(天根公司)，逆轉錄試劑盒(TaKa-Ra公司)，PCR Mix酶(天根公司)。

1.3 冠狀動脈病變情況觀察 兩組均行二維超聲心動圖檢查，按文獻［5］標準判斷冠狀動脈病變情況。冠狀動脈病變嚴重程度分為四度:0度:冠狀動脈正常、無擴張;Ⅰ度(輕度):冠狀動脈瘤樣擴張明顯，但較局限，內徑＜4 mm;Ⅱ度(中度):冠狀動脈單發、多發或廣泛性擴張，內徑為4～7 mm;Ⅲ度(重度):冠狀動脈巨瘤樣擴張，內徑≥8 mm，累及1支以上。

1.4 統計學方法 采用SPSS17.0軟件行統計學處理，組間率的比較采用χ2檢驗。P≤0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 病毒感染情況 80例患者中病毒感染陽性24例，陰性56例。觀察組及對照組EB病毒陽性率分別為45%、25%，P＜0.05;單純皰疹病毒陽性率分別為35%、30%，冠狀病毒陽性率分別為18%、20%，呼吸道合胞病毒陽性率分別為25%、35%，副流感病毒陽性率分別為8%、12%，均無統計學差異。

2.2 冠狀動脈損害情況 觀察組17例出現冠狀動脈損害，發生率為21.25%;其中Ⅰ度10例;、Ⅱ度6例、Ⅲ度1例;病毒感染陽性者(24例)與陰性者(56例)冠脈損害率分別為29.0%和17.8%，無統計學差異。

3 討論

KD是一種好發于5歲以下兒童和嬰幼兒的急性全身性血管炎性疾病。其臨床特征為持續發熱、眼結膜充血、不同程度的口腔黏膜炎、多形性皮疹、手足硬性腫脹伴指尖脫屑、非化膿性淋巴結炎;急性冠狀動脈綜合征、心肌梗死和冠狀動脈血管瘤形成是其嚴重的并發癥。

KD的病因和發病機制尚不清楚，但越來越多的證據提示KD與感染有關，其流行病學證據主要有［8］:①發病特征:呈急性自限性發作過程，具有低復發率的特點。②發病年齡:5歲以內兒童發病率明顯高于5歲以上兒童，6個月以下的嬰兒和成人較少患病;③發病時間:有明顯的流行季節，春夏為發病高峰，有年度暴發趨勢。④流行區域:發病趨向于人口分布密集的大城市，而在高寒邊遠地區罕見。

EB病毒是一種廣泛存在的常見病原體，具有潛伏、持久、周期性復活的特點，可引起廣泛的人類疾病，與傳染性單核細胞增多癥、Burkitt淋巴瘤及鼻咽癌等疾病密切相關。研究表明，EB病毒顯性與隱性感染的比例為1∶2～1∶3;而機體免疫活性是決定感染后是否顯性發病的重要因素。以上流行病學特點提示:KD與EB病毒感染均具有病原分布廣泛、隱性感染率高、成人普遍具有免疫力、感染后具有保護性等特點。EB病毒感染多發生于幼兒期，與KD的好發年齡相符。KD和EB病毒感染引起的疾病均具有發熱、皮疹、淋巴結腫大、上呼吸道感染的表現等特點。這些都提示KD與EB病毒感染有明顯相關性。

Culora等［9］研究發現，KD患兒的心肌和冠狀動脈的臨床標本中檢出EB病毒編碼的RNA。雖并非所有KD患兒均有EB病毒感染，但KD可能起于EB病毒感染引起的異常免疫反應，當患兒再次感染EB病毒時，發病的可能性很大，考慮系T細胞對血管的潛在損害作用所致。Usta Guc等［10］報道巨細胞病毒可能與KD的發生有重要關系，其采用PCR方法在KD患兒的血清中檢出了巨細胞病毒，提示巨細胞病毒感染可能為KD的誘發因素。Kim等［11］報道，冠狀病毒 OC43/229E 和 NL63、呼吸道合胞病毒、副流感病毒等十余種呼吸道病毒在KD患兒和對照組兒童中的檢出率未見明顯差異，亦沒有證據表明感染這些呼吸道病毒的KD患兒發生冠脈損害的機率增高。此與我們的研究結果相符。

本研究觀察組EB病毒感染陽性率明顯高于對照組，這提示EB病毒感染可能參與了KD的發病，與文獻報道相符。兩組單純皰疹病毒、冠狀病毒OC43/229E和NL63、呼吸道合胞病毒A和B、副流感病毒1和4陽性率無明顯差異，提示這幾種病毒與KD發病無明顯相關性。KD患兒病毒感染陽性者與陰性者冠狀動脈損害發生率無明顯差異，提示病毒感染不是冠狀動脈損害發生的高危因素。

目前全球KD發病率有逐年增高趨勢，且流行病學調查顯示KD發生可能與感染及機體易感性有關，進一步明確與KD發病相關的病原體是今后的研究方向。

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