非酒精性脂肪性肝病患者血清sICAM-1水平變化及意義

葉 青，尹偉利，王鳳梅，李 寧

(天津市第三中心醫院，天津300170)

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一類以肝細胞脂肪變性和脂肪貯積為病理特征的臨床綜合征，包括非酒精性單純性脂肪肝(NAFL)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)及脂肪性肝硬化［1、2］。NAFLD 的發生是多因素作用的結果，涉及到多個相互關聯的病理生理環節，肝細胞炎癥及免疫損傷是其病理基礎［3］。可溶性細胞間黏附分子-1(sICAM-1)是一類介導細胞間黏附的膜表面糖蛋白，在炎癥反應、免疫應答等多種病理過程中發揮重要作用，研究發現sICAM-1在諸多肝臟疾病中如病毒性肝炎、肝衰竭、肝癌、酒精性肝炎等有明顯升高，可能參與肝細胞炎癥、免疫損傷［4～8］。目前，對于 NAFLD 患者sICAM-1水平的研究較少。2013年1～9月，我們觀察了NAFL、NASH患者血清sICAM-1水平變化，現分析結果，探討其在NAFLD發生發展中的作用。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 研究對象為天津市第三中心醫院同期收治的100例NAFLD患者。其中NAFL50例(NAFL組)，男32例，女18例，年齡 35～60歲，平均42.3歲;NASH50例(NASH組)，男30例，女20例，年齡35～66歲，平均46.2歲;均符合中華醫學會肝臟病學分會脂肪肝和酒精性肝病學組制定的NAFLD 診斷標準［9］;甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病毒血清標志物均陰性，否認飲酒史，并除外藥物性肝病、肝豆狀核變性、自身免疫性肝病等其他可導致脂肪肝的特定疾病。選擇50例健康體檢者為對照組，男29例，女21例，年齡48～65歲，平均54.7歲。各組年齡、性別比例等無顯著差異。

1.2 觀察項目 ①血清sICAM-1水平:采肘靜脈血4 mL，靜置，4 h內以 3 000 r/min離心20 min，吸取血清分裝試管，避免溶血、高脂血標本，將血清標本置于-80℃冰箱凍存待檢。采用雙抗體夾心ELISA法測定sICAM-1水平。②體質量指數(BMI):于清晨空腹測量身高、體質量，計算 BMI。③血生化指標:采用微粒子化學發光免疫分析法檢測空腹血胰島素FINS;采用全自動生化儀檢測空腹血糖(FPG)及血脂總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、谷丙轉氨酶(ALT)。分析血清sICAM-1水平與BMI及血生化指標的相關性。

1.3 sICAM-1診斷NASH的價值 繪制sICAM-1診斷NASH的ROC曲線，計算ROC曲線下面積、面積的標準誤，診斷NASH的敏感性、特異性等。

1.4 統計學方法 采用 SPSS13.0統計軟件行數據處理，計量資料符合正態分布，以±s表示，各組間比較采用方差分析;相關性采用等級相關分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

各組相關指標檢查結果見表1。血清sICAM-1與 TG、FINS、ALT 呈正相關(r=0.268，P ＜0.05;r=0.264，P ＜0.05;r=0.637，P ＜0.05);與TC、FPG 無相關性(r=0.134，P ＞0.05;r=0.067，P ＞0.05)。血清sICAM-1診斷NASH的ROC曲線下面積為0.79，面積的標準誤為0.087，敏感性為97.1%，特異性為53.3%，面積的 95%可信區間為 0.619～0.962。

表1 三組BMI及血清sICAM-1水平、血生化指標比較(±s)

表1 三組BMI及血清sICAM-1水平、血生化指標比較(±s)

注:與對照組比較，*P ＜0.01;與 NAFL 組比較，▲P ＜0.01

組別 n BMI(kg/m2) sICAM-1(ng/mL) FINS(uIU/mL) FPG(mmol/L)TC(mmol/L) TG(mmol/L) ALT(U/L)NAFL 組 50 27.90 ±2.16* 244.62 ±60.86 17.80 ±6.31* 6.92 ±2.40 5.57 ±1.29* 3.28 ±1.29* 38.54 ±11.37*NASH 組 50 29.98 ±3.33＊▲ 379.30 ±102.79＊▲ 18.66 ±8.62* 7.06 ±2.94 5.74 ±1.77* 3.53 ±1.85* 140.92 ±49.93＊▲對照組 50 22.50 ±1.75 226.04 ±44.13 8.60 ±3.69 6.86 ±2.52 4.60 ±0.73 1.30 ±0.47 17.72 ± 9.20

3 討論

研究證實，NAFLD與肥胖、胰島素抵抗、高脂血癥等代謝綜合征密切相關［10］。在發達國家，NAFLD已成為慢性肝損傷及血清氨基酸轉移酶升高的首要原因［11，12］，在我國僅次于病毒性肝炎排第2位［13］。近年來研究發現胰島素抵抗和脂質誘導的免疫損傷在脂肪肝發病機制中起重要作用［10，14，15］。

組織學檢查是診斷NAFLD的金標準，也是區分NAFL 與 NASH 的唯一可靠手段［20、21］;但肝穿刺活檢為有創性檢查，患者接受度低。ICAM-1是免疫球蛋白超家族成員之一，是與免疫球蛋白結構相似的一種細胞表面單鏈糖蛋白，在細胞膜上分為細胞外段、疏水的跨膜區段和短的細胞內區段。細胞外區段有5個細胞外免疫球蛋白樣結構區，其中第一個免疫球蛋白樣結構區可與淋巴細胞功能相關抗原-1(LFA-1)配基相結合而發揮作用。在正常肝臟，肝細胞不表達ICAM-1，當受到外源性刺激或免疫功能異常時，ICAM-1則明顯表達于肝細胞膜，增強白細胞與血管內皮細胞的黏附，促進肝細胞炎癥、免疫損傷過程［16～18］。表達于肝臟血管內皮細胞上的ICAM-1可與中性粒細胞和淋巴細胞上的CD11a/CD18、CD11b/CD18互為配體，介導血管內皮表面的炎癥發生、抗原遞呈和免疫應答反應等;也可與表達在淋巴細胞上的LFA-1結合，介導淋巴細胞募集反應和向肝臟等靶組織的遷移，還可使抗原特異性T細胞活化及白細胞跨內皮游走等。患者肝臟內浸潤的淋巴細胞通過LFA-1/ICAM-1通路與肝細胞黏附，刺激細胞增殖，并引起肝細胞毒性免疫反應和細胞免疫損傷。

本研究結果顯示，NASH患者血清sICAM-1水平高于NAFL患者及健康人，與國外相關報道［8，19］一致，說明sICAM-1在NASH的發生中起重要作用;sICAM-1水平與 TG、FINS、ALT呈正相關，表明 sICAM-1升高程度可反映肝細胞損傷的嚴重程度，可作為NAFLD病情評估的一項指標［22］。本研究顯示sICAM-1診斷NASH的敏感性達97.1%，說明血清sICAM-1水平越高，NASH的可能性越大。

綜上所述，sICAM-1可能參與了NASH的免疫損傷機制，其升高程度與肝損害嚴重程度有密切關系，有望替代肝穿活檢成為 NAFLD診斷、區分NAFL和NASH的無創性指標。

［1］ Farrell GC，Larter CZ.Nonalcoholic fatty liver disease:from steatosis to cirrhosis［J］.Hepatology，2006，43(2 Suppl 1):99-112.

［2］Harrison SA，Kadakia S，Lang KA，et al.Nonalcoholic steatohepatitis:what we know in the new millennium［J］.Am J Gastroentero1，2002，97(11):2714-2724.

［3］Younossi ZM，Diehl AM，Ong JP.Nonalcoholic fatty liver disease:an agenda for clinic research［J］.Hepatology，2002，35(4):746-752.

［4］Bruno CM，Sciacca C，Cilio D，et al.Circulating adhesion moleculars in patients with virus-related chronic diseases of the liver［J］.World J Gastroenterol，2005，11(9):4566-4569.

［5］Ohnishi A，Miyake Y，Matsushita H，et al.Serum levels of soluble adhesion molecules as prognostic factors for acult liver failure［J］.Digestion，2012，86(2):122-128.

［6］Jung CW，Song TJ，Lee KO，et al.Characterization of hepatocellular carcinoma cell lines based on cell adhesion molecules［J］.Int Mol Med，2012，29(6):1158-1164.

［7］Tortorella C，Sacco R，Orlando P，et al.sICAM-1，sCD95and sCD95L levels in chronic liver diseases of different etiology［J］ .Immunopharmacol lmmunotoxicol，2000，22(1):19-33.

［8］Shuji Ito，Toyokazu Yukawa，Shinichiro Uetake，et al.Serum intercellular adhesion molecule-1 in patients with nonalcoholic steatohepatitis:comparison with alcoholic hepatitis［J］.Alcohol Clin Exp Res，2007，31(S1):83-87.

［9］中華醫學會肝臟病學會脂肪肝和酒精性肝病學組.非酒精性脂肪肝病診斷標準［J］.中華肝臟病雜志，2003，11(2):71-72.

［10］Choudhury J，Sanyal AJ.Insulin resistance and the pathogenesis of nonalcoholic fatty liver disease［J］.Clin liver Dis，2004，8(3):575-594.

［11］Friis-Liby I，Aldenborg F，Jerlstad P，et al.High prevalence of metabolic complications in patients with nonalcoholic fatty liver disease［J］.Scand J Gastroenterol，2004，39(9):864-869.

［12］Ekstedt M，Franzen LE，Mathiesen UL，et al.Long-term follow-up of patients with NAFLD and elevated liver enzymes［J］.Hepatology，2006，44(4):865-873.

［13］Fan JG，Farrell GC.Epidemiology of nonalcoholic fatty liver disease in China［J］.J Hepatol，2009，50(1):204-210.

［14］Federico A，D'Aiuto，Borrieuo F，et al.Fat:A matter of disturb-ance for the immune system［J］.World J Gastroenterol，2010，16(38):4762-4772.

［15］Zhan YT，A W.Roles of liver innate immune cells in nonalcoholic fatty liver disease［J］.World J Gastroenterol，2010，16(37):4652-4660.

［16］Wasa wa K，Kameyama T，Ishikawa H，et al.Induction of ICAM-1 and VCAM-1 on the Mouse Lingual Lymphatic Endothelium with TNF-α［J］.Acta histochem Cytochem，2008，41(5):115-120.

［17］Abdalla A，Sheesha AA，Shokeir M，et al.Serum intercellular adhesion molecule-I in children with chronic liver disease:relationship to disease activity［J］.Dig Dis Sci，2002，47(6):1206-1208.

［18］Tortorella C，Sacco R，Orlando P，et al.sICAM-1，sCD95 and sCD95L levels in chronic liver diseases of different etiology［J］.immunopharmacol lmmunotoxicol，2000，22(1):19-33.

［19］ Sookoian S，Castano GO，Burgueno AL，et al.Circulating levels and hepatic expression of molecular mediators of atherosclerosis in nonalcoholic fatty liver disease［J］.Atherosclerosis，2010，209(2):585-591.

［20］Vuppalanchi R，Chalasani N.Non-alcoho lic fatty liver disease and nonalcoholic steatohepatitis:Selected practical issues in their evaluation and management［J］.Hepatology，2009，49(1):306-317.

［21］Merriman RB，Ferrell LD，Patti MG，et al.Correlation of paired liver biopsies in morbidly obese patients with suspected nonalcoholic fatty liver disease［J］.Hepatology，2006，44(4):874-880.

［22］S?derberg C，Marmur J，Eckes K，et al.Microvesicular fat，inter cellular adhesion molecule-1 and regulatory T-lymphocytes are of importance for the inflammatory process in livers with nonalcoholic steatohepatitis［J］.APMIS，2011，119(7):412-420.