胰腺癌患者血清Dickkopf-1水平檢測及其臨床意義

周 穎，許琦華，康藝蘋，楊振熙

(上海市第七人民醫院，上海200137)

胰腺癌臨床表現隱匿，缺乏特異表現，多數病例 發現時已屬晚期，僅10%～15%的患者確診時尚有手術機會，但手術難度大、根治性切除率低、復發率高，5年生存率＜5%［1］。近年來，尋找與胰腺癌相關的新的血清腫瘤標志物成為研究熱點。Dickkopf-1(DKK-1)是一種分泌型糖蛋白，是Wnt/β-catenin信號通路的拮抗劑，在腫瘤的發生、發展過程中起重要作用［2，3］;為探討其診斷胰腺癌的價值，我們于2010年5月～2013年6月進行了如下研究。

1 資料和方法

1.1 臨床資料 我院同期收治的50例胰腺癌患者(胰腺癌組)，其中男31例，女19例，年齡34～93(65.04±13.55)歲。23例經細胞學和(或)組織學檢查確診，27例經影像學檢查和隨訪確診。臨床分期(UICC分期)Ⅰ～Ⅱ期16例，Ⅲ～Ⅳ期34例;均無其他臟器嚴重疾患及其它惡性腫瘤史，采血前均未接受放化療及手術治療。另取同期50例健康體檢者作為對照組，其中男27例，女23例，年齡21～69(53.42±10.66)歲。本研究方案通過上海市第七人民醫院倫理委員會審批，所有患者受檢前簽署知情同意書。

1.2 血清DKK-1及 CA19-9表達檢測 采集兩組清晨空腹外周靜脈血10 mL，不加抗凝劑，待血液凝固后以2 000 r/min離心20 min，取上清液，置于-80℃低溫冰箱待檢，以ELISA法行血清DKK-1檢測(＞22.5 μg/L 判為陽性，≤22.5μg/L 為陰性);以電化學發光法行CA19-9檢測(＞39 U/mL判為陽性，≤39 U/L為陰性)，計算DKK-1、CA19-9陽性率及DKK-1+CA19-9陽性率。

1.3 DKK-1及CA19-9診斷胰腺癌的價值 計算DKK-1、CA19-9及DKK-1聯合CA19-9診斷胰腺癌的敏感度、特異度和準確性。敏感度=真陽性例數/(真陽性例數+假陰性例數);特異度=真陰性例數/(真陰性例數+假陽性例數);準確性=(真陽性例數+真陰性例數)/(真陽性例數+假陰性例數+真陰性例數+假陽性例數)。

1.4 統計學方法 應用SPSS15.0統計軟件，計量數據以±s表示，組間比較采用t檢驗，計數資料比較采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清DKK-1、CA 19-9表達 胰腺癌組及對照組血清 DKK-1 水平分別為(31.24 ±18.18)、(14.86±4.71)μg/L，P ＜ 0.05;DKK-1 陽性率分別為52%、8%、P＜0.01。胰腺癌組及對照組血清 CA 19-9水平分別為(375.28 ± 363.17)、(13.97 ±13.21)U/mL，P ＜ 0.05;CA 19-9 陽性率分別為78%、16%;P ＜0.01。DKK-1+CA 19-9陽性率分別為90%、22%。

2.2 血清DKK-1、CA 19-9對胰腺癌的診斷價值DKK-1、CA19-9、DKK-1+CA19-9診斷胰腺癌的敏感度、特異度和準確性見表1。

表1 DKK-1、CA 19-9及二者聯合診斷胰腺癌的敏感度、特異度及準確性

3 討論

提高早期診斷及監測術后復發和轉移，是提高胰腺癌綜合療效的關鍵。近年來，各種血清腫瘤標志物的臨床應用價值受到臨床關注。目前臨床上常用于胰腺癌的血清標志物有CA19-9、CEA、CA125等，其中CA19-9是胰腺癌最為常用的標志物，主要用于療效觀察、病情進展判斷和復發的監測，但早期診斷的敏感性和特異性不高［4～6］;同時，CA19-9 的表達依靠Lewis抗原，而人群中5%～10%的個體該抗原為陰性，即使進展期胰腺癌亦無法合成CA19-9［6］。因此尋找與胰腺癌相關的新的血清腫瘤標志物成為目前的研究熱點。

DKK-1是一種分泌性蛋白，由 Glinka等［7］于1998年首次在兩棲動物非洲蟾蜍胚胎細胞中發現。人類DKK-1基因位于染色體10q11，其編碼蛋白是一種Wnt信號通路拮抗劑。除在胚胎發育中起關鍵調控作用外，DKK-1對維持成體組織細胞增殖、分化、凋亡的動態平衡亦至關重要，并能在一定條件下誘導腫瘤細胞增殖、分化失控，在腫瘤的發生、發展過程中起重要作用。既往研究表明DKK-1在胰腺癌細胞株及組織中高表達，參與了胰腺癌的發生、發展并促進其浸潤性生長，可作為一種新的胰腺癌生物學標記物［8，9］。文獻報道血清DKK-1水平在部分些惡性腫瘤患者血清中升高，并與不良預后相關［10～15］。

近年研究發現，Wnt/β-catenin信號通路和DKK-1異常參與了胰腺癌的發生和發展。Pasca等［16］應用基因芯片技術分析了胰腺導管腺癌中Wnt信號通路相關基因的活化情況，發現DKK-1表達顯著高于正常胰腺組織。Takahashi等［8］檢測了43株人惡性腫瘤細胞株，發現所有胰腺癌細胞株中DKK-1表達均持續顯著上調;手術切除的胰腺癌組織中DKK-1亦呈過表達，23例胰腺導管腺癌組織中的DKK-1 mRNA水平顯著高于相應非癌組織;敲除DKK-1基因可減低胰腺癌細胞株SUIT-2的遷移活性及其轉移性亞株S2-CP8的生長和侵襲能力。DKK-1在胰腺癌內鏡超聲引導下細針抽吸(EUSFNA)標本中的陽性表達率為70.8%，細胞學、組織學聯合DKK-1檢測可提高胰腺癌診斷的敏感性和特異性［9］。由此推測DKK-1可能參與了胰腺癌的發生、發展并可促進其浸潤性生長，可作為一種新的胰腺癌生物學標記物。

本研究結果顯示，胰腺癌組血清DKK-1水平及陽性率均明顯高于對照組，提示血清DKK-1水平有助于胰腺癌的診斷，可作為胰腺癌診斷的腫瘤標志物。診斷胰腺癌時，CA19-9敏感度高于 DKK-1，DKK-1特異度和準確性與CA19-9相比無明顯差異;若兩者聯合檢測，則敏感度和準確性均明顯提高。

綜上所述，血清DKK-1水平可作為臨床胰腺癌的輔助診斷指標;血清DKK-1與CA 19-9聯合檢測有助于提高胰腺癌的診斷水平。但其在胰腺癌早期診斷、療效預后判斷等方面的價值還需要進一步大樣本研究證實。

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