重組新城疫病毒rl-RVG抑制A549荷瘤鼠的瘤體生長

嚴玉蘭，賈麗娟，，劉 洋，張 金，張 杰，梁 冰，步雪峰

(江蘇大學1.附屬人民醫院呼吸科，江蘇鎮江212002;2.臨床醫學院內科學，江蘇鎮江212013;3.附屬人民醫院普外科，江蘇鎮江212002)

肺癌被認為是目前對人類健康及生命威脅最大的惡性腫瘤，是當今世界各國常見的惡性腫瘤之一，據2012年美國癌癥研究中心統計的數據顯示，在新發的各種腫瘤中，肺癌的發病率在14%左右，位居第2 位［1］。長期以來，盡管積極采用各種治療方法包括化療、放療及手術等，肺癌患者的5年生存率仍然不足15%［2］。

目前，各國學者致力于研究一種集基因治療、免疫治療于一體的新的生物治療方法，即溶瘤治療。新城疫病毒(newcastle disease virus，NDV)的抗腫瘤作用已經運用于臨床實驗研究，如急性單核細胞白血病、膠質瘤、人卵巢癌、骨肉瘤、乳腺癌及結腸癌等，均顯示有明顯的抑制腫瘤細胞生長作用［3-4］。其在肺癌研究國內外尚少。

1 材料與方法

1.1 材料

人肺腺癌細胞A549(本實驗保存);SPF 級、4周齡、體質量18～22 g 裸鼠［揚州大學比較醫學中心，實驗動物質量合格證:SCXK(蘇)2012-0004］;表達狂犬病毒糖蛋白的重組新城疫病毒(recombinant avirulent NDV LaSota strain expressing the rabies virus glycoprotein，rl-RVG)與NDV 以及雞抗NDV一抗(中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所獸醫生物技術國家重點實驗室惠贈);DMEM 細胞培養基及胎牛血清(維森特公司);引物(上海捷瑞生物技術公司合成);反轉錄試劑盒(Fermentas);PCR 試劑盒(北京康維世紀有限公司);TUNEL 原位檢測試劑盒(南京凱基生物科技發展有限公司);小鼠抗狂犬病毒G 蛋白一抗(Santa 公司)，山羊抗鼠二抗、山羊抗兔二抗(北京康維世紀有限公司)，兔抗雞二抗(EARTHOX 公司)，兔抗caspase-3，8，9，Bax 和Bcl-2 一抗(博士德公司)。……