薄 冰
(河南大學(xué)體育學(xué)院運動人體科學(xué)教研室,河南開封475000)
竇房結(jié)作為心臟的首要起搏點,在心臟規(guī)律的電學(xué)活動中具有極其重要的作用[1],其中,快激活延遲整流鉀離子通道(IKr通道)引導(dǎo)竇房結(jié)細胞主要的復(fù)極化電流,該通道功能活動的改變可影響竇房結(jié)細胞動作電位復(fù)極化,進而導(dǎo)致竇房結(jié)功能障礙[2-3]。目前,關(guān)于運動對竇房結(jié)細胞IKr通道的影響鮮見報道,本文在跑臺訓(xùn)練大鼠模型上,探討IKr通道亞基ERG1b 基因表達及通道電流密度變化,揭示運動對于竇房結(jié)離子通道及功能的影響。
SPF 級雄性SD 大鼠50 只,6 周齡,體質(zhì)量180±8 g(由河南省實驗動物中心提供,合格證號:410118)。動物常規(guī)分籠飼養(yǎng),5 只/籠,國家標準嚙齒動物飼料喂養(yǎng),自由飲食。飼養(yǎng)環(huán)境為室溫18 ±2 ℃,相對濕度為40%~50%,光照時間12 h。大鼠首先進行3 d 適應(yīng)性跑臺訓(xùn)練,速度10 m/min,時間20 min,跑臺坡度為0°。訓(xùn)練結(jié)束后,將能夠完成跑臺訓(xùn)練的大鼠隨機分為5 組,每組10 只,包括對照組(C 組)1 組、1 次力竭組(O 組)2 組、兩周反復(fù)力竭組(R 組)2 組。C 組大鼠不進行任何運動訓(xùn)練,O 組大鼠在正常飼養(yǎng)兩周后,進行1 次速度25 m/min,坡度為0°跑臺訓(xùn)練至力竭,R 組運動方式及強度同O組,每天1 次跑臺訓(xùn)練,每周6 d,共訓(xùn)練2 周。跑臺訓(xùn)練組大鼠分別于訓(xùn)練結(jié)束后0 h 及24 h 取材,O組以O(shè)-0 h 及O-24 h 命名,R 組以R-0 h 及R-24 h命名[4]。
1.2.1 實時熒光定量PCR 檢測mRNA:腹腔注射10%水合氯醛(1 mL/100 g 體質(zhì)量)麻醉大鼠,參照文獻分離竇房結(jié)組織[5-6],Trizol 法提取總RNA 并反轉(zhuǎn)錄RNA 合成為cDNA,保存于-20 ℃?zhèn)溆茫?]。
通過互聯(lián)網(wǎng)GenBank 查找基因序列,應(yīng)用Primer5 軟件進行引物設(shè)計,設(shè)計完成的引物由Invitrigin公司合成,引物序列見表1。……