多不飽和脂肪酸改善小鼠心肌脂質成分及缺血再灌注后線粒體功能

張曉霞，趙子健，戴一凡，李 斌，米樹華*

(1.首都醫科大學附屬北京安貞醫院特需醫療科，北京100029;2.南京醫科大學代謝疾病研究中心，江蘇南京210029)

ω-3 多不飽和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids PUFAs)具有抗炎、改善血脂及減輕動脈硬化等多種作用。其與ω-6 PUFAs 在體內的平衡對心血管系統的正常功能具有重要意義［1-2］。普通動物源性脂肪含ω-3PUFAs 甚少，增加常見植物油脂攝入對心臟多不飽和脂肪酸比例的影響尚缺乏研究。本研究初步探討以植物油脂代替動物脂肪攝入對心肌ω-6/ω-3多不飽和脂肪酸比例以及缺血再灌注時心肌損傷程度的影響及其機制。

1 材料與方法

1.1 材料

SPF 級雄性C57BL/6 小鼠80 只，體質量(25 ±2)g［斯貝福公司，合格證號:SCXK(京)2011-0004］。飼料(華阜康公司)。氯化三苯四氮唑(TTC)、伊文思藍、不飽和脂肪酸標準品(Sigma 公司)。反轉錄試劑盒(Promega 公司)。Real-time PCR 試劑盒(寶生物工程公司)。TNF-α 及IL-1 ELISA 試劑盒(BG 公司)。

1.2 動物分組與處理

小鼠隨機分為普通飲食組(n =40)、植物油脂組(n=40)。植物油脂組去除普通飼料中部分動物脂肪，按照25 g/kg 添加大豆油和花生油(1∶1)。飼養1 個月后，每組隨機取8 只小鼠作為基線對照，行假手術，開胸后只穿線，不結扎。其余小鼠常規建立心臟缺血再灌注模型［3］。缺血30 min，再灌注3 h。

1.3 TTC 染色

心臟去除心房和大血管，0.9%氯化鈉注射液清洗，吸干水分，－20 ℃冰箱冷凍固定20 min，自心尖起每隔1 mm 垂直于心臟長軸將心臟切成薄片，置于37 ℃1% TTC 溶液中，37 ℃水浴10 min。之后，將心肌薄片置于體式顯微鏡10 倍放大后拍照。尼康圖像分析儀進行分析。測量左心室面積(area of left ventricle LV)、缺血面積(area at risk AAR 伊文思藍未著色，TTC 染為磚紅色)和梗死面積(infarction size IS TTC 染色呈灰白色)。……