rHSG對(duì)COPD大鼠小氣道阻力及成纖維細(xì)胞TGF-β1表達(dá)的影響

葛正行，周 洵，高 瑞，李 波

(貴陽中醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科，貴州貴陽550001)

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary diseases，COPD)是呼吸系統(tǒng)常見病，其重要病理特征氣道重塑［1］，是COPD 氣流不完全受限的主要原因。但其機(jī)制尚未完全闡明，治療上亦缺乏有效的對(duì)策，是近年來COPD 研究的熱點(diǎn)和前沿問題之一。

細(xì)胞增殖抑制基因(Hyperplasia Suppressor Gene，HSG)是溫紹君等發(fā)現(xiàn)的一個(gè)新基因。研究發(fā)現(xiàn)HSG 可以有效地阻遏細(xì)胞周期和抑制細(xì)胞增殖［2］。2001年，在肺組織中也克隆出HSG。該基因的發(fā)現(xiàn)對(duì)認(rèn)識(shí)和治療各種細(xì)胞增殖性疾病分子機(jī)制開辟了一條新途徑。目前，針對(duì)HSG 的研究主要集中在心血管疾病方面，而在COPD 氣道重塑方面尚無相關(guān)研究。本研究試探索rHSG 在氣道重塑中所發(fā)揮的作用及其調(diào)控的機(jī)制，為進(jìn)一步深入干預(yù)COPD 氣道重建機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 主要實(shí)驗(yàn)材料

脂多糖(LPS)和DMSO(Sigma 公司);黃果樹香煙(焦油13 mg，尼古丁1.1 mg)(貴陽黃果樹卷煙廠);ELISA 試劑盒(武漢博士德生物科技有限公司);0.25%胰蛋白酶(杭州吉諾公司);高糖培養(yǎng)基和優(yōu)級(jí)胎牛血清(Hyclone 公司);胰蛋白酶粉劑(AMRESCO 公司);HSG 抗體和α-actin(Genway 公司)。

1.2 方法

1.2.1 大鼠分組和模型建立:清潔級(jí)，12 周，體質(zhì)量50 g 左右雄性SD 大鼠［第三軍醫(yī)大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，許可證號(hào):SCX(渝2007-0000)］，120只，于貴陽中醫(yī)學(xué)院SPF 級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心飼養(yǎng)，按隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組(60 只)和COPD 組(60只)。采用熏香煙加氣管注入LPS 法造模，給藥方法參考文獻(xiàn)［3］，對(duì)照組，1、14 d 經(jīng)氣管注入300 μL 0.9%氯化鈉注射液。2 組大鼠于相同正常動(dòng)物飼養(yǎng)環(huán)境飼養(yǎng)至80 d。

1.2.2 大鼠肺功能測(cè)定:隨機(jī)選取對(duì)照組及模型組大鼠各15 只。……