卵巢癌特異性MR分子探針的制備

文曦琳，李 易，葛曉東，李妹玲，文 明，李少林

(重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院放射科，重慶400016)

卵巢癌是一種嚴重威脅女性生命的惡性腫瘤，病死率居婦科惡性腫瘤之首［1］，因其深居盆腔，早期診斷極為困難，大部分患者在發(fā)現(xiàn)時已達病程晚期，目前雖然采用以外科手術及化學治療為主的綜合治療，但其5年生存率仍低于40%［2］，因此迫切需要尋求新的治療策略。

新興的分子影像學是一項從分子或細胞水平對機體病理和生理變化進行成像的技術，它在疾病的早期診斷、精確定位及進行療效監(jiān)測等方面，有著巨大的開發(fā)及應用前景［3］。以RNAi(RNA 干擾)技術為基礎的基因治療，因特有的高效性、特異性和無創(chuàng)性，受到越來越多的關注，成為治療惡性腫瘤的新方向［4］。本研究將兩種技術結(jié)合，以多聚賴氨酸修飾的超順磁性葡聚糖四氧化三鐵納米粒子(SPIO-PLL)作為MR 陰性對比劑及載體，連接靶向卵巢癌表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)基因的質(zhì)粒pGenesil1-shRNA，構建集診斷和治療于一體的特異性雙功能分子探針(即SPIO-PLL-pshRNA 探針，以下簡稱探針)，并初步評價其體外轉(zhuǎn)染卵巢癌SKOV3細胞的可行性。

1 材料與方法

1.1 主要材料與試劑

SPIO-PLL 由本研究組自制(方法另文報道)，重組質(zhì)粒pGenesil1-shRNA(含增強型綠色熒光蛋白EGFP報告基因，上海生物工程公司合成)，卵巢癌SKOV3 細胞系(中科院上海細胞庫)，RPMI1640 培養(yǎng)基、胎牛血清(Hyclone 公司)，瓊脂糖(Hydragene公司)，Cell counting kit-8(CCK-8)試劑盒(碧云天生物技術有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 探針的最佳質(zhì)量比確定(已申請國家專利):在中性條件下，將SPIO-PLL 與質(zhì)粒分別按不同質(zhì)量比(0.1∶1、0.5∶1、1∶1、2∶1、4∶1、6∶1、8∶1 和10∶1)混合，上下吹打混勻，室溫下放置30 min。……