幽門螺桿菌感染與膽囊癌組織中Ki67、MMP2及Fas表達的關(guān)系

周 瀛，侯立朝，任 利，李衍飛

(青海大學附屬醫(yī)院肝膽外科，青海西寧810001)

幽門螺桿菌(Helicobacter pylori，Hp)已被世界衛(wèi)生組織列為Ⅰ類致癌物，與胃癌和原發(fā)性肝癌等的發(fā)生密切相關(guān)［1］。為探討Hp 感染與腫瘤增殖、凋亡及侵襲的關(guān)聯(lián)，本研究就Hp 感染與膽囊癌組織中Ki67、MMP2 及Fas 表達的關(guān)系進行研究。

1 資料與方法

1.1 資料:收集青海大學附屬醫(yī)院2010年5月至2013年8月原發(fā)性膽囊癌手術(shù)切除病理組織石蠟標本124 例，所有患者術(shù)前未經(jīng)放化療治療。男性73 例，女性51 例，平均年齡56.7 歲。另選擇同期進行肝臟手術(shù)切除或膽囊手術(shù)常規(guī)切除膽囊30 例作為對照組，標本均為正常組織，其中男性18例，女性12 例，平均年齡51.2 歲。兩組在年齡、性別方面無顯著性差異。所有標本均經(jīng)10%甲醛溶液固定，常規(guī)脫水、透明、浸蠟和石蠟包埋，并均經(jīng)HE 染色后確認病理診斷，臨床資料完整。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準，實施前簽定患者知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 主要試劑:兔抗人Ki67 抗體、鼠抗人Fas 抗體(武漢博士德生物工程有限公司);鼠抗人MMP-2 抗體(上海太陽生物技術(shù)有限公司);免疫組化試劑盒(北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司)。

1.2.2 Hp 檢測:采用W-S 銀染色法與快速尿素酶試驗兩種方法聯(lián)合檢測Hp，檢測結(jié)果均為陽性者判斷為陽性，均陰性者判斷為陰性，單陽性者退出實驗。

1.2.3 免疫組化及結(jié)果判定:采用S-P 法二步，操作按照試劑盒說明書進行，用PBS 替代一抗作為陰性對照。采用雙盲法觀察陽性反應。以細胞被染成黃色或棕色為陽性細胞，隨機選擇6 個高倍視野，每個視野計數(shù)400 個細胞，計算陽性細胞數(shù)所占的百分比均值，當此均值＞10%即為陽性表達。……