COPD患者肺組織中CTGF表達水平增加

周思靜，李 敏，王 苒，許 銳，費黎明，祝清清，張 燕

(1.合肥市第三人民醫院職業病科，安徽合肥230001;2.安徽醫科大學第一附屬醫院呼吸內科安徽合肥230001;3.安徽醫科大學第一附屬醫院腫瘤科，安徽合肥230001)

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)以氣道、肺實質和肺血管的慢性炎性反應為特征［1］。結締組織生長因子(connective tissue growth factor，CTGF)是一種新發現的生長因子，近年來，有研究結果表明，結締組織生長因子還參與調節多種炎性反應［2］。本研究探討COPD 的肺組織中CTGF 表達差異，為研究吸煙人群的COPD易患機制提供基礎研究資料。

1 材料與方法

1.1 材料:肺組織標本來源于安徽醫科大學第一附屬醫院胸外科2012年1月至2012年12月因肺部占位性病變行肺葉切除術的患者。將標本分為3 組(每組25 例):1)吸煙+COPD 組:均為吸煙的COPD 患者，均符合COPD 的診斷標準，且處于穩定期。2)吸煙組:均為未患COPD 的吸煙者。3)對照組:均無職業性粉塵與化學物質接觸式，均無吸煙史，且未患COPD。本研究得到醫院倫理委員會的審查和批準，在采集標本前均告知研究對象，并獲得其本人同意。

1.2 方法

1.2.1 試劑:兔抗人CTGF 多克隆抗體、小鼠抗人-肌動蛋白抗體(Santa Cruz 公司)，Trizol 試劑(Invitrogen 公司)，反轉錄試劑盒和熒光定量PCR 試劑盒(Toyobo 公司)，SDS-PAGE 試劑盒、組織蛋白提取試劑盒(武漢博士德生物工程有限公司)，蛋白標志物(Fenmentas 公司)。所有引物均由上海生工生物工程公司設計合成。

1.2.2 采集組織標本:收集行肺葉切除手術后的肺組織標本，所取標本均遠離病變(＞5 cm)，且肉眼觀察無癌組織浸潤。

1.2.3 熒光定量PCR 檢測mRNA 表達:定量PCR 的結果采用2－ΔΔCt法來測定目的基因的相對表達。……