系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者外周血miR-7的表達(dá)及其意義
2014-03-15 09:45:02葉燕霞
基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床
2014年1期
李 揚(yáng)，沈 濂，葉燕霞，張 烜*
(1.首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院血液科，北京100050;1.中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)院風(fēng)濕免疫科，北京100730;3.中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所生物化學(xué)與分子生物學(xué)系，北京100005)
系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus，SLE)是一種多系統(tǒng)受累的自身免疫性疾病，B細(xì)胞的異常增殖活化是SLE 的特征之一［1］。小RNA(microRNAs，miRNAs)是近年來發(fā)現(xiàn)的一類單鏈非編碼小RNA，成熟miRNA 能夠在轉(zhuǎn)錄后水平抑制靶mRNA 表達(dá)［2］。近年多項(xiàng)研究證明，miRNAs 參與生物體的生長、發(fā)育、衰老、凋亡的調(diào)控及遺傳背景的穩(wěn)定，并與人類疾病相關(guān)［3］。miR-7 與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)［4－8］，然而miR-7 在自身免疫病特別是SLE 的發(fā)病中的作用尚無研究。本研究旨在探索miR-7 在SLE 患者中的表達(dá)及功能。
1 材料與方法
1.1 標(biāo)本來源
北京協(xié)和醫(yī)院2009 至2010年門診初治SLE 患者20 例，均符合美國風(fēng)濕病學(xué)會1997年修訂的SLE 診斷標(biāo)準(zhǔn)，排除患有其他全身性疾病者。正常對照20 例來自健康志愿者，年齡、性別與病例匹配，同時(shí)不得具備SLE 診斷標(biāo)準(zhǔn)中的任何一條。經(jīng)北京協(xié)和醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，納入研究前患者簽署知情同意書。
1.2 主要試劑
淋巴細(xì)胞分離液(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司);流式熒光抗體PE-CD3，F(xiàn)ITC-CD19，APCCD14;Trizol 和Cell TraceTMCFSE 增值檢測試劑(Invitrogen 公司);RNA 提取試劑盒和反轉(zhuǎn)錄試劑盒(天寶生物工程有限公司);miR-7 表達(dá)檢測試劑盒(ABI 公司);miR-7 前體Pre-miRTM-miR-7 前體及陰性對照Pre-miRTMmiRNA 前體-陰性對照，miR-7 抑制劑anti-miRTM-miR-7 抑制劑及陰性對照anti-miRTMmiRNA 抑制劑-陰性對照(Ambion 公司);B 細(xì)胞電轉(zhuǎn)試劑盒(Amaxa 公司)。
