敲減水通道蛋白1對小鼠雪旺細胞形態及水轉運的影響

章 杰，江 華，劉安堂，朱 鴷，張文俊，蘆立軒

(1.南昌大學第一附屬醫院整形美容科，江西南昌330006;2.第二軍醫大學上海長征醫院整形外科，上海200003)

面神經解剖特殊，損傷后受骨性面神經管壓迫，常形成“水腫-缺血-水腫”的惡性循環，如何預防或減輕面神經的水腫在面癱臨床治療中具有極其重要的意義。

水通道蛋白(AQPs)是存在于細胞膜上，介導不同類型細胞跨膜水轉運的膜蛋白家族，與多種組織器官水腫形成和消除密切相關，在水液代謝的調節中起重要作用［1－3］。其中AQP1 是周圍神經系統表達最多的水通道蛋白［4－7］。前期研究證實了面神經組織內存在AQP1 的表達，并在小鼠面神經離斷傷模型中發現面神經損傷后AQP1 表達增高，與面神經損傷后水腫時相性變化高度一致，提示AQP1 與面神經損傷后繼發性水腫密切相關，并進一步研究發現AQP1 定位在雪旺細胞上。但是AQP1 表達增高與面神經水腫的因果關系還未確定，即AQP1 的高表達導致或加劇面神經水腫?還是面神經水腫伴行AQP1 的高表達尚無定論;且AQP1 在雪旺細胞內如何發揮生理和病理作用也不清楚。因此，本研究應用慢病毒介導的RNA 干擾技術下調雪旺細胞AQP1 表達，研究AQP1 表達抑制對雪旺細胞形態和水轉運的影響，進而為研究AQP1 對面神經損傷后水腫的基因治療提供依據。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

SPF 級，C57BL/6 小鼠，雌雄不限，3 ～5 d［第二軍醫大學動物實驗中心，實驗動物許可證號SCXK(滬)-2007-0005］。

1.2 材料

293 T 細胞、大腸桿菌DH5α 由第二軍醫大學神經生物研究所保存提供;pLKO.1-TRC cloning vector Plasmid、psPAX2、pMD 質……