CIN和宮頸癌患者宮頸粘膜脫落細胞的端粒酶熒光定量研究及比較

傅祝能，孫海芳，孫蘭青，王賢芳，陳林海，吳榮輝，方海俊

(義烏市中心醫院，浙江 義烏 322000)

端粒酶是一種核糖核蛋白酶，與腫瘤的發生發展密切相關，腫瘤細胞中端粒酶呈特異性地表達[1],國內研究多對各種腫瘤組織細胞端粒酶的定性或半定量的研究,直接取脫落細胞對宮頸癌等進行端粒酶實時熒光定量PCR的檢測研究報道少見,故此我們進行該項研究。

一、對象與方法

1.一般對象。選正常對照組26例,體檢健康女性,年齡20-56(34.8±6.8)歲，CINⅠ-Ⅱ組28例,年齡18-75(36.9±5.6)歲，CIN Ⅲ組21例，年齡21-78(39.8±5.5)歲；CIN患者中HPV陽性CIN組26例，HPV陰性CIN組23例，宮頸癌組24例,其HPV檢測全陽性，年齡26-82(49.5±7.7)歲，各疾病組采集標本進行檢測前均未進行手術治療。

2.方法。檢測標本采用女性宮頸粘膜脫落細胞標本,使用采樣刷插入宮頸采集，緊貼宮頸口稍用力轉動3圈，將采樣刷放入流式熒光雜交法檢測HPV[2]，HPV標本均當天采集，次日檢測完畢。采集標本放-70℃保存備檢，采用美國某公司7500 Fast Real-Time PCR System型進行端粒酶定量檢測前取出，以SYBR為熒光染料，以293細胞為陽性對照，試劑盒購自上海某醫藥科技有限公司，2個月內檢測完。

二、結 果

各組觀察指標如下(見附表)。

三、討 論

本文采用TRAP實時熒光定量法進行女性宮頸粘膜脫落細胞端粒酶活性定量研究，方法簡捷，重復性強，結果顯示，CIN Ⅲ組、HPV陽性CIN組及宮頸癌組的宮頸粘膜脫落細胞端粒酶定量值明顯高于正常女性，表明女性CIN患者的宮頸粘膜脫落細胞端粒酶活性定量結果升高，在CINⅠ-Ⅱ組階段及HPV陰性的CIN組其升高不明顯，而進入CIN Ⅲ組階段或HPV陽性CIN組的端粒酶活性定量結果升高更明顯，其升高已具有統計學意義，即其進一步惡變發展為宮頸癌的風險更大，而一旦發生惡變，進入宮頸癌階段，因而，采取女性宮頸粘膜脫落細胞進行端粒酶活性定量檢測可作為鑒別診斷CIN和宮頸癌的方法之一[3]。綜上所述，宮頸粘膜脫落細胞端粒酶熒光定量測定，可作為鑒別診斷CIN和宮頸癌的手段，尤其可作為女性婦科對宮頸癌的有效篩查和早期診斷手段之一。

附表 各組觀察指標比較

注:與正常女性組比較，△P<0.05,△△P<0.01

[1]Shay JW,Wright WE.Telomerase activing in human canaer[J].Current Opinion in oncology,1996,8:66-71.

[2]傅祝能，吳榮輝，郭小妹，等.用流式熒光雜交技術調查浙江義烏婦女HPV感染及分型[J].臨床檢驗雜志,2011,29(8):570-571.

[3]傅祝能，王香梅，單小云，等.端粒酶和姊妹染色單體互換在惡性腫瘤診斷中的價值[J].中華檢驗醫學雜志,2005，28(5):500-502.