測試洛伐他汀膠囊中洛伐他汀含量的方法分析

金 珊

（長春市人民醫院，吉林 長春 130051）

測試洛伐他汀膠囊中洛伐他汀含量的方法分析

金 珊

（長春市人民醫院，吉林 長春 130051）

目的探討高效液相方法測試洛伐他汀膠囊中洛伐他汀含量的的有效方法，并對其可靠性及驗證性進行分析。方法采用TC-C18的色譜柱，使用流動相為60∶40的乙腈-0.020 mol/L磷酸二氫鉀溶液，波長238 cm，外標法定量。結果洛伐他汀含量為2.56～250 mg/L間，其開環酸含量在1.024～0.00 mg/L，二者之間具有良好線性關系，相關系數分別為0.9998、0.9990（n=6），二者具有良好密度；洛伐他汀加樣回收率高達99.22%；在室溫環境下可維持8小時的穩定。結論高效液相方法測試洛伐他汀具有較高的準確性，用時短且操作方便，能夠對洛伐他汀開環酸同時檢測，在洛伐他汀含量檢測中具有顯著效果。

洛伐他汀；開環酸；高效液相方法；含量

洛伐他汀為20世紀80年代開始廣泛使用的新型調脂藥物，療效獨特，因此在心血管系統疾病的治療中廣泛使用。作為HMG-CoA還原酶抑制劑，遇水可溶解，形成-羥基酸。藥物能夠對體內的膽固醇合成產生競爭性抑制作用，促進低密度脂蛋白受體合成，從而對冠心病及動脈粥樣硬化產生顯著效果[1]。近年來對洛伐他汀檢測方法不斷增加，然而相關實驗尚不多見，本次實驗通過高效液相方法對洛伐他汀膠囊內洛伐他汀及其開環酸含量進行測定，具體報道如下。

1 資料與方法

1.1 設備與儀器：采用儀器為Agflent 1260型髙效液相色譜儀，同時使用其配套脫氣機、紫外檢測器、恒溫箱、液相色譜泵、自動進樣器及柱溫箱；控制系統為德國Chemstation化學工作站系統；使用瑞士梅特勒-托利多集團生產的XS205電子天平；上海滬西分析儀器廠生產XW-80AS渦旋混合器；重慶頤洋企業發展有限公司承山AHL-2001-P痕量型分析型超純水機；采用昆山市超聲儀器有限公司生產的KQ2200B超聲波清洗機。

1.2 材料與試藥：洛伐他汀膠囊（生產公司：江蘇蘇中藥業集團股份有限公司，國藥準字：H19990033）使用中國藥品生物制品檢定研究院提供的洛伐他汀對照品，批號為100600-201003；汕頭市西隴化工廠有限公司生產的磷酸二氫鉀，分析純（批號：090307）；美國Tedw A司生產的乙腈，色譜純（批號：1202257）；采用自制去離子超純水，分析純為乙酸乙酯、鹽酸及氫氧化鈉。

1.3 方法

1.3.1 色譜條件：采用美國Agilent公司生產的（5μm、4.6×150mm）TC-C18柱；美國Phenomenex公司生產的（10 μm、4 mm×3 mm）保護柱；采用流動相為60∶40的乙腈-0.020 mol/L磷酸二氫鉀溶液，35 ℃柱溫；1 mL/min流速；波長238 nm，10 μL進樣量。

1.3.2 溶液配制方法：將乙腈5 mL加入洛伐他汀50 mg，之后注入濃度為1 mol/L氫氧化鈉溶液2.5 mL，超聲下放置30min保證溶液內物質完全反應，并將純水150 mL加入，采用鹽酸將pH值調至3.5，并采用乙酸乙酯150 mL分次獲取，獲取乙酸乙脂層蒸干后得到洛伐他汀開環酸。采用精密稱分別取洛伐他汀50 mg、開環酸對照品20 mg，并放置50 mL容量瓶內，注入乙腈進行溶解，之后將乙腈進行稀釋，保證與刻度線同一水平線，搖勻得到0.4 g/L洛伐他汀開環酸及1 g/L洛伐他汀儲備溶液。

1.3.3 配制供試品溶液方法：洛伐他汀膠囊10粒，天平精密稱定后，均勻混合內容物，并取洛伐他汀20 mg放于容量為50 mL的容量瓶內，適量乙腈，搖動溶解洛伐他汀，之后稀釋乙腈，與刻度線同一水平，搖勻。0.45 μm微孔濾膜過濾，精密取濾液5 mL放置在50 mL容量瓶內，加流動相定容至刻度線，充分搖勻后，得到供試品溶液。

取適量陰性對照液、洛伐他汀對照品溶液、供試品溶液，進樣10 μL，對三份溶液色譜圖進行觀察；取適量洛伐他汀及其開環酸對照物溶液，1∶1搖勻，得到進樣洛伐他汀及其開環酸混合對照品溶液（含量分別為0.5、0.2 mg/L），進樣10 μL，對不同濃度洛伐他汀及其開環酸峰面積進行觀察。備制（洛伐他汀40 μg/mL、其開環酸l0 μg/mL）濃度的對照品工作溶液，備5份，進樣10 μL，對峰面積進行測定。在室溫下取供試品溶液，分別在0、4、6、8 h后對色譜峰進行測定。

2 結 果

洛伐他汀峰的理論塔板數＞3000，陰性對照液內未出現干擾峰測定，供試液與對照液內洛伐他汀峰維持時間相同，周圍未出現干擾峰；洛伐他汀在2.56～250 mg/L，其開環酸含量在1.024～0.00 mg/L范圍內具有良好線性關系，橫坐標為洛伐他汀濃度，縱面積為縱坐標，相關系數為0.9998（n=6）；橫坐標為洛伐他汀開環酸濃度，縱坐標為峰面積，相關系數0.9990（n=6）；洛伐他汀RSD值為0.19%，其99開環酸RSD為0.44%，具有良好精密度；洛伐他汀的加樣回收率為98.98%；洛伐他汀在室溫下放置8h后，RSD數值0.49%，洛伐他汀可在室溫環境下維持8 h穩定。

3 討 論

高效液相色譜分析是生化及分析化學中常用的方法，具有高壓、高效、高敏感度、適應范圍廣及分析速度快等優勢，而其色譜柱能夠循環使用，樣品不會受到破壞，極易回收，具有廣泛的使用價值[2-3]。本次試驗中，筆者使用填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動相Ⅰ為甲醇-水-磷酸，結果顯示標準品、供試品內洛伐他汀色譜峰的純度較高，完全符合要求，同時標準品的峰值能夠與基線分離保持一致。在對樣品進行處理時，本次試驗采用直接處理方法，操作方法比較簡單，分離效果良好，同時其基線相對穩定，譜峰突出且尖銳，能夠得到滿意的測量結果。洛伐他汀能夠與體內膽固醇合成過程中產生的限速酶羥甲戊二酰輔酶A還原酶產生競爭性抑制作用[4-5]，從而抑制膽固醇的合成，低密度脂蛋白受體合成明顯增加，主要對肝臟產生影響，在冠心病及動脈粥樣硬化的防治中具有顯著效果[6]。本次試驗中在對洛伐他汀含量進行檢測時，同時對其開環酸含量進行檢測，發現其含量為99.99%，總之在洛伐他汀的檢測中，采用高效液相色譜法操作簡單，準確性高，可作為洛伐他汀膠囊質量控制的重要手段。

[1] 高燕霞,姜建國,張西如,等.HPLC法測定洛伐他汀膠囊的溶出度[J].中國抗生素雜志,2009,34(11):678-683.

[2] 謝靜,李東,王敏,等.HPLC 法測定血脂康膠囊中洛伐他汀的含量[J].中國藥房,2010,21(45):4287-4289.

[3] 劉源,李東,謝靜,等.高效液相色譜法測定脂必泰膠囊中洛伐他汀含量[J].中藥材,2010,33(6):1002-1003.

[4] 羅仁才,孫開奇,謝申猛,等.紅曲中洛伐他汀總量的測定方法[J].衛生研究,2003,32(2):157-158.

[5] 張慶慶,危勤濤,湯斌.毛細管電泳法測定紅曲膠囊中洛伐他汀含量[J].中國實驗方劑學雜志,2008,14(11):4-6.

[6] 馮建立,許振良,王學軍,等.發酵液中洛伐他汀及其開環酸的HPLC測定[J].中國醫藥工業雜志,2006,37(7):494-495.

R927.2

B

1671-8194（2014）28-0086-02