妊娠期肝內膽汁淤積癥患者中miR-185的表達及臨床意義

王淑芬

（南華大學附屬第一醫院婦產科,湖南 衡陽 421002）

妊娠期肝內膽汁淤積癥患者中miR-185的表達及臨床意義

王淑芬

（南華大學附屬第一醫院婦產科,湖南 衡陽 421002）

目的研究miR-185在妊娠期肝內膽汁淤積癥患者中的表達及其在妊娠期肝內膽汁淤積癥中的作用。方法提取42例妊娠期肝內膽汁淤積癥患者及42例同期正常妊娠婦女外周血RNA，qRT-PCR檢測表達。結果miR-185在妊娠期肝內膽汁淤積癥患者中明顯高于正常妊娠婦女。血清miR-185水平與妊娠期肝內膽汁淤積癥患者的年齡、孕周、經產與否無關，但是與圍生兒預后相關。結論血清miR-185在妊娠期肝內膽汁淤積癥的診斷和圍生兒預后預測中發揮重要作用。

妊娠期肝內膽汁淤積癥；miR-185；臨床意義

妊娠期肝內膽汁淤積癥是發生在晚期妊娠的肝臟疾病,產后可治愈。發病最初伴有瘙癢,有時出現黃疸,血膽汁酸、膽紅素、丙氨酸氨基轉移酶和天冬氨酸氨基轉移酶升高。妊娠期肝內膽汁淤積癥有家族遺傳性,可能與種族、地理位置相關以及體內雌激素和孕激素也發揮重要作用[1-2]。自從lin-4 and let-7這兩個miRNA被人們發現,隨后又有很多miRNA被成功地鑒定出來。在人類疾病中,miRNA表達譜表現出獨特的疾病特性并能分類不同疾病類型。miRNA的獨特分類特性與很多疾病的結局也有明顯聯系,包括對治療的反應、復發以及總體生存率的預測。研究發現,miR-185在肺癌、膠質瘤以及結腸癌等多種腫瘤和疾病中表達下調,且抑制多種腫瘤細胞的生長增殖與侵襲[3-5]。本研究旨在探討miR-185在妊娠期肝內膽汁淤積癥患者中的表達及在妊娠期肝內膽汁淤積癥中的臨床作用。

1 材料與方法

1.1 臨床資料

以2010年5月至2012年12月在我院診斷為妊娠期肝內膽汁淤積癥的孕婦42例為研究組,年齡21～41歲。配對同期住院42例正常產婦作為對照,年齡20～42歲。

1.2 妊娠期肝內膽汁淤積癥的診斷依據[2,3]

①中晚期妊娠有全身瘙癢,伴或不伴有黃疸,排除其他皮膚疾病或藥敏性皮炎；②血清膽汁酸≥16 μmol/L,或者血清丙氨酸和天冬氨酸氨基轉移酶＞31 U/L；③分娩后癥狀及體征消失；④排除其他肝臟疾病。

1.3 外周血RNA提取及miRNA檢測

利用RNA抽提試劑盒提取5ml外周血的RNA存于-80 ℃。逆轉錄RNA 1μg。16 ℃30 min,42 ℃ 30 min,85 ℃ 10 min,4 ℃ 10 min,-20 ℃保存。qRT-PCR檢測,置于qRT-PCR儀內,95.0 ℃,3 min；95.0 ℃, 12 s；62.0 ℃,35 s,40個循環；熔解曲線分析從62.0 ℃開始至95.0℃停止。

1.4 統計學分析

用SPSS13.0軟件,采用t檢驗,P＜0.05,差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 miR-185在妊娠期肝內膽汁淤積癥患者及正常妊娠婦女外周血的表達

qRT-PCR結果表明,42例妊娠期肝內膽汁淤積癥患者血清中miR-185的表達為對照組的（0.62±0.14）倍,差異有統計學意義（P＜0.05）。

2.2 血清miR-185水平與妊娠期肝內膽汁淤積癥患者臨床參數的關系

血清miR-185在孕周≥35的患者miR-185表達為（0.56±0.14）倍,＜35的患者表達為0.77±0.24倍；年齡≥28歲妊娠期肝內膽汁淤積癥患者中的表達為對照組的（0.71±0.11）倍,＜28歲患者miR-185的表達為（0.59±0.14）倍；經產婦及未產婦中的表達分別為（0.66±0.13）倍和（0.58±0.14）倍,統計學分析顯示血清miR-185與妊娠期肝內膽汁淤積癥患者的年齡、孕周、經產與否及胎數無關（P＞0.05）。血清miR-185在圍生兒正常的妊娠期肝內膽汁淤積癥患者中表達為（0.72±0.15）倍,在有圍生兒早產、死胎、死產的妊娠期肝內膽汁淤積癥患者中的表達為（0.24±0.08）倍,差異有統計學意義（P＜0.01）。

3 討 論

妊娠期肝內膽汁淤積癥在不同國家對圍生兒的影響不一樣。妊娠期肝內膽汁淤積癥發病機制研究已取得了一定進展,但是仍不十分明確。miRNAs包含19-25個核苷酸,它是一類非編碼的小分子單鏈RNAs,具有高度保守性、時間和組織特異性。通過與靶基因mRNA完全或不完全地堿基配對,RNA誘導的沉默復合物可降解靶mRNA或抑制翻譯,并且在轉錄后水平調節靶基因的表達。miRNAs廣泛存在于真核生物中,調節細胞增殖、分化和凋亡。特定的miRNAs在不同的腫瘤和不同的階段高表達或低表達,這意味著與腫瘤的發生發展以及預后具有一定相關性[6]。但無研究表明miRNA與妊娠期肝內膽汁淤積癥發病相關。本研究通過檢測血清中miR-185的表達分析其在正常妊娠婦女和妊娠期肝內膽汁淤積癥患者中的表達差異。結果表明,血清miR-185水平在妊娠期肝內膽汁淤積癥患者中明顯下調。隨后我們分析了miR-185與妊娠期肝內膽汁淤積癥患者臨床參數的關系。miR-185與妊娠期肝內膽汁淤積癥患者的年齡、孕周、經產與否無關,但與妊娠期肝內膽汁淤積癥患者圍生兒預后相關,圍生兒正常的妊娠期肝內膽汁淤積癥患者miR-185的水平明顯低于圍生兒早產、死胎、死產的妊娠期肝內膽汁淤積癥患者的表達。因此,血清miR-185的表達可作為妊娠期肝內膽汁淤積癥圍生兒預后預測的潛在靶點。

[1] Hand NJ,Horner AM,Master ZR,et al.MicroRNA profiling identifies miR-185 as a regulator of disease-associated pathways in experimental biliary atresia[J].J Pediatr Gastroenterol Nutr,2012,54(2):186-192.

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[4] Zhang Z,Tang H,Wang Z,et al. MiR-185 Targets the DNA Methyltransferases 1 and Regulates Global DNA Methylation in Human Glioma[J].Mol Cancer,2011,10(1):124.

[5] 唐海林,鄧敏,廖前進,等.結腸癌組織中miR-185的表達及其臨床意義[J].中南醫學科學雜志,2011,39(5):17-18.

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R714.7

B

1671-8194（2014）25-0253-02