中國人群的AXIN2 rs2240308多態(tài)性與肺癌易感性的關(guān)系研究

劉 丹 李 凌 楊玉光 劉文濤 吳 瑾*

（哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院內(nèi)七科，哈爾濱 黑龍江 150081）

中國人群的AXIN2 rs2240308多態(tài)性與肺癌易感性的關(guān)系研究

劉 丹 李 凌 楊玉光 劉文濤 吳 瑾*

（哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院內(nèi)七科，哈爾濱 黑龍江 150081）

目的旨在探討AXIN2外顯子1-148（rs2240308）多態(tài)性與肺癌易感性在中國漢族人群的關(guān)系。方法在555例對(duì)照組和520例肺癌患者中使用TaqMan SNP基因分型方法對(duì)AXIN2外顯子1-148SNP進(jìn)行基因分型。使用非條件Logistic回歸分析來計(jì)算調(diào)整后的比值(OR)和95%可信區(qū)間(95% CI)的。結(jié)果AG、AA和GG基因型出現(xiàn)頻率在對(duì)照組和病例組之間存在顯著差異，相比于那些攜帶GG基因型的患者，攜帶A等位基因(AG+AA基因型)患者其肺癌易感性較高。結(jié)論在中國人群中AXIN2外顯子1-148 G->A多態(tài)性(rs2240308)患者其肺癌易感性較高。進(jìn)一步表明AXIN2可作為肺癌相關(guān)基因。

AXIN2；多態(tài)性；肺癌；中國人口

肺癌是一種人類癌癥中最常見的類型并且是全世界癌癥死亡的首要原因。與肺癌風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)的遺傳多態(tài)性的判定是了解這種致命的疾病的病因以及開發(fā)新的方法來早期診斷和預(yù)防該疾病的關(guān)鍵。

支架蛋白Axin（軸抑制蛋白）是經(jīng)典Wnt/β-連環(huán)蛋白信號(hào)傳導(dǎo)途徑中的負(fù)調(diào)節(jié)因子，并且在許多人類癌癥中起到腫瘤抑制劑的作用。研究發(fā)現(xiàn)在肺癌中AXIN2的低表達(dá)與β-連環(huán)蛋白積聚相關(guān)，并且在非小細(xì)胞肺癌發(fā)生中Axin 2的表觀遺傳沉默導(dǎo)致β-catenin核積累。在肺癌中AXIN2基因的腫瘤特異性突變尚未見報(bào)道。然而，兩個(gè)由日本人和土耳其人參與的研究顯示AXIN2外顯子1-148 A/G（T/C上的轉(zhuǎn)錄等位基因；rs2240308）的SNP多態(tài)性與肺癌有很強(qiáng)的關(guān)聯(lián)。在這些研究中發(fā)現(xiàn)，與CCT（脯氨酸）相比TCT（絲氨酸）密碼子50與肺癌風(fēng)險(xiǎn)降低相關(guān)。到目前為止，還沒有中國人群Axin2 SNP多態(tài)性與肺癌之間關(guān)系的報(bào)告。因此我們對(duì)中國人AXIN2外顯子1-148(rs2240308）SNP多態(tài)性與肺癌易感性之間的關(guān)系進(jìn)行了一項(xiàng)對(duì)照研究。

1 材料與方法

1.1 研究人群

病例組是由520例肺癌患者組成，這些患者從2011年9月至2012年9月到哈醫(yī)大附屬第三醫(yī)院就醫(yī)。所有患者均是新發(fā)病例并且經(jīng)過病理證實(shí)。排除標(biāo)準(zhǔn)包括癌癥病史以及化療或放療。對(duì)照組包括555名是隨機(jī)抽取的同一時(shí)間同一地區(qū)的年齡、性別、出生地相匹配的健康人群。對(duì)照組人群沒有癌癥病史，沒接受過化療或放療。所有受試者均隨機(jī)從哈爾濱市及其周邊地區(qū)抽取。

1.2 DNA提取和TaqMan SNP基因分型分析

EDTA-抗凝靜脈血液樣本在-70 ℃下保存。根據(jù)說明書使用RelaxGene血液DNA系統(tǒng)，從全血中分離出分離基因組DNA。使用基于TaqMan SNP基因分型分析儀與ABI7900 HT快速實(shí)時(shí)定量PCR系統(tǒng)和SDS2.4軟件進(jìn)行AXIN2外顯子1-148 (2240308)SNP多態(tài)性的基因分型。其檢測(cè)ID是C_2577354_1_。每次反應(yīng)均采用的Taqman通用預(yù)混液、Taqman探針10 ng DNA來進(jìn)行分析。為了質(zhì)量控制，在雙盲狀態(tài)下進(jìn)行基因分型過程。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

使用HaploView4.2軟件通過卡方檢驗(yàn)來檢測(cè)其對(duì)Hardy-Weinberg平衡的適應(yīng)性。基因型與肺癌風(fēng)險(xiǎn)之間的關(guān)聯(lián)是由多因素logistic回歸分析來進(jìn)行評(píng)估。采用SPSS15.0軟件以比值比（OR）及其95%可信區(qū)間（CI）來表示。P＜0.05被認(rèn)為是統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié) 果

在本病例對(duì)照研究，共1075例中國人，漢族（520例肺癌患者和555名健康對(duì)照受試者）進(jìn)行AXIN2外顯子1-148基因多態(tài)性的檢測(cè)。受試者的基本特征總結(jié)為，在患者組和對(duì)照組中男女比例分別為1∶1.43和1∶1.40。患者組和對(duì)照組的平均年齡分別為（57.78±9.89）歲和（52.21±10.56）歲。患者組和對(duì)照組在年齡（P=0.47）、性別（P=0.68）或吸煙狀態(tài)（P=0.90）方面沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

AXIN2外顯子1-148基因型分布狀態(tài)與對(duì)照組和肺癌組中患者等位基因頻率的分析如下。對(duì)照組和肺癌組中觀察到的AXIN2外顯子1-148A/G多態(tài)性的基因型分布狀態(tài)均符合Hardy-Weinberg平衡(對(duì)照組P=0.79，肺癌組P=0.27)。對(duì)照組和肺癌組中等位基因A對(duì)比等位基因G的出現(xiàn)頻率分別為0.31%、0.69%和0.36%、0.64%。與對(duì)照組相比肺癌組中A等位基因更加普遍(χ2=6.619，OR=0.7865，CI 95%=0.6548-0.9445，P=0.01009)。對(duì)照組中基因型AG、AA和GG的出現(xiàn)頻率分別是45.95%，12.07%和38.02%，而肺癌患者組中分別是41.54%，9.04%和45.19%。雙側(cè)卡式分析表明AG，AA和GG基因型比率在對(duì)照組和肺癌組中有顯著性差異(χ2=6.849，P=0.03256，df=2)。非條件Logistic回歸分析表明，相比于那些攜帶GG基因型人群，攜帶A等位基因（AG+AA基因型）的受試者其肺癌易感性較強(qiáng)(OR=0.733，CI 95%=0.5726-0.9393，P=0.01382)。

3 討 論

在本研究中，通過555名對(duì)照患者以及520例肺癌患者的DNA基因分型后結(jié)果，我們發(fā)現(xiàn)在中國漢族人群中AXIN2外顯子1-148 A->G多態(tài)性與肺癌風(fēng)險(xiǎn)之間存在關(guān)聯(lián)。

從生物學(xué)角度來說，AXIN2基因多態(tài)性和肺癌之間完全可能存在關(guān)系。研究表明Axin2是Wnt信號(hào)傳導(dǎo)通路中的負(fù)調(diào)節(jié)物。與持續(xù)表達(dá)的Axin1不同，AXIN2作為β-連環(huán)蛋白降解復(fù)合物中的限制因素。

雖然AXIN2基因突變?cè)诜伟┲惺呛币姷模袃身?xiàng)研究已經(jīng)報(bào)道了AXIN2外顯子1-148 A->G（C->T轉(zhuǎn)錄等位基因；rs2240308）與肺癌存在關(guān)系。一項(xiàng)日本人參與的對(duì)照研究表明，與健康對(duì)照組相比，肺癌患者AXIN2純合子T/T的外顯子-148的（絲氨酸密碼子50 ）的頻率顯著降低，且對(duì)T/T基因型與肺癌易感性降低相關(guān)。另外一項(xiàng)土耳其人參與的研究表明，Axin2 148 C->T (rs2240308)而不是另外七個(gè)AXIN2 SNP多態(tài)性與肺癌相關(guān)。與日本的研究相一致，他們發(fā)現(xiàn)了148 TT基因型與肺癌風(fēng)險(xiǎn)降低相關(guān)。

我們研究中國漢族人群的結(jié)果與日本人和土耳其人的結(jié)果相一致。值得注意的是我們發(fā)現(xiàn)Axin2外顯子1-148等位基因A與肺癌易感性降低相關(guān)。由于我們的研究有相對(duì)較大的樣本量，因此先前的研究中Axin Pro50Ser和肺癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)之間的顯著性關(guān)系得到了確認(rèn)。據(jù)我們所知這是第一個(gè)中國人群中Axin2多態(tài)性與肺癌關(guān)系的報(bào)道。

總而言之，我們發(fā)現(xiàn)在中國漢族人群中Axin2Exon1-148 A->G多態(tài)性(rs2240308)與肺癌發(fā)生有關(guān)。這進(jìn)一步表明Axin2是一個(gè)癌癥相關(guān)基因。但是該基因突變?cè)诜伟┌l(fā)生中的功能依然需要進(jìn)一步研究確定。

R734.2

B

1671-8194（2014）23-0080-02

黑龍江省教育廳2012年度科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目資助（項(xiàng)目編號(hào)：12521317）

*通訊作者：E-mail:liudantg@126.com