386株銅綠假單胞菌的耐藥性分析

易春梅

湖南懷化市第一人民醫院檢驗科，湖南懷化 418000

銅綠假單胞菌（Pseudomonas aerugonosa，PA）是臨床上較為常見的一種條件致病菌，即只在當機體處于惡性腫瘤，血液病等抵抗力低下或者受到侵襲性操作治療時，易侵入機體引發感染[1]。銅綠假單胞菌在臨床標本中的分離率僅次于大腸埃希菌而排在第二位，其主要引發的感染有肺部感染、心內膜炎以及敗血癥等，且由于菌體往往很難除，常引起感染的反復發作[2-3]。近年來，由于免疫抑制劑以及激素的的長期大量應用，尤其是抗生素的濫用，導致銅綠假單胞菌的而藥性日趨嚴重[4-5]，因此針對PA的高分離率、高病死率以及高耐藥性的威脅，本文對我院2012—2013年間臨床微生物實驗室分離的銅綠假單胞菌的分布特征和耐藥情況進行了回顧分析，現將結果報道如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源

從我院2012年5月—2013年5月門診與住院的各類標本中痰、咽拭子、中段尿、胸腹腔積液、腦脊液、血液以及各類分泌物及引流液，分離出386株銅綠假單胞菌，此次統計標本量不包含同一患者多次分離菌株。

1.2 菌株分離與鑒定

按《全國臨床檢驗操作規程》[6]對標本進行接種，分離，鑒定。采用標準菌株銅綠假單胞菌ATCC27853和大腸埃希菌ATCC25922做為質控菌株。

1.3 藥敏實驗

病原菌耐藥試驗采用法國梅里埃ATB Expression及ATB G-5 腸細菌藥敏試劑盒（CODE：14335，DESCRIPTION：ATB UR 5,25 STRIPS；生產企業：bioMerieux，sa，國家：法國），全自動微生物分析系統VITEK-2儀,革蘭陰性桿菌鑒定卡 (GN)、藥敏卡 (ASTGN10)均為法國生物梅里埃公司產品。K-B法藥敏紙片均為英國Oxoid公司產品。采用K-B法,Muller-Hinton瓊脂培養基,藥敏紙片為復方新諾明、慶大霉素、四環素、環丙沙星、哌拉西林、頭孢他啶、頭孢噻肟、阿米卡星、頭孢吡肟、左氧氟沙星、加替沙星、頭孢西丁。均為英國OXOID公司提供,以ATCC27853銅綠假單胞菌為質控菌株,以美國臨床實驗室標準化委員會標準為藥敏判讀標準。

1.4 統計分析

用率、構成比進行統計學描述分析，對計數資料進行χ2檢驗統計分析，其中“中介”的藥敏結果在統計過程中歸入耐藥的范圍。

2 結果

2.1 標本來源分布情況

2012年5月—2013年5月共分離出386株銅綠假單胞菌，其中痰液來源的標本最多，共243株，占總標本來源的62.95%。具體構成比的分布情況如圖1所示。

圖1 386株銅綠假單胞菌在各臨床標本中的分布情況

2.2 標本科室分布情況

銅綠假胞菌于ICU（重癥監護室）的分布最多共計155株，所占構成比為40.16%。于呼吸科所占比例僅次于ICU，共計95株，所占構成比為24.61%。其在各臨床科室的具體分布情況請見表1。

表1 386株銅綠假單胞菌于各臨床科室的分布情況

2.3 銅綠假單胞菌的分離率

2012—2013年間，從1936株革蘭染色陰性桿菌中，共分離出銅綠假單胞桿菌386株，總分離率為19.94%，且每月的分離率差別無統計醫學意義（P>0.05）。本年度每月銅綠假單胞菌的具體分離率如圖2所示。

圖2 2012年5月—2013年5月革蘭陰性桿菌中銅綠假單胞菌的分離率

2.4 銅綠假單胞菌的藥物敏感率

386株銅綠假單胞菌均進行了16種常用抗生素的藥敏檢測，其具體檢測敏感率和耐藥菌株數見表2。

表2 銅綠假單胞菌對16種常用抗生素的敏感結果

3 討論

銅綠假單胞菌是目前臨床上最重要也是最為常見的假單胞菌，其存在的重要條件是潮濕的環境，因此在人體的呼吸道、皮膚以及腸道中較為常見，同時其也是一種較為常見的引發醫院內感染的條件致病菌之一[7-8]。

從圖1可見，于2012年5月—2013年5月痰及咽拭子檢出的銅綠假單胞菌的構成比為62.95%，而其在創傷分泌物中的分布僅次于痰及咽拭子占13.21%，因此與相關文獻報導相一致的是銅綠假單胞菌主要引起呼吸道、燒傷創面及傷口的感染[5]。同時由表1的數據，可以發現由于患者存在抵抗力低及基礎性疾病造成銅綠假單胞菌具有明顯的科室或病區集中趨勢，其在重癥ICU及呼吸科的構成比分別為40.16%和24.61%。

從藥敏結果中可以看到銅綠假單菌對碳青酶烯類抗菌藥物如亞胺培南、美洛培南及頭孢菌素/酶抑制劑復合藥如頭孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦的敏感性高，敏感率分別為83.16%、87.56%、78.24%、81.35%。這主要是由于碳青酶烯類抗菌藥物與其他抗生素相比，對于β-內酰胺酶更具有耐受性，而與青霉素結合蛋白又具有很強的親和力，這使其具有較高的抑菌活性，同時被用來治療院內多重耐藥菌及重癥感染[9]。而β-內酰胺酶抑制劑的復合藥物由于具有抑制β-內酰胺酶的活性，從而與單藥成份相比，其對于產β-內酰胺酶的耐藥菌株的敏感性要明顯增強[5]。阿米卡星屬于氨基糖苷類抗生素，其抗菌效果較好，但由于其有一定的腎毒性及對耳毒性[3-5]，因此臨床上較少單獨使用，往往聯合其他藥物使用。同時本文數據顯示，銅綠假單菌對于頭孢吡肟及替卡西林的耐藥性分別為43.52%、61.14%，說明本地區多重耐藥的銅綠假單胞菌的產生較為嚴重，在臨床治療過程中應該引以為重。

銅綠假單胞菌的耐藥機制較復雜，據相關研究報道攜帶各種β-內酰胺酶編碼基因和外膜通道蛋白oprD2基因缺失是導致銅綠假單胞菌對β-內酰胺類抗生素耐藥的重要原因[10]。耐藥株產生的β-內酰胺酶以AmpC和ESBLs為主，由于AmpC酶是一類可被β-內酰胺類抗生素誘導的頭孢菌素酶，因此頭孢曲松、頭孢噻肟的高耐藥率除細菌本身的生物學特征外，還可能與第三代頭孢菌素在臨床作為抗感染一線藥物廣泛應用而導致銅綠假單胞菌產生高水平染色體介導的Ampc酶有關[11-12]。

綜上所述，我院銅綠假單胞菌的耐藥性較為嚴重，因此臨床用藥要盡可能以藥敏結果為指導，同時要做到院內感染細菌的耐藥性監測。盡可能規避抗生素的濫用造成的耐藥菌株的產生。且應當盡可能規避廣譜抗生素的長期使用，進而在提高臨床治療療效的同時又可防止耐藥菌株的產生。

[1]Bonfiglio G,Lakani Y,Franchino L,et al.Mechanisms of bata-lactam resistance Pseudomonas aeruinosa isolated in an Italian survey[J].J Antimicrob chemother,1998，42(6):697-702.

[2]Strateva T,Yordanow D.Pseudomonas aeruginosa–a phenomenon of bacterial resistance[J].Med Microbiol,2009,58(Pt9):1133-1148.

[3]吳立明,王平.380株銅綠假單胞菌的耐藥性分析[J].中華醫院感染學雜志，2012,22(88):1705-1706.

[4]周立新,張秀平,方濱.重癥監護病房感染患者銅綠假單胞菌的分離與耐藥性分析[J].中華醫院感染學雜志,2004,14(7):807-808.

[5]阮衛.銅綠假單胞菌耐藥機制的研究進展[J].國外醫學臨床生物化學與檢驗學分冊,2004,25(6):536-538.

[6]王軍,張建菊,劉華，等.銅綠假單胞菌致慢性阻塞性肺疾病患者肺部感染的危險因素及耐藥性調查[J].中華醫院感染學雜志,2011,3(3):457-458.

[7]馬越,李景去,張新妹.2002年臨床常見細菌耐藥性監測[J].中華檢驗醫學雜志,2004,27(1):38-45.

[8]陳林珍,李瑞瑩,曾智華.489株銅綠假單胞菌的感染分布和耐藥監測[J].檢驗醫學與臨床,2012,9(8):928-929.

[9]趙麗瑞,袁恒杰.碳青霉烯類抗菌藥物耐藥機制研究進展[J].中國藥房,2012,23(40):3828-3830.

[10]陳華彬,王冬國,王紅戟.多藥耐藥銅綠假單胞菌耐藥基因的研究[J].中華醫院感染學雜志,2013,3(3):488-491.

[11]楊玉杰,于魁忠,張麗君，等.銅綠假單胞菌耐藥性分析及醫院感染控制對策[J].中華醫院感染學雜志,2013,23(15):3755-3756.

[12]龍紹芬,黎鐵斌.銅綠假單胞菌的耐藥性分析與醫院感染控制措施[J].中外健康,2011,8(24):1672-5082.