腹腔鏡下根治性腎切除術對機體細胞免疫的影響

[摘要] 目的 探討兩種手術方式對患者圍手術期機體免疫功能的影響。方法 68例接受手術的腎腫瘤患者，按手術方式分為腹腔鏡組與開腹組，對其血液樣本中的淋巴細胞亞群進行檢測，并統計分析。結果 腹腔鏡組的CD3亞群在術前1 d、術后第1、3、5 天比較，差異無統計學意義（P>0.05）；開腹組各時間點比較，差異有統計學意義（P<0.05）；腹腔鏡組的CD4亞群各時間點比較，差異無統計學意義（P>0.05）；開腹組各時間點比較，差異有統計學意義（P<0.05）；腹腔鏡組與開腹組各時間點CD8水平比較，差異均無統計學意義（P>0.05）。腹腔鏡組與開腹組各時間點CD25水平比較，差異有統計學意義（P<0.05）；腹腔鏡組CD69在不同時間點比較，差異無統計學意義（P>0.05），腹腔鏡組與開腹組的CD95、CD95L不同時點比較，差異均無統計學意義（P>0.05）。結論 腹腔鏡手術對患者機體免疫功能的影響小于開腹手術，對患者的應激刺激小，且安全有效，因此應用前景廣泛，更易被患者接受，值得臨床推廣應用。

[關鍵詞] 腹腔鏡；開腹手術；腎腫瘤；免疫功能

[中圖分類號] R735.37 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2013）29-0028-03

腎腫瘤在泌尿系統疾病中較為常見，多為惡性。常見的腎腫瘤包括源自腎實質的腎細胞癌、腎母細胞瘤以及發生于腎盂腎盞的移行細胞乳頭狀腫瘤等[1]。其常見癥狀包括腰背部疼痛、血尿、腹部腫塊等。目前，腎腫瘤的手術治療主要有腹腔鏡下手術及開放性根治術，為探討兩種手術方式對患者圍手術期機體免疫功能的影響，我們選擇了68例接受手術的腎腫瘤患者，對其血液樣本中的淋巴細胞亞群進行了檢測，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2006年6月～2012年月12月在我科接受腎腫瘤手術的患者68例，按照手術方式不同將患者分為腹腔鏡組與開腹組。腹腔鏡組患者34例，均行腹腔鏡手術，其中男20例， 女14例， 年齡25～64歲， 平均 （46.7±5.1）歲。左腎腫瘤19例，右腎腫瘤15例；開腹組患者34例，均行開放性根治手術，其中男18例， 女16例， 年齡24～61 歲， 平均（47.3±3.2）歲，左腎腫瘤17例，右腎腫瘤17例。按照TNM分期，入選患者的腫瘤均在T1期，均無其他慢性疾病或內分泌系統疾病。兩組患者平均年齡、性別比例、病灶位置比較，差異均無統計學意義，具有可比性（P>0.05）。

1.2 儀器與方法

1.2.1儀器與試劑 儀器包括EPICS-XL型流式細胞儀（美國Beckman-Coulter公司生產），2100型離心機（美國KUBOTA公司生產），Q-PREP儀（由美國Beckman-Coulter公司生產）。試劑包括單克隆抗體（小鼠抗人IgG型）、異硫氰酸熒光素、藻紅蛋白。

1.2.2檢測方法 于術前1 d、術后第1、3、5天清晨抽取血液樣本，用肝素抗凝保存。用單克隆抗體直接標記血液樣本，根據IgG亞類設相應的陰性對照組。在25℃室溫、避光條件下孵育15 min，再用Q-PREP儀直接處理。將抗體間接標記于小試管內，加入100 μL全血標本，再加入一抗，在4℃條件下冰浴30 min，用PBS溶液洗滌后再加入二抗，在4℃條件下再冰浴30 min，后用Q-PREP儀處理，所有標本必須在6 h之內進行檢測。檢測過程如下，用488 nm氬離子激光激發血液樣本，可收集到流動細胞的前向散射光和側向散射光，即形成Dot Plot直方圖，圈定其中的淋巴細胞群，適當調節光電倍增管電壓，對血液樣本進行逐管檢測[2]。

1.3 觀察指標

檢測患者術前1 d、術后第1、3、5天的血淋巴細胞亞群的表達。主要檢測的淋巴細胞亞群有CD3、CD4、CD8、CD25、CD69、CD95、CD95L。

1.4 統計學方法

數據以SPSS 13.0統計軟件分析處理，計量資料以（x±s）表示。本研究中的實驗設計采用重復測量設計，為兩因素多水平設計，故采用兩因素多水平方差分析對所得數據進行統計處理。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

結果顯示，腹腔鏡組的CD3亞群在術前1 d、術后第1、3、5 天水平組內比較，差異無統計學意義（F=3.034，P>0.05）。開腹組各時間點進行組內比較，差異有統計學意義（F=5.251，P<0.05）；術后第1、3天CD3水平明顯下降，術后第5天恢復正常。腹腔鏡組的CD4亞群各時間點進行組內比較，差異無統計學意義（F=2.633，P>0.05）；開腹組各時間點進行組內比較，差異有統計學意義（F=6.452，P<0.05），術后第l、3 天CD4水平明顯下降，術后第5天恢復正常。腹腔鏡組與開腹組各時間點的CD8水平進行組內比較，差異均無統計學意義（F=2.434、3.051，P>0.05），組間比較，術后第1、5 天，腹腔鏡組CD8水平低于開腹組，差異有統計學意義（t=5.773，4.336，P<0.05）。腹腔鏡組與開腹組各時間點的CD25水平各自進行組內比較，差異有統計學意義（F=6.249、4.312，P<0.05）。組間比較，腹腔鏡組術后3天CD25 的水平明顯高于開腹組，差異有統計學意義（t=12.389，P<0.05）。腹腔鏡組的CD69在不同時間點進行組內比較，差異無統計學意義（F=3.055，P>0.05），開腹組各時間點進行組內比較，差異有統計學意義（F=6.246，P<0.05），術后第3天起水平明顯升高。腹腔鏡組與開腹組的CD95、CD95L不同時點各自進行組內比較，差異均無統計學意義（F=2.745、2.298，P>0.05）。見表1。

3 討論

20世紀90年代，Clayman等開展了第一例腹腔鏡腎腫瘤切除術即獲得了成功，腹腔鏡下根治性腎切除術開始逐漸應用于泌尿外科。與傳統的開腹手術相比，應用腹腔鏡進行手術具有對患者創傷小、患者術后恢復快、住院時間短、切口小而美觀等優點，有報道還對比了兩種手術方式的臨床效果，結果顯示，腹腔鏡手術的臨床療效優于開腹手術，甚至有學者認為腹腔鏡下腎腫瘤切除術有望成為治療腎腫瘤的標準術式[3]。腹腔鏡手術的療效雖然得到了許多報道的肯定，但關于此種術式對于患者機體免疫功能影響的報道卻較少，本實驗的目的即是探討不同術式對圍手術期患者機體免疫情況的影響。

一般來說，患者在手術后機體免疫功能的改變主要與手術對患者的刺激程度大小有關，患者所受刺激與創傷越大，則細胞的免疫功能受抑制越重，其變化機制目前尚不明確。有研究報道[4]稱，手術對患者體內T細胞的免疫功能影響最大，主要表現為血T細胞總數減少及亞群比例失調， T細胞的增殖反應能力下降。因此，T細胞亞群的變化可以反應機體免疫情況的變化，T細胞亞群的水平作為衡量免疫狀態的重要參數[5]。其中CD3代表了外周血中的成熟T細胞[6]，本文結果顯示，腹腔鏡組CD3亞群在術前1天、術后第1、3、5 天比較差異無統計學意義（P>0.05）。開腹組各時間點比較，差異有統計學意義（P<0.05）。說明腹腔鏡手術前后患者的免疫狀況變化不大，而開放手術前后，患者的免疫狀況變化較大。CD4又名輔助細胞，其功能是促進B細胞、T細胞和其他免疫細胞的增殖和分化，協調細胞間的相互作用。CD8主要有抑制細胞和殺傷細胞的作用，其功能是抑制免疫應答的活化。結果顯示腹腔鏡組CD4亞群各時間點比較差異無統計學意義（P>0.05）；開腹組各時間點比較，差異有統計學意義（P<0.05），術后第l、3 天CD4水平明顯下降，術后第5天恢復正常。腹腔鏡組與開腹組各時間點的CD8水平進行組內比較，差異均無統計學意義（P>0.05），組間比較，術后第1、5 天，腹腔鏡組CD8水平低于開腹組，差異有統計學意義（P<0.05）。提示腹腔鏡組患者在圍術期免疫力變化不大，而開腹組患者在術后免疫力明顯下降，到術后第5天細胞亞群才逐漸上升，恢復正常水平。

C25是T、B細胞的低親和力受體，代表了T細胞的活化程度[7]，本文結果顯示，腹腔鏡組與開腹組各時間點CD25水平比較差異均有統計學意義（P<0.05），兩組均于術后第3天升高，且腹腔鏡組的升高程度高于開腹組，說明腹腔鏡組患者的T細胞活化程度更高，免疫功能高于開腹組。CD69[8，9]代表了T細胞、B細胞與NK細胞的活化程度，在許多病變中具有早期臨床指導意義。本研究結果顯示，腹腔鏡組CD69在不同時間點比較差異無統計學意義（P>0.05），開腹組各時間點比較，差異有統計學意義（P<0.05），術后第3天起水平明顯升高。開腹組的活化程度高于腹腔鏡組，表明開腹組患者圍手術期機體處于免疫細胞高活化狀態。

CD95、CD95L可以維持免疫系統的穩定性，保持免疫細胞增殖與凋亡的平衡性，本研究結果顯示，CD95、CD95L不同時點比較差異均無統計學意義（P>0.05），但開腹組CD95、CD95L在術后高于術前，說明開腹組細胞凋亡程度較高，手術中受抑制程度較深。

綜上所述，腹腔鏡手術對患者機體免疫功能的影響小于開腹手術，對患者的應激刺激小，且安全有效，因此應用前景廣泛，更易被患者接受，值得臨床推廣應用。

[參考文獻]

[1] 朱捷，高江平，徐阿祥. 無需打結的后腹腔鏡保留腎單位腎部分切除術——介紹一種快速簡單的腹腔鏡縫合術[J]. 臨床泌尿外科雜志，2010，45（5）：78-80.

[2] 王林輝，盛海波，劉冰. 超早期腎動脈阻斷技術在經腹腹腔鏡腎癌根治術中的安全性及可行性研究[J]. 第二軍醫大學學報，2011，56（9）：35-39.

[3] 范小明，王力，張大宏. 腹腔鏡超聲在中央型腎腫瘤腹腔鏡切除術中的應用價值[J]. 中華超聲影像學雜志，2011，63（9）：78-81.

[4] 姚鯤，周利群，李學松. 腹腔鏡與開放性腎部分切除術治療小腎癌的安全性與療效分析[J]. 中華外科雜志，2010，58（5）：66-68.

[5] 嚴俊，余輝，應敏剛. 腹腔鏡下與開放性根治性腎切除術的前瞻性隨機對照研究[J]. 中華泌尿外科雜志，2010，58（7）：45-47.

[6] 李煒. 腎腫瘤腹腔鏡輔助下與開放腎部分切除術的治療效果分析[J]. 醫藥前沿，2013，7（13）：97-99.

[7] 蔡林，周利群. 腹腔鏡腎部分切除術治療中心型或腎門旁腎腫瘤[J]. 現代泌尿外科雜志，2011，36（2）：56-58.

[8] 王林輝，陳偉，楊慶. 腹腔鏡保留腎單位手術治療T1期腎癌的臨床療效分析[J]. 第二軍醫大學學報，2010，56（6）：68-70.

[9] 楊智玲，黃德櫻，王光輝. 后腹腔鏡小兒腎腫瘤切除對血流動力學和血氣的影響[J]. 臨床麻醉學雜志，2010，23（1）：67-69.

（收稿日期：2013-07-24）