不同炮制時間對何首烏中蒽醌成分含量的影響

摘要：目的 通過不同炮制時段來研究何首烏中蒽醌的含量變化情況。方法 何首烏分別采用黑豆汁拌蒸不同時段， 醋酸鎂比色法分別測定炮制飲片中游離蒽醌和總蒽醌的含量。結果 用黑豆汁拌蒸的何首烏飲片10h內游離蒽醌含量逐漸升高， 總蒽醌含量沒有顯著性變化。結論 何首烏飲片的炮制時間對其藥性成分有影響，應統一規范其炮制時間。

關鍵詞： 何首烏； 高效液相色譜法； 醋酸鎂比色法

中圖分類號：R943.1 文獻標識碼：C 文章編號：1005-0515（2013）11-084-02

何首烏為蓼科植物何首烏（P olygonum multif lorum Thunb）。 的干燥塊根， 為常用中藥。生品具有解毒、消癰、潤腸通便之功效。制首烏具有補肝腎、益精血、烏須發、增強免疫力、改善記憶障礙及抗衰老等功效[1]。何首烏中主要有效成分為蒽醌類和二苯乙烯化合物。結合蒽醌具有瀉下作用， 何首烏經炮制后結合蒽醌逐漸轉為無瀉下作用的游離蒽醌[2] 。現有的炮制方法有多種， 但各種方法均未規范其炮制時間。炮制時間的長短對其各個成分的含量影響較大，探明其在炮制前后主要成分變化是很有必要的。本實驗選擇5中國藥典6中規定的黑豆汁拌蒸法， 考察不同時間的黑豆汁拌蒸工藝對何首烏中蒽醌主要化學成分的影響。

1 器材

日本島津高效液相色譜儀， SPD-10VAP 型紫外檢測器；FA2004電子天平；UV-2201型紫外- 可見分光光度計（日本Sh-im adzu）， AS3120型超聲波清洗器（奧特賽思儀器有限公司）。何首烏藥材由吉林敖東藥業集團股份有限公司提供， 經鑒定均為蓼科植物何首烏的干燥塊根。實驗樣品為實驗室自制的何首烏生飲片， 經黑豆汁拌蒸0， 2， 4， 6， 8， 10 h的飲片。黑豆汁拌蒸法： 取黑豆適量（ 1 /10何首烏的量）， 加適量的水煎煮2次，用200目篩絹濾出， 合并濾液， 濃縮至約黑豆的2.5 倍。將黑豆汁加入何首烏飲片中，拌勻，浸潤24 h，取出浸潤后的何首烏適量作為0 h飲片單放， 其余的按2，4，6，8，10 h進行蒸制。乙腈為色譜純（美國F isher公司）； 水為重蒸餾水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結

2.1 對照品溶液的制備

精密稱取經105e干燥至恒重的1，8- 二羥基蒽醌對照品5.1mg， 置25ml容量瓶中， 甲醇溶解并定容， 作為對照品溶液。

2.2 供試品溶液的制備

取各何首烏飲片粉末（ 過80目篩）0. 5 g， 精密稱定， 置50 m l容量瓶中， 加入氯仿40ml 超聲處理40min， 放冷， 用氯仿稀釋至刻度， 搖勻， 過濾， 取續濾液作為供試品溶液[1]。另取各何首烏飲片粉末（過80目篩）0.5g， 精密稱定，置150ml錐形瓶中， 加30ml氯仿和30ml硫酸（ 2.5 mol# L- 1 ），水浴回流水解2 h， 放冷， 水解液置分液漏斗中， 分取氯仿層于50ml容量瓶中， 水層用氯仿洗滌（5m l@3）， 洗液并入容量瓶中， 并用氯仿稀釋至刻度， 搖勻， 過濾， 取續濾液作為供試品溶液[2] 。

2.3 線性關系考察

精密吸取/2.1.10 項下的對照品溶液0.2， 0.4， 0.6， 0.8，1.0 ml置l0ml容量瓶中，置水浴上蒸干， 放冷，將殘渣用0.035 mol#L-1醋酸鎂-甲醇溶液溶解并定容， 以0.035 mol#L- 1醋酸鎂-甲醇溶液為空白，在510nm測定吸光度，以吸光度（ Y）為縱坐標，濃度（ X，Lg# ml-1）為橫坐標繪制標準曲線，得回歸方程為；Y= 0.049 9X+0.0036（ r= 0.9999 ），表明1， 8- 二羥基蒽醌在4.08～ 20. 40 Lg 范圍內線性關系良好。

2.4 精密度實驗

精密吸取/ 2. 1. 10項下的對照品溶液0.5ml 按醋酸鎂比色法測定5次， 測得吸光度的RSD為0.34%。

2.5 回收率實驗

精密稱取已知含量的樣品5份， 每份0.5g， 置50ml容量瓶中， 加入1ml對照品溶液， 再加入氯仿40ml超聲處理40m in。放冷， 氯仿定容，搖勻，過濾。精密吸取續濾液8 ml置l0ml容量瓶中，水浴蒸干，放冷，得殘渣。按醋酸鎂比色法測定， 計算1， 8一二羥基蒽醌的回收率。結果其平均回收率為98.06% + 1.98%（n=5）。

2.6 測定方法與結果

精密吸取/ 2. 1. 20項下的供試品溶液[ 1] 8ml置10ml容量