扶正抗毒膠囊長期毒性試驗

摘 要：目的：預測扶正抗毒膠囊可能引起的臨床不良反應，包括不良反應的性質、程度、劑量-反應和時間-反應關系等；推測扶正抗毒膠囊反復給藥的臨床毒性靶器官或靶組織；預測臨床試驗用藥的安全劑量范圍，提示臨床試驗中需重點監測的指標。方法：扶正抗毒膠囊大鼠連續灌胃給藥6個月，觀察藥物對大鼠體重、血液學指標、血清生物化學指標以及主要臟器指數和病理組織學的影響。結果：扶正抗毒膠囊高、中、低劑量連續灌胃給藥6個月未發現明顯毒性反應。給藥組高劑量大鼠體重增長有所減慢；少量血清生化和血液學指標與對照組比較差異有顯著性意義，提示臨床試驗時應關注患者的相關功能及實驗室指標檢查。結論：試驗結果表明扶正抗毒膠囊高、中、低劑量連續灌胃給藥6個月對大鼠無明顯毒性作用。

關鍵詞：扶正抗毒膠囊；長期毒性；試驗

中圖分類號：R965.3文獻標識碼：A

文章編號：1007-2349（2013）04-0050-02

1 試驗材料

1.1 受試藥物 扶正抗毒膠囊，具有益氣養陰，滋腎健脾、清熱解毒的作用，用于輔助治療HIV感染潛伏期，證屬氣陰兩虛，脾腎不足，邪毒內蘊所致的胸悶、氣短、疲乏無力、盜汗、自汗等。云南省中醫中藥研究所自制，批號：20071101，規格：0.5 g/粒，臨床用法用量：1次6粒，1日4次。藥物配制：取扶正抗毒膠囊內容物280 g，加蒸餾水配制成濃度為0.5 g/mL的藥液。以該濃度為高劑量給藥濃度，中、低劑量藥物分別以高劑量藥物按1：2：4稀釋即得，給藥時搖勻。

1.2 動物 SD大鼠200只，雌雄各半，體重60～80 g，由昆明醫學院實驗動物中心提供，實驗動物生產許可證號：SCXK（滇）2005-0008。

1.3 實驗環境 云南省中醫中藥研究所動物實驗屏障系統（清潔級），實驗動物使用許可證號：SYXK（滇）2005-0007。溫度：18～25℃ 濕度：40～60%，飼料：輻照鼠用滅菌飼料，由江蘇蘇州雙獅實驗動物飼料科技有限公司生產，批準文號：蘇E飼生字（2002）006。

1.4 主要儀器 ALCYON 300 全自動生化分析儀，美國雅培公司生產。MIK-6108K型全自動血球計數儀，日本Nihon Kohden產品。CL4型半自動止凝血測定儀，德國BE公司產品。BP310S 電子天平，北京賽多利斯天平有限公司生產。

2 試驗方法

2.1 實驗動物分組及給藥方法 大鼠隨機分為4組，每組50只，雌雄各半，分別為空白對照組（給予等容積的蒸餾水）、扶正抗毒膠囊高（10 g/kg體重）、中（5 g/kg體重）、低劑量組（2.5 g/kg體重）。灌胃給藥體積為20ml/kg，每天1次，每周6天，連續6個月。

2.2 觀測方法 給藥90 d后，對照組、扶正抗毒膠囊高、中、低劑量組各殺檢12只（雌、雄各6只）動物，進行各項指標檢測。剩余動物繼續給藥至180 d后每組再各殺檢20只（雌、雄各10只）動物，進行各項指標檢測。剩余大鼠停止給藥，常規飼養，觀察1個月后，全部殺檢，進行各項指標檢測，以此觀察動物毒性反應的可逆程度或可能出現的延遲性毒性反應。

2.3 觀察指標 給藥期間及停藥恢復期每日觀察大鼠一般外觀形態、行為活動、飲水進食、糞便、體重、飼料攝入量；血液學檢查17項：血漿凝血酶原時間（PT），血清生物化學檢查15項；尸體解剖和臟器指數及病理組織學檢查。

2.4 統計學處理 計量資料符合正態分布、方差齊者用t′檢驗，方差不齊者用t′ 檢驗，若計量資料不符合正態分布，則用秩和檢驗；計數資料采用χ2檢驗；等級資料用秩和檢驗。

3 試驗結果

3.1 一般狀態 大鼠連續給予扶正抗毒膠囊6個月及停藥4周，各組大鼠的一般外觀形態、行為活動、飲水進食情況未見異常。給藥6個月內，各試驗組大鼠體重穩定增長，雄性高劑量組體重增長較慢，與對照組大鼠相比較，差異有顯著性意義（P<0.01或P<0.05）。

3.2 血清生物化學檢查 扶正抗毒膠囊給藥3個月，高劑量組的TBIL、K、NA、CL、GLU，中劑量組的TBIL、K、GLU，低劑量組的K、NA、CL、GLU與對照組比較差異有顯著性意義（P<0.01或P<0.05）；給藥6個月（表1），高劑量組的TP、ALB、CK、CL、CR、TG，低劑量組的ALB、CK、CL、TG與對照組比較差異有顯著性意義（P<0.01或P<0.05）；停藥4周，高劑量組的ALT、NA、GLU，中劑量組的TP、AST、K、CL、BUN、TG，低劑量組的TP、ALT、GLU與對照組比較差異有顯著性意義（P<0.01或P<0.05）；其余指標與對照組比較差異無顯著性意義。

3.3 血液學檢查 扶正抗毒膠囊給藥3個月，高劑量組的MCV，中劑量組的MCH、MCHC PDW，低劑量組的MCH、PDW與對照組比較差異有顯著性意義（P<0.01或P<0.05）；給藥6個月（表2），高劑量組的WBC、HB、MCV、MCH、PLT、PDW，中劑量組的WBC、HB、HCT、RC、PT、INR，低劑量組的HB、HCT、PT、INR與對照組比較差異有顯著性意義（P<0.01或P<0.05）；停藥1個月，高劑量組的HB、HCT、MCHC、PLT、MO、RC、PT，中劑量組的HB、MCHC、RC，低劑量組的HB、MCV、MCHC、RC、PT、INR與對照組比較差異有顯著性意義（P<0.01或P<0.05）；其余指標與對照組比較無顯著差異。

3.4 主要臟器檢查 扶正抗毒膠囊給藥3個月，雄性高劑量組的腎上腺、肝臟、腎臟，中劑量組的肝臟、肺臟、腎臟，低劑量組的肺臟臟器系數與對照組比較差異有顯著性意義，雌性高劑量組的肝臟，中劑量組的心臟，低劑量組的胸腺、肝臟臟器系數與對照組比較差異有顯著性意義（P<0.01或P<0.05）。給藥6個月，雄性高劑量組的睪丸、肝臟、脾臟、腎臟，中劑量組的脾臟，低劑量組的肝臟臟器系數與對照組比較差異有顯著性意義，雌性高劑量組的心臟、肝臟、脾臟、腎臟、腦，中劑量組的肝臟，低劑量組的心臟、腎臟臟器系數與對照組比較差異有顯著性意義（P<0.01或P<0.05）。停藥1個月，雄性高劑量組的肝臟、脾臟、腎臟，中劑量組的肝臟，低劑量組的肝臟、腎臟臟器系數與對照組比較差異有顯著性意義，雌性高劑量組的胸腺、腦，中劑量組的肝臟，低劑量的胸腺臟器系數與對照組比較差異有顯著性意義（P<0.01或P<0.05）。

4 討論與結論

根據扶正抗毒膠囊的臨床擬用量、療程，確定高劑量為10 g/kg（體重），為人臨床擬用劑量的58.3倍；中劑量為5 g/kg（體重），為人臨床擬用劑量的29.2倍；低劑量為2.5 g/kg（體重），為人臨床擬用劑量的14.6倍。扶正抗毒膠囊連續灌胃給藥3個月、6個月給藥組高劑量動物體重增長略緩；給藥3個月、給藥6個月、停藥一個月后這3個時期，給藥組的少量血液學、血清生化指標與對照組比較差異有顯著性意義。分析原因，雖然給藥組的少量血液學、血清生化指標與對照組比較差異有顯著性意義，但病理組織學檢查并未見相關臟器病理改變，未為確保用藥安全，在臨床試驗時應關注受試者的相關功能及實驗室指標檢查。

綜上所述，扶正抗毒膠囊在所用劑量和6個月用藥時間內灌胃給藥，對大鼠無明顯毒性作用。

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