李 秀,李 蕾,孫艷玲,陳莉霞
(新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科,新疆 烏魯木齊830001)
我國(guó)是乙型肝炎高發(fā)區(qū),大多數(shù)臨床實(shí)驗(yàn)室采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)法定性檢測(cè)兩對(duì)半。近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的化學(xué)發(fā)光微粒子免疫分析法是定量檢測(cè)乙肝DNA靈敏度非常高的方法,再加上核酸表達(dá)水平檢測(cè),可以定性定量掌握乙肝疾病進(jìn)展程度及臨床療效判斷。本文意在比較分析幾種方法的檢測(cè)結(jié)果及其相關(guān)性規(guī)律。
1.1 標(biāo)本 我院2011年1月-2012年3月門診、住院乙肝陽(yáng)性病人血清。
1.2 試劑儀器
1.2.1 上海榮盛、廈門英科新創(chuàng)乙肝檢測(cè)試劑盒及西門子BEP//酶聯(lián)免疫分析系統(tǒng);羅氏乙肝定量診斷試劑盒及羅氏COBASE601化學(xué)發(fā)光分析儀;ABI7300全自動(dòng)熒光實(shí)時(shí)定量PCR儀。
1.3 資料統(tǒng)計(jì) 資料由LLS數(shù)據(jù)庫(kù)整理后,采用EXCEL軟件包做統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。
如表1所示:小三陽(yáng)85例病人,化學(xué)發(fā)光微粒子定量 HBsAg、HBcAb陽(yáng)性率達(dá)100%;HBeAg、HbeAb定量檢測(cè)陰性率達(dá)100%。60例HBsAg+、HbeAb+、HbcAb+病人中,53例(88.3%)乙肝DNA≤103,7例(11.7%)乙肝DNA≥103。大三陽(yáng)HBsAg+、HBeAg+、HbcAb+化學(xué)發(fā)光微粒子HBsAg、HBeAg、HBcAb定量檢測(cè)陽(yáng)性達(dá)100%,乙肝DNA≥103—≤108間,其中12例 HBeAb定量檢測(cè)陽(yáng)性,占34.3%。大三陽(yáng)HBsAg+、HBeAg+20例病人,化學(xué)發(fā)光微粒子定量檢測(cè)HBsAg、HBeAg陽(yáng)性率達(dá)100%,18例(90%)乙肝DNA≥103—≤108,10%病人ELISA法 HBeAg定性弱陽(yáng)性或極弱陽(yáng)性,HBeAg化學(xué)發(fā)光定量檢測(cè)為陽(yáng)性且數(shù)值偏低,此時(shí)DNA≤103。
如圖1示HBeAg定量檢測(cè)與DNA水平關(guān)系分布,在DNA≥103以上水平,則 HBeAg定量與DNA水平呈正相關(guān)。如果DNA≤103以下,則HBeAg定量有陰性也有陽(yáng)性。

表1 幾種方法乙肝檢測(cè)結(jié)果

圖1 HBVDNA水平與HBeAg定量關(guān)系分布
HBsAg+、HBeAb+、HBcAb+或 HBsAg+、HBcAb+陽(yáng)性患者HBsAg定量結(jié)果陽(yáng)性且數(shù)值高低不等,通常DNA水平≤103,說(shuō)明HbsAg無(wú)論定性、定量檢測(cè),與HBV DNA水平存在正相關(guān),為臨床診斷、觀察療效及耐藥性變異提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)[1]。
HBsAg+、HBeAb+、HBcAb+患者,也有少數(shù)病人HBVDNA水平≥103。HBV患者基因型分為C型和B型。B型抗HBeAg陽(yáng)性率高于C型,提示HBV B型患者在感染持續(xù)時(shí)間短,血清轉(zhuǎn)換發(fā)生快,免疫清除較C型早的情況下,仍有HBV DNA水平的較高表達(dá)[2]。
HBsAg+、HBeAg+、HBcAb+或 HBsAg+、HBeAg+HBV患者,HBsAg、HBeAg定量陽(yáng)性且數(shù)值高低不等。另前者HBcAb陽(yáng)性率達(dá)100%,34.3%的病人HbeAb定量陽(yáng)性,可能是HBeAg濃度高且向HbeAb的轉(zhuǎn)化過(guò)程中,通常DNA水平≥103-≤108,HBV DNA水平愈高,HBeAg定量數(shù)值愈高,存在正相關(guān)性;圖1分布圖可見(jiàn)。HBV患者HBeAg陽(yáng)性率C基因型顯著高于B型,C型引起肝臟病變較重于B型基因型的原因可能C型基因更容易發(fā)生T1762變異及基本核心啟動(dòng)子(BCP)變異,更易導(dǎo)致肝臟病變加重且向慢性過(guò)程轉(zhuǎn)化[2]。
另外,從表1及圖1可見(jiàn),HBsAg+、HBeAg+患者,尤其是HBeAg定性、定量弱陽(yáng)性和極弱陽(yáng)性時(shí)(10%病人),DNA表達(dá)水平都低于下限值,可能是HBV攜帶者因前核心和核心啟動(dòng)子區(qū)域的變異可能存在HBeAg負(fù)性波動(dòng)。此時(shí)較難確定HBeAg和DNA水平相關(guān)性[3]。
[1]阮福明,許立新,周鎮(zhèn)先,等.定量檢測(cè)HBsAg水平在評(píng)價(jià)拉米夫定治療慢性乙型肝炎療效中的應(yīng)用[J].臨床檢驗(yàn)雜志,2011,29(9):693.
[2]李彩東,吳斌,田鵬飛,等.某地區(qū)慢性乙型肝炎患者乙肝病毒基因型與臨床的相關(guān)性研究[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2012,33(2):178.
[3]毛雄英,王衛(wèi)華,濃廣亭,等.引物延伸/變性高效液相色譜檢測(cè)HBV拉米夫定耐藥突變[J].臨床檢驗(yàn)雜志.2010,28(3):11.