嬰幼兒喘息治療前后炎性因子與細胞因子水平變化及意義

高素華 應延風 宋春函 應佩蓓 胡國華 王有成

嬰幼兒喘息是一種呼吸道變態反應性疾病，其病理學特征之一是嗜酸粒細胞(EOS)增多，且主要是活化的［1］。血清嗜酸細胞陽離子蛋白(ECP)是EOS活化后脫顆粒釋放的一種炎癥介質，在形成氣道炎癥的過程中起主要作用，也是反映氣道炎癥活動的重要指標物，又Thl/Th2細胞間的失衡是哮喘發病的關鍵機制［2］。測定血清ECP、EOS及Thl/Th2相關的IL-6和IFN-γ水平可反應氣道炎癥的嚴重程度及臨床病情，以便指導哮喘的抗炎治療。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選自2010年9月～2012年9月浙江省金華市人民醫院呼吸門診或住院的喘息嬰幼兒60例，符合我國兒童哮喘的診斷標準［3］，隨機分為喘息急性發作期組30例，其中男性16例，女性14例，平均年齡(16.4±9.1)個月，平均病程(12.1±8.8)h;喘息緩解期組30例，其中男性18例，女性12例，平均年齡(17.1±8.8)個月;平均病程(3.2±1.0)周;另設健康查體者30人，男性17人，女性13人，平均年齡(16.8±9.8)個月，排除過敏性疾病和其他與變態反應有關的慢性疾病、并除外神經、內分泌系統疾病。

1.2 實驗方法

1.2.1 細胞因子測定 采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測 IL-6、IFN-γ，采靜脈血5 ml，在20 ～25℃室溫下凝血60 min，以3000 r/min離心 l0 min，分離血清，-20℃保存，待測定。試劑盒購自深圳晶美生物有限公司，嚴格按試劑盒內說明書操作。

1.2.2 炎性因子測定 采用Sysmex XE-2100全自動血細胞分析儀。瑞典Pharmacia公司的UniCAPl000熒光酶免疫分析儀及ECP測定試劑盒(法碼西亞公司)，抽取靜脈血(同上)，且嚴格按檢測要求操作。入院第2天清晨空腹抽取乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝靜脈血2～3 ml伊紅染色，顯微鏡下檢測EOS計數。

1.3 觀察指標 用藥前和緩解期(治療后2周病情好轉)分別測定外周血嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)、白細胞介素-6(IL-6)、干擾素γ(IFN-γ)及血清嗜酸性粒細胞(EOS)。

1.4 統計學方法 采用SPSS17.0統計軟件進行統計處理，本組實驗數據以(±s)表示，組間差異采用t檢驗，P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

喘息發作期組 ECP、EOS與 IL-6明顯高于健康組及緩解期組(P＜0.01)。即使緩解期，上述3項指標仍不能達到健康組水平(P＜0.01);IFN-γ喘息發作期組明顯低于健康組及緩解期組(P＜0.01)，即使緩解期有明顯上升，仍達不到健康組水平(P＜0.01)，見表1。

表1 喘息嬰幼兒炎性因子與細胞因子測定結果(±s)

表1 喘息嬰幼兒炎性因子與細胞因子測定結果(±s)

注:與健康組比aP＜0.01，與緩解期組比bP＜0.01

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3 討論

近年來有關研究表明，哮喘發病的關鍵機制［4］是Thl/Th2細胞間的失衡，如代表Thl型細胞因子的IFN-γ減少，Th2分泌的前變應細胞因子IL-4、IL-5、IL-6、IL-13等的增多。Yokoyama等［5］認為哮喘發作期及無癥狀的IL-6均高于正常人，支氣管上皮細胞IL-6基因表達在癥狀性哮喘患者中可見增強。其培養上清液中的水平也明顯增高［6］。又有證明IL-6主要由氣道非纖毛上皮細胞和單核細胞產生，其水平在非過敏性哮喘患者支氣管肺泡灌洗液中明顯高于正常組，故認為在哮喘炎癥反應中IL-6起著至關重要的作用［7］。研究結果表明哮喘發作期IL-6含量顯著增高，INF-γ明顯降低，差異有統計學意義。表明患者Th2細胞處于活化狀態，而Thl細胞活性較低。即存在Thl細胞表達抑制及Th2細胞過度表達［8］。隨著炎癥程度減輕達緩解期時IL-6降低，IFN-γ增高，但仍達不到健康組水平。

喘息患兒下氣道的主要炎癥細胞是EOS，其病理組織學改變是氣道黏膜活化的EOS顯著增多，并與氣道高反應(AHR)的嚴重程度和氣道上皮細胞損傷脫落密切相關。ECP是EOS活化標志，EOS活化后釋放的強堿性顆粒蛋白主要有ECP，在氣道炎癥過程中，ECP能誘導肥大細胞釋放組胺，它具有極強的細胞毒性作用，從而損傷氣道上皮和角質細胞，ECP能反映哮喘患者氣道炎癥的發生、發展等的變化及提示氣道炎癥的嚴重程度［9-11］。

本文研究結果顯示:喘息發作期組 ECP、EOS與 IL-6明顯高于健康組及緩解期組(P＜0.01)。即使緩解期上述3項指標明顯下降，但仍不能達到健康組水平(P＜0.01);IFN-γ喘息發作期組明顯低于健康組及緩解期組(P＜0.01)，而緩解期組即使有明顯上升，仍達不到健康組水平(P＜0.01)。提示ECP、EOS、IL-6、IFN-γ能夠敏感、準確地反映喘息患兒的氣道炎癥變化。因此，測定血細胞與炎性因子(EOS、ECP、IL-6、IFN-γ)不但可提示喘息患兒氣道損害與炎癥的嚴重程度，還可反應臨床病情的嚴重程度。對診斷、療效和預后判斷等有較大的臨床實用價值。

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［4］李文益，陳述枚.兒科學新理論和新技術.北京:人民衛生出版社，2002:446-455

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［6］Mavini M，Vitrou E，Hollembong J，et al.Expression of the Potent intlammatory cytomnes，anuloeyte-maerophagecolony stimulating factor and inlerleukin-6 and inledeukin-8 in bronchial epithelial cells of patientswithasthma.J Allergy Clin Immunol，1992，89(6):1001-1009.

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