胚胎肝干細(xì)胞治療失代償期肝硬化臨床療效觀察

陸長(zhǎng)春，藺詠梅，韓 潔，丁敏俠 (.陜西省漢中市漢中30醫(yī)院感染性疾病科，陜西 漢中 73000;.陜西省漢中市漢中30醫(yī)院功能科，陜西 漢中 73000)

胚胎干細(xì)胞來源于早期胚胎，具有多向分化潛能，可以在體內(nèi)或體外分化為多種組織細(xì)胞［1］。已有試驗(yàn)證實(shí)人胚胎干細(xì)胞經(jīng)過分階段培養(yǎng)，最終可以分化為具備肝細(xì)胞功能的細(xì)胞。故肝干細(xì)胞為終末期肝病的治療提供了一種全新的治療手段［2］。我科自2011年開始運(yùn)用保守治療聯(lián)合胚胎肝干細(xì)胞經(jīng)脾動(dòng)脈、肝動(dòng)脈介入移植術(shù)的方法，對(duì)22例失代償期肝硬化患者進(jìn)行治療觀察，有效地緩解了患者的臨床癥狀，改善了預(yù)后。取得較好臨床療效，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料:病例來源于2011年10月～2013年5月我院的住院患者，共48例。采用隨機(jī)、平行對(duì)照臨床實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案，分為對(duì)照組26例和治療組22例。對(duì)照組中男18例，女8例，年齡24～69歲，平均(48±12.1)歲。治療組中男15例，女7例，年齡23～70歲，平均(46±11.5)歲;對(duì)兩組患者的一般臨床資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，兩組患者性別、年齡、發(fā)病原因、病輕重程度等方面差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 病例納入標(biāo)準(zhǔn):失代償期肝硬化診斷依據(jù)參照中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝臟病學(xué)分會(huì)脂肪肝和乙醇性肝病學(xué)組推薦的診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.3 方法:兩組均給予保肝、降門脈壓、抗纖維化、維持水電解質(zhì)平衡、抗感染等對(duì)癥處理，少數(shù)病例根據(jù)病情、病毒定量采用抗病毒治療，并依據(jù)腹水量予行利尿、腹水超濾濃縮回輸?shù)戎委煛Ｓ盟巹┝俊⑼緩郊隘煶叹嗤Ｖ委熃M在此基礎(chǔ)上加用胚胎肝干細(xì)胞注射液(吉林拓華生物有限公司)，細(xì)胞數(shù)量1.0×108，4例聯(lián)合多能干細(xì)胞，細(xì)胞數(shù)量0.5×108/L，細(xì)胞活率均＞98%。經(jīng)由介入方式移植(1/3量)入脾臟(2/3量)及肝臟，1次/4周，共計(jì)3次，療程均為24周。

1.4 觀察指標(biāo):①癥狀和體征:包括乏力、消化道癥狀，肝區(qū)疼痛、黃疸、肝脾腫大及治療前后變化;②肝功能:膽紅素(SB)、ALT、AST、GGT、ALP、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB);③Child－Pugh觀測(cè)指標(biāo):膽紅素、白蛋白、腹水、肝性腦病及凝血酶原時(shí)間。治療期間注意觀察并記錄患者有無不良反應(yīng)。

1.5 療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn):①顯效:療程結(jié)束臨床癥狀完全消失或明顯改善，肝脾腫大回縮，腹水完全消失，PT延長(zhǎng)＜3 s，TB、ALT、AST、GGT降至正常范圍，A/G正常或基本正常，Child－Pugh評(píng)分分值下降＞3分;②有效:臨床癥狀好轉(zhuǎn)，肝脾腫大無明顯變化，腹水大部分消失，PT延長(zhǎng)＜6 s，肝功能指標(biāo)較治療前下降達(dá)＞30%，并低丁正常上限值2倍以下，Child－Pugh評(píng)分分值下降＜3分;③無效:癥狀體征無改善、PT延長(zhǎng)＞6 s，肝功能指標(biāo)改善不明顯或病情加重，Child－Pugh評(píng)分分值無下降或增加。顯效率+有效率=總有效率。

2 結(jié)果

2.1 兩組療效比較:療程結(jié)束時(shí)，兩組資料均完整。兩組療效比較，治療組明顯優(yōu)于對(duì)照組(P＜0.05)。治療組總有效率為86.4%，對(duì)照組為73%，兩組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。但治療組顯效率13.6%，明顯高于對(duì)照組的0%(P＜0.01)，結(jié)果見表1。兩組治療后Child－Pugh積分均較治療前明顯下降(P＜0.01)，治療組下降幅度明顯優(yōu)于對(duì)照組(P＜0.05)。

表1 兩組臨床有效率比較［例(%)］

2.2 兩組病例治療前后肝功能改變:治療前與治療后24周肝功能有顯著變化，兩組 ALT、AST、ALB、TB、ALP、GGT 復(fù)常率基本相似，詳見表2。

表2 治療組和對(duì)照組肝功能及Child－Pugh評(píng)分分析結(jié)果()

表2 治療組和對(duì)照組肝功能及Child－Pugh評(píng)分分析結(jié)果()

注:t1、P1表示治療組與對(duì)照組治療后比較t值、P值

組別 治療前后評(píng)分對(duì)照組(n=26) 治療前 97.5 ±78.1100.1 ±98.2.110.2 ±78 68.4 ±10.1 24肝功能指標(biāo)TB(μmol/L )ALT(IU/L )AST(IU/L) TP(g/L) Alb(g/L ) ALP(IU/L)GGT(IU/L) CTP±7.1 101 ±80.6.100.1 ±78.1. 8.3 ±4.7治療后 36.2 ±14.2 52 ±25.7 42.5 ±28.7 72.6 ±4.3 28 ±4.5 81 ±47.3 71.5 ±55.3 6.2 ±2.5治療組(n=22) 治療前 96.2 ±81.2 110.3 ±88.9 121 ±81.1 67.5 ±8.8 23.1 ±7.5 108 ±78.4 102 ±52.1 8.5 ±3.1治療后 21 ±13.4 31 ±13.3 41.9 ±22.4 70.3 ±11.9 28 ±7.2 78 ±42.3 61 ±53.2 5.6 ±2.3 t1 值 3.12 3.12 2.54 2.56 3.21 2.5 2.51 3.18 p1值0.01 0.01 0.05 0.05 0.01 0.08 0.08 0.01

2.3 臨床癥狀:治療24周后患者臨床癥狀有一定改善，應(yīng)用生活質(zhì)量的評(píng)估(應(yīng)用SF36的評(píng)分方式)，治療組生活質(zhì)量明顯改善(P＜0.01)。

2.4 安全性檢測(cè):治療組患者接受胚胎肝干細(xì)胞治療期間1例出現(xiàn)股動(dòng)脈介入穿刺處局部血腫，1例出現(xiàn)移植后發(fā)熱，皮疹，經(jīng)積極處理后癥狀均緩解。治療前、后檢測(cè)患者血常規(guī)、心電圖、AFP定量、肝腎功能、上腹部CT等指標(biāo)均未發(fā)現(xiàn)與治療有關(guān)的異常改變。

3 討論

干細(xì)胞研究近年來已成為生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)之一，肝干細(xì)胞是一種具有雙向分化(向肝細(xì)胞和膽管細(xì)胞)和自我更新能力的細(xì)胞，不僅參與肝臟損傷的修復(fù)與重建，而且不斷分化為具有功能的成熟肝細(xì)胞，為肝細(xì)胞移植和生物型人工肝提供了重要的細(xì)胞來源［3］。目前利用肝移植及肝干細(xì)胞移植治療各種終末期肝病被認(rèn)為是最有效的方法。而肝細(xì)胞移植可以作為原位肝移的有效替代治療方法來治療各種終末期肝病，有資料顯示已獲得得了一定的臨床療效。然而囿于肝干細(xì)胞獲得效率低下、肝干細(xì)胞潛在的癌變風(fēng)險(xiǎn)以及亟待解決的問題如:移植時(shí)機(jī)、移植數(shù)量、移植后肝內(nèi)定位跟蹤、移植費(fèi)用等諸多問題［4］，目前肝干細(xì)胞移植治療終末期肝病臨床應(yīng)用較少。筆者嘗試運(yùn)用胚胎肝干細(xì)胞介入移植至肝臟治療失代償期肝硬化患者，旨在評(píng)估胚胎肝干細(xì)胞移植治療的臨床療效及其安全性，希冀從中獲得有益的啟示。

治療結(jié)果顯示:采用胚胎肝干細(xì)胞治療組總體療效優(yōu)于對(duì)照組。其中顯效率病例3例(13.6%)，明顯大于對(duì)照組0例(0%);兩組總療效比較，治療組總有效率86.4%，明顯高于對(duì)照組的73%(P＜0.01);兩組治療后Child－Pugh積分均較治療前明顯下降(P＜0.01)，治療組下降幅度明顯優(yōu)于對(duì)照組(P＜0.05)。在安全性方面:治療組在胚胎肝干細(xì)胞移植術(shù)后180 d，跟蹤AFP定量、肝臟影像學(xué)均未發(fā)現(xiàn)明顯癌變跡象。并且無明顯嚴(yán)重不良反應(yīng)，均能耐受。故綜合考慮胚胎肝干細(xì)胞移植在治療失代償期肝硬化方面，已顯示短期臨床療效好，安全性可控。但因時(shí)間問題遠(yuǎn)期療效及其安全性尚不得而知。總之，胚胎肝干細(xì)胞移植治療失代償期肝硬化不失為一個(gè)全新的治療方法，相信隨著對(duì)肝干細(xì)胞研究的進(jìn)一步深入，治療各種終末期肝病所面臨的諸多問題將得到有效解決。

［1］高 強(qiáng).肝干細(xì)胞的研究進(jìn)展［J］.實(shí)用肝臟病雜志，2008，11(2):124.

［2］鄭進(jìn)芳，吳昌雄，等.胚胎肝細(xì)胞移植治療小鼠肝纖維化［J］.中華試驗(yàn)外科雜志，2008，25(3):237.

［3］吳 燕.肝干細(xì)胞分析研究進(jìn)展［J］.微生物免疫學(xué)進(jìn)展，2010，8(2):82.

［4］錢 波，蔡寒青，馮 潔.干細(xì)胞、腫瘤干細(xì)胞與腫瘤發(fā)生［J］.世界華人消化雜志，2007，15(13):1526.