黃芪注射液對急性白血病自體外周血造血干細胞采集效果的影響

王茂生 王 紅 楊 陽 段連鳳

(河北省廊坊市中醫醫院血液科五病區，河北 廊坊 065000)

急性白血病是造血系統惡性增殖性疾病，傳統化療盡管由于新的化療藥物不斷研制，新的化療方案不斷涌現，支持療法的加強，生物反應調節劑的臨床應用，治療效果有所提高，但仍有80%左右的成人急性白血病患者復發，難以獲得長期無病生存。雖然同種異基因造血干細胞移植使部分急性白血病患者獲得長期生存，但價格昂貴，供髓來源不足，限制了臨床上的廣泛應用。自體外周血造血干細胞因不受供者來源的限制，是目前應用最為廣泛的移植類型，但部分患者因多療程化療導致正常造血干細胞損傷，造血干細胞采集數量難以滿足臨床需要。2008-01—2011-12，我們在外周血造血干細胞動員方案基礎上應用黃芪注射液，采集11例急性白血病患者自體外周血造血干細胞以進行自體造血干細胞移植，并與外周血造血干細胞動員方案采集10例急性白血病患者自體外周血造血干細胞以進行自體造血干細胞移植對照，觀察黃芪注射液對急性白血病患者自體外周血造血干細胞采集效果的影響，結果如下。

1 資料與方法

1.1 診斷標準 參照《血液病診斷及療效標準》[1]中急性白血病的診斷標準。

1.2 一般資料 全部21例均為河北省廊坊市中醫醫院血液科住院患者，隨機分為2組。治療組11例，男6例，女5例；年齡14～48歲，平均(29.91±11.06)歲；病程6～13個月，平均(7.64±2.58)個月；分型：急性粒細胞白血病未分化型(AML-M1型)1例，急性粒細胞白血病部分分化型(AML-M2a)3例，急性粒單核細胞白血病(AML-M4型)2例，急性單核細胞白血病(AML-M5型)3例，急性淋巴細胞白血病(ALL型)2例；首次完全緩解5例，第2次完全緩解6例；造血干細胞動員前行化療4～9個療程，平均(6.00±1.73)個療程。對照組10例，男5例，女5例；年齡16～46歲，平均(30.64±11.76)歲；病程4～12個月，平均(8.09±2.63)個月；分型：AML-M2a型2例，AML-M4型3例，AML-M5型3例，ALL型2例；首次完全緩解4例，第2次完全緩解6例；造血干細胞動員前行化療4～8個療程，平均(5.91±1.30)個療程。2組一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.3 治療方法

1.3.1 對照組 予外周血造血干細胞動員方案[2]。注射用鹽酸阿糖胞苷(浙江海正藥業股份有限公司，國藥準字H20054695)1.5 g/m2，每12 h 1次，連續6次；鹽酸昂丹司瓊注射液(成都利爾藥業有限公司，國藥準字H20046058)4～8 mg/d，靜脈推注止吐，并水化堿化；重組人粒細胞集落刺激因子注射液(華北制藥金坦生物技術股份有限公司，國藥準字S19991017)300 μg/d，皮下注射，從白細胞計數(WBC)下降至最低點開始應用至采集結束。

1.3.2 治療組 在對照組方案基礎上聯合黃芪注射液(杭州正大青春寶制藥有限公司，國藥準字Z33020179)60～80 mL，加入0.9%氯化鈉注射液200 mL中，每日1次靜脈滴注，從化療結束開始應用至采集結束。

1.4 外周血造血干細胞采集 采集時機：重組人粒細胞集落刺激因子注射液靜脈滴注后外周血WBC>(4.0～5.0)×109/L，單核細胞比例>10%～30%或外周血CD34+細胞≥1%。采集目標：單個核細胞數>2×108/kg(患者體質量)，CD34+細胞數>1×106/kg(患者體質量)，每例患者預計各采集2次，如未達上述標準則加采骨髓干細胞。采集過程：采用Baxter公司生產的CS-3000 Plus血細胞分離機采集外周血造血干細胞，每日1次，共采集2次。枸櫞酸鈉抗凝劑(四川南格爾生物醫學股份有限公司，國藥準字H20058913)抗凝，每次循環血量10 L。采集后予二甲基亞砜為主要成分防凍液混合后于-196 ℃液氮冷凍保存。

1.5 檢測指標 取混勻后的采集物少量懸液人工計數單個核細胞數、流式細胞儀按操作規程計數CD34+細胞數，并計算每次產物單個核細胞數和CD34+細胞的采集總量。

2 結 果

2.1 2組造血干細胞采集效果比較 見表1。

表1 2組造血干細胞采集效果比較 ±s

與對照組比較，*P<0.05，**P<0.01

由表1可見，2組均成功采集到目標值所需單個核細胞數及CD34+細胞數，治療組采集所獲得的單個核細胞數及CD34+細胞數均較對照組多(P<0.05，P<0.01)。

2.2 2組造血干細胞采集達到目標值所需采集次數比較 見表2。

表2 2組造血干細胞采集達到目標值所需采集次數比較 例(%)

與對照組比較，*P<0.05

由表2可見，2組造血干細胞采集達到目標值所需采集次數比較差異有統計學意義(P<0.05)，治療組優于對照組。

2.3 2組不良反應比較 2組患者在動員采集過程中均不同程度出現重組人粒細胞集落刺激因子注射液所致骨骼疼痛、鼻塞、流涕、頭痛等流感樣癥狀，均在可耐受范圍。

3 討 論

白血病是造血干/祖細胞因分化阻滯、凋亡障礙和惡性增殖而引起的一組異質性的造血系統惡性腫瘤，目前國內外治療白血病仍以化療為主，成人急性髓細胞白血病完全緩解率50%～80%，部分患者很難達到完全緩解，或完全緩解后復發，稱為難治性白血病[3]。自體外周血造血干細胞移植的臨床應用，可使部分難治性白血病患者獲得長期生存，并可緩解異基因造血干細胞移植供髓來源不足、毒副作用明顯、嚴重的移植并發癥等限制。能否采集到足夠的外周血造血干細胞是移植成功的前提和關鍵，但自體外周血造血干細胞的采集受多種因素影響，特別是多次化療后造血干細胞自身增殖能力受損，導致自體外周血造血干細胞難以采集到造血重建所需的數量。

干細胞動員階段目的是動員骨髓中的造血干細胞快速釋放至外周血以利于采集。我們以中醫學益氣生血理論為指導，在外周血造血干細胞動員方案基礎上應用黃芪注射液進行外周血造血干細胞動員、采集。黃芪性味甘溫，生用益氣固表，利水消腫，托毒生肌，炙用補氣升陽，能治內傷勞倦、氣虛血脫及一切氣衰血虛之證，兼具“虛則補之”、“勞者溫之”、“損者益之”、“形不足者，溫之以氣”之功。

現代藥理研究表明，黃芪含有黃芪皂甙、黃酮、多種氨基酸、微量元素等，臨床應用廣泛，具有較好的促進骨髓造血干細胞增殖和動員作用[4-5]，有較好的增強機體免疫功能的作用[6-7]。黃芪注射液20 mg/kg連續注射3 d，能顯著提高小鼠粒細胞-單核細胞集落形成單位(CFU-GM)生成[8]。李美芬[9]發現，黃芪可增強正常小鼠骨髓粒系造血，并能促進受60Co輻照損傷的小鼠骨髓粒系造血功能的恢復。黃芪注射液在造血干細胞移植后造血重建的后期具有促造血作用，與重組人粒細胞集落刺激因子、白細胞介素-11(IL-11)聯用促進移植后造血重建療效明顯[10]。

我們在干細胞動員階段應用注射用鹽酸阿糖胞苷化療后重組人粒細胞集落刺激因子注射液動員方案聯合黃芪注射液共同促進造血干細胞的釋放，患者單個核細胞數及CD34+細胞數明顯優于單純應用外周血造血干細胞動員方案，7例患者僅需采集1次即可達到采集目標值，很大程度上減輕了患者的痛苦及治療費用。但由于觀察例數較少，尚需進一步擴大例數及多中心協作觀察。

[1] 張之南，沈悌.血液病診斷及療效標準[M].2版.北京：科學出版社，2007：166-218.

[2] 陳運賢，孟凡義，鐘雪云.現代造血干細胞移植[M].廣州：廣東科學技術出版社，2004：49-53.

[3] 卞壽庚.白血病[M].北京：中國醫藥科技出版社，2003：326.

[4] 翁玲，劉學英，劉彥，等.黃芪多糖對小鼠骨髓及外周血造血干細胞的增殖及動員作用[J].基礎醫學與臨床，2003，23(3)：306-309.

[5] 鄒丹，申虹，全宏勛，等.黃芪對輻照小鼠粒-單系造血祖細胞的影響[J].河南醫科大學學報，2001，36(3)：277-278.

[6] 董群，魯義東，吳敏毓.芪附湯及其組方對陽虛小鼠免疫功能的影響[J].中國實驗方劑學雜志，1999，5(3)：15-17.

[7] Dong TT，Ma XQ，Clarke C，et al.Phylogeny of Astragalus in China：molecular evidence from the DNA sequences of 5S rRNA spacer，ITS，and 18S rRNA[J].J Agric Food Chem，2003，51(23)：6709-6714.

[8] 洪介民，邱健行，胡祖光，等.黃芪多糖對小鼠粒巨噬系祖細胞的影響[J].中國實驗臨床免疫學雜志，1997，9(6)：53-55.

[9] 李美芬.黃芪促進小鼠粒系造血[J].湖南醫科大學學報，1991，16(2)：135-137.

[10] 周凌，郝云良，孫道萍，等.黃芪注射液促進造血干細胞移植后造血重建的臨床研究[J].山東中醫藥大學學報，2010，34(1)：52-53，55.