908例急性下呼吸道感染住院兒童病毒病原學研究

殷熾龍，李海風，何苑棉（廣西梧州市紅十字會醫院兒科，廣西 梧州 543002）

下呼吸道感染（LRTI）是指氣管、支氣管、細支氣管和肺組織（包括肺泡和肺間質）等部位的炎性反應，是兒科常見病、多發病[1]。急性下呼吸道感染（Acute lower respiratory tract infection，ALRTI）占我國住院患兒的24.5%～65.2%，兒科門診的39.0%～65.5%，其中病毒是主要病原，最常見的病毒有呼吸道合胞病毒（Respiratory syncytin virus，RSV）、腺病毒（Adenovirus，ADV）、流感病毒（In fl uenza virus，IV）、副流感病毒（Parainfluenza，PIV）等[2]。桂東地區ALRTI住院兒童呼吸道病毒的流行特點怎樣，目前尚缺乏相關研究，因此，此研究收集2011年1月～2011年12月ALRTI住院患兒的血液標本908份，用XK2100生物芯片進行檢測篩查4種常見呼吸道病毒的特異性抗體（IgM），包括呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）、流感病毒（IV）及副流感病毒（PIV），對檢測標本陽性的病例進行統計分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料：以2011年1月～2011年12月因患ALRTI在我院住院的患兒為研究對象。臨床疾病診斷標準均依據諸福棠《實用兒科學》第七版[3]。患兒年齡為出生后1 d～14歲，共分為6組，（0月～）組373例，（1歲～）組160例，（2歲～）組131例，（3歲～）組63例，（4歲～）組50例，≥5歲組131例。季節：春季（3～5月）280例，夏季（6～8月）260例，秋季（9～11月）205例，冬季（12～2月）163例。符合入選標準患兒的血液樣本908份，男614例，女294例。

1.2 方法

1.2.1 標本收集及處理：入選患兒均在入院后留取血液標本，送中心實驗室。取待測血清100μl，加稀釋液200μl，稀釋均勻；在送樣模塊窗口內加洗滌液4滴（約200μl），均勻濕潤；滲濾時間90～120 s。處理好的待測血清200μl，迅速加于窗口膜面上，待其滲入后，加洗滌液6滴（分兩次加入，3滴/次）。血清滲濾時間90～160 s。待洗滌液滲入后，將顯色劑6滴（約300μl）一次加入窗口膜面內（酶結合物則只加4滴），待顯色劑（酶結合物）滲入后，加洗滌劑6滴（分兩次加入，3滴/次）。待洗滌劑滲入后，加入300μl混合好的底物。

1.2.2 送樣模塊：在15～30 min內送入XK2100生物芯片閱讀儀自動檢測及結果判定。

1.3 統計學分析：采用SPSS 17.0進行統計分析，數據以率（%）表示，組間陽性率比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 患兒血液呼吸道病毒的特異性抗體（IgM）檢出情況：908份血液標本中，235份檢出了病毒的抗體（IgM）陽性，總檢出率為25.88%，其中ADV最常見，其次是IV和RSV、PIV，見表1。

表1 患兒血液病毒IgM檢出情況

2.2 病毒檢出的性別分布：614例男性患兒中，病毒IgM檢出陽性162例（26.4%）；女性294例中，病毒IgM陽性73例（24.8%），男女陽性檢出率比較，差異無統計學意義（χ2=0.250，P=0.617）。不同病毒陽性檢出結果的性別分布及比較見表2。

2.3 病毒檢出的年齡分布：不同年齡組中病毒的檢出率不同，以4～5歲年齡組檢出率最高，見表3。不同年齡組之間的病毒總檢出率差異有統計學意義（χ2=92.549，P＜0.001）。其中不同年齡組各種病毒病原的檢出率見表4。

表2 不同病毒IgM陽性檢出結果的性別分布及比較[例（%）]

表3 病毒IgM檢出的年齡分布

表4 不同年齡組各病毒IgM的檢出率[例（%）]

2.4 病毒檢出的季節分布：病毒每個月均有檢出，全年中病毒總檢出率四季分布差異有統計學意義（χ2=101.011，P＜0.01），以夏季檢出率最高。不同病毒的四季分布亦有明顯的不同，其中RSV的陽性檢出高峰主要集中在春季和夏季；ADV在夏季檢出率最高；而IV在秋季檢出率最高，PIV沒有明顯的季節變化。見表5及圖1。

表5 不同季節各種病毒IgM的陽性率[例（%）]

圖1 下呼吸道感染患兒常見病毒-IgM陽性檢出率的月份分布

3 討論

目前大多數研究采用對患者鼻咽抽吸物進行呼吸道常見病毒的PCR法檢測，此方法檢測結果假陽性率較高，未患病者亦可檢測出多種呼吸道病毒。而較多ALRTI患者，雖然檢測出某呼吸道病毒陽性，但這病毒可能并不是導致患者此次患ALRTI的致病病原體。病毒感染后最初的免疫反應，主要是針對病毒的特異性IgM首先產生，特異性IgM產生的較早，消失的快，所以能代表現癥感染，檢測病毒的特異性IgM假陽性率低[4]。

本研究采用XK2100生物芯片進行4種常見呼吸道病毒的特異性抗體（IgM）檢測，顯示，908例ALRTI住院兒童中，常見病毒的抗體（IgM）陽性總檢出率達25.88%，表明病毒病原在桂東地區兒童 ALRTI中占有重要地位，但與文獻報道稍有差別，總檢出率要低，可能與此檢測方法特異性較高，假陽性率低有關[5]。其中 ADV最為常見，檢出率為20.26 %，其次為IV（9.14%），RSV（3.63%），PIV（1.76%）。表明ADV和IV是桂東地區ALRTI最主要的病毒病原。研究還提示不同年齡組患兒病毒的總檢出率不同，年齡分布中以4～5歲年齡組兒童檢出率最高，達50%。性別分布中病毒檢出率在男女之間差異無統計學意義（P＞0.05）。本研究還發現，雖然各種病毒感染的高峰期有季節分布不同，但總體流行高峰是在夏季，可能與桂東地區夏季氣候溫暖濕潤，有利于呼吸道病毒的傳播有關。

目前，國內不同地區的病原學研究結果均提示RSV是兒童ALRTI中最重要的病毒病原[5-7]。本研究結果與之并不一致。與上述報道存在的差異，推測可能與本地區的地理、氣候環境不同有關。本研究中RSV檢出率以3～4歲年齡組的為最高，達9.5%。另有研究表明 RSV在冬春季出現高峰[7]。本研究顯示，RSV感染主要集中在春季和夏季， 冬季檢出率較低，與上述報道差異有統計學意義（P＜0.05）。

從表4和表5各年齡和各季節段來看基本都是ADV占首位。陽性率隨年齡的增長逐漸上升，4～5歲達高峰，ADV的流行季節以夏季為主。

IV感染占第二位。以4歲以上兒童感染為主，ADV的流行季節以秋季為主。PIV感染率較低。

總之，本研究通過對本地區908例ALRTI住院兒童的血液用XK2100生物芯片進行檢測篩查4種常見呼吸道病毒的特異性抗體（IgM），包括呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）、流感病毒（IV） 及副流感病毒（PIV），對檢測標本陽性的病例進行統計分析。首次獲得桂東地區全年ALRTI住院兒童的常見病毒病原譜，初次認識本地區兒童ALRTI常見病毒病原譜的構成，以及與年齡、性別、季節分布的關系特點。結合統計分析，提示桂東地區醫師在診治ALRTI患兒時要考慮ADV、IV等相關病毒的感染，為臨床醫師在實際工作中針對ALRTI患兒治療提供了科學依據，同時也為本地區患兒預防接種防治呼吸道疾病積累了參考資料。

[1]中華醫學會兒科學分會呼吸學組,中華醫學會中華兒科雜志編輯委員會.急性呼吸道感染抗生素合理使用指南[J].中華兒科雜志,2001,39(6):379.

[2]Pechere JC.Community acquired pneumonian children[M].West Sussex:Cambridge Medical Publishing House,1995:29.

[3]胡亞美,江載芳,諸福棠.實用兒科學[M].第7版.北京:人民衛生出版社,2002:1174.

[4]胡亞美,江載芳,諸福棠.實用兒科學[M].第7版.北京:人民衛生出版社,2002:1180.

[5]項薔薇,羅運春,陳小芳.溫州育英兒童醫院急性下呼吸道感染住院患兒病毒病原學研究[J].中國實用兒科雜志,2005,12(12):738.

[6]李 軍,朱 啟.上海復旦大學附屬兒科醫院急性下呼吸道感染患兒常見病毒的檢測及臨床研究[J].微生物與感染,2006,1(4):217.

[7]Zhang RF,Jin Y,Xie ZP,et al.Human respiratory syncytial virus in children with acute respiratory tract infection in China[J].J Clin Microbiol,2010,48(11):4193.