不同廠家三黃片有效成分的比較

北京市東城區藥品檢驗所（100027）尤立華 葉萌 趙希賢 聶然

三黃片是常用中藥，具有清熱解毒，瀉火通便的功效，用于三焦熱盛，目赤腫痛，口鼻生瘡，咽喉腫痛，牙齦出血，心煩口渴，尿赤便秘；急性胃腸炎，痢疾等[1]。三黃片由東漢張仲景《金匱要略》瀉心湯方劑得來，由大黃、黃芩、黃連3味藥組成；后處方改為由大黃、鹽酸小糪堿和黃芩浸膏組成，質量標準提高后收載在《中國藥典》2010年版一部。《中國藥典》2010年版規定，對大黃素、大黃酚，鹽酸小糪堿、黃芩苷等多種有效成分進行含量測定，以此作為三黃片的質量控制指標，較好地控制了三黃片的質量。三黃片生產廠家眾多，實踐中發現，不同廠家生產的三黃片有效成分的含量存在一定差異，我所采用藥典方法進行含量測定，對不同廠家7個批次的三黃片有效成分的含量進行比較，評價質量標準對藥品質量保證的合理性和有效性。

1 儀器與試藥

島津LC2010液相色譜儀；大黃素對照品（批號：110736-201035，由中國藥品生物制品檢定所提供）；大黃酚對照品（批號：110736-201035，由中國藥品生物制品檢定所提供）；鹽酸小糪堿對照品（批號：110736-201035，由中國藥品生物制品檢定所提供）；黃芩苷對照品（批號：110736-201035，由中國藥品生物制品檢定所提供）；7個樣品分別為山東A廠（批號：120101；120302）、河北B廠（批號：D15051；D95033）和邯鄲C廠（批號：111172；111210；111138）提供；試劑為分析純；甲醇、乙腈為色譜純。

2 方法

2.1 色譜條件

2.1.1 大黃素、大黃酚 色譜柱：WAT045905 C18（150mm×4.6mm，5μm）；柱溫：30℃；流速：1.0 mL/min；以甲醇-0.1%磷酸溶液（85∶15）為流動相；檢測波長：254nm。

2.1.2 鹽酸小糪堿 色譜柱：WAT045905 C18（150mm×4.6mm，5μm）；柱溫：3 0 ℃；流速：1.0 L/m i n；以乙腈-水（1∶1，每1000mL中加入磷酸二氫鉀3.4g和十二烷基硫酸鈉1.7g）為流動相；檢測波長：265nm。

2.1.3 黃芩苷 色譜柱：WAT045905 C18（150mm×4.6mm，5μm）；柱溫：30℃；流速：1.0mL/min；以甲醇-0.1%磷酸溶液（40∶60）為流動相；檢測波長：280nm。

2.2 對照品溶液制備

2.2.1 取大黃素和大黃酚對照品適量，精密稱定，加無水乙醇-乙酸乙酯（2∶1）的混合溶液制成每1mL含大黃素10μg、大黃酚25μg的混合溶液，即得。

2.2.2 取鹽酸小檗堿對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液即得。

2.2.3 取黃芩苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1mL含25μg的溶液，即得。

2.3 供試品溶液制備

附表1 7個不同廠家三黃片樣品的測定結果

附表2 邯鄲C廠數據分析

2.3.1 大黃素、大黃酚含量 取本品20片，除去包衣，精密稱定，研細（過三號篩），取約0.26g精密稱定，置錐形瓶中，精密加入乙醇25mL，稱定重量，加熱回流1h，放冷，用乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液10mL，置燒瓶中，蒸干，加30%乙醇-鹽酸（10∶1）的混合溶液15mL，置水浴中加熱回流1h，立即冷卻，用三氯甲烷強力振搖提取4次，每次15mL，合并三氯甲烷液，蒸干，殘渣用無水乙醇-乙酸乙酯（2∶1）的混合溶解，轉移至25mL量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

2.3.2 鹽酸小糪堿含量 取本品10片，除去包衣，稱定重量，研細，取約0.1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇—鹽酸（500∶1）的混合溶液20mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率160W，頻率40kHz）30min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，取續濾液，即得。

2.3.3 黃芩苷含量 取本品10片，除去包衣，稱定重量，研細，取約0.1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇—鹽酸（500∶1）的混合溶液20mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率160W，頻率40kHz）30min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，取續濾液，即得。

2.4 樣品的測定 取7個不同廠家的三黃片，按2.3制備供試品溶液，精密吸取供試品溶液和對照品溶液各10μL，按2.1色譜條件，分別測定7個樣品中的大黃素、大黃酚，鹽酸小糪堿、黃芩苷，以外標法計算含量，見附表1。

3 討論

3.1 質量標準規定每片含大黃以大黃素和大黃酚的總量計，不得少于1.55mg；含鹽酸小檗堿應為4.0～5.8mg，黃芩浸膏以黃芩苷計，不得少于13.5mg。以上7個批次各成分含量測定結果均符合規定。其中鹽酸小檗堿的含量有上限，含量控制在一定的范圍，而大黃素和大黃酚的總量、黃芩苷的含量只有下限，沒有上限，表明質量標準對于以單一化學成分作為原料的處方中的成分控制嚴格。

3.2 比較不同有效成分含量測定的結果，從三個廠家的測定結果數據中，分析各有效成分批次間差異的多少，表明各有效成分在工藝控制過程中存在差異。以邯鄲 C廠為例，比較三個批次各成分含量結果的相對偏差，數據分析見附表2。其中三批次的大黃素與大黃酚總量的相對偏差最高，鹽酸小檗堿含量的相對偏差最低，表明鹽酸小檗堿的含量在有效成分的控制中，批次間重現性較好，說明其工藝控制的程度較高，而大黃素和大黃酚含量測定結果的重現性不如鹽酸小檗堿和黃芩苷，表明其工藝控制的程度較低，其結果與質量標準的設計思路及要求相符，證實了質量標準對于原處方改進的必要性及制定的含量測定限度的合理性。

3.3 比較各廠家有效成分的含量測定結果，三廠家各成分間存在明顯的差異。分析原因應主要歸于原料的選取，生產工藝的控制兩方面。同一種藥材，產地不同[2][3]，儲存條件不同導致藥材含量的差異[4]；生產工藝控制點及控制量的差異，也會造成有效成分的含量的不同，因此，廠家應嚴格把關原料尤其是原藥材的質量，嚴格按照工藝規定操作控制，確保產品質量的穩定可控，以保證藥品的臨床療效和安全。