時間分辨熒光免疫分析法定量檢測845例乙型肝炎標志物結果分析

馬興璇，劉春明，王林春

（廣西壯族自治區柳州市中醫院檢驗科 545001）

目前檢測乙型肝炎的方法有兩種，一種是檢測方法是用聚合酶鏈反應（PCR）法檢測其核酸，即乙型肝炎病毒（HBV）DNA；另一種方法是檢測乙型肝炎標志物，主要方法有酶聯免疫法（ELISA）和時間分辨熒光免疫分析法（TRFIA），PCR法因技術和實驗室要求較高，基層醫院難以開展，ELISA法是傳統檢測乙型肝炎的主要方法，但該方法的主要缺點是只能定性不能定量，不便于臨床治療過程的觀察。近年來，隨著TRFIA廣泛應用于臨床，解決了檢測乙型肝炎標志物只能定性不能定量的難題，為了探明TRFIA定量檢測乙型肝炎標志物的臨床意義，本文用TRFIA與ELISA同時檢測845例臨床診斷為乙型肝炎患者的乙型肝炎標志物，并對檢測結果進行對比分析，結果報道如下。

1 材料和方法

1.1 標本來源 845例臨床診斷為乙型肝炎患者均來自本院的肝炎科門診。

1.2 試劑 上海新波生物技術有限公司生產的乙型肝炎表面抗原（HBsAg），抗-HBs，乙型肝炎表面e抗原（HBeAg），抗－HBe，抗-HBc定量檢測試劑盒；英科新創（廈門）科技有限公司生產的ELISA法定性檢測乙型肝炎標志物試劑盒；衛生部臨床檢驗中心提供的HBV血清學標志物質控品，批號為20110302。

1.3 儀器 上海新波生物技術有限公司SYM-B10型時間分辨熒光免疫分析儀及洗板機。雷杜RT-600酶標儀及DNX-9620全自動洗板機。

1.4 方法 TRFIA定量檢測 HBV血清學標志物和ELISA法定性檢測HBV血清學標志物，均嚴格按照試劑各自說明書的要求進行操作，并做好質量控制。

1.5 結果判定 ELISA法定性結果參照試劑說明書中的判定方法。TRFIA法檢測的不同濃度標準品檢測的結果：以HB－sAg＞0.2ng／mL，抗-HBs＞10mU／mL，HBeAg＞0.5PEIU／mL，抗-HBe＞0.2PEIU／mL，抗-HBc＞0.9PEIU／mL，判定為陽性，否則為陰性。

1.6 統計學方法 采用SPSS11.0軟件統計分析，計量資料用x±s表示，配對資料用χ2檢驗。

2 結 果

2.1 本文資料顯示 用TRFIA與ELISA對845例臨床標本同時檢測，兩種方法的結果經配對χ2檢驗，HBsAgχ2＝0.02，P＞0.05；HBeAgχ2＝0.00，P＞0.05；抗-HBeχ2＝0.11，P＞0.05；抗-HBcχ2＝0.11，P＞0.05；除了抗-HBs外，其余的標志物用兩種方法檢測的結果比較均無統計學意義（P＞0.05），兩種方法的符合率最低的都超過了90%，與文獻報道一致［1－3］，見表1。

表1 兩種方法檢測陽性結果比較表（n＝845）

2.2 兩種方法檢出的指標模式有所不同。ELISA法只能檢出傳統的常見模式（HBsAg，HBeAg，抗-HBc，均陽性，俗稱“大三陽”和 HBsAg，抗-HBe，抗-HBc，均陽性，俗稱“小三陽”），而TRFIA法除了檢測出常見的“大三陽”和“小三陽”外，還檢測出了 HBsAg，抗-HBs，HBeAg，抗-HBe，抗-HBc，均陽性；HB-sAg，HBeAg，抗-HBe，抗-HBc，均 陽 性；HBsAg，抗-HBs，HBeAg，抗-HBe，均陽性；HBsAg，抗-HBs，HBeAg，抗-HBc，均陽性等四種不常見的模式。

3 討 論

ELISA方法對乙型肝炎血清標志物的檢測，只能是定性，無法檢測到其濃度，給臨床選擇治療方案和判斷治療效果帶來諸多不便，而TRFIA能對乙型肝炎血清標志物進行定量，是檢測乙型肝炎血清標志物的最大進步，將更有利于臨床對乙型肝炎的預防和治療。

TRFIA法比ELISA法具有更高的靈敏度。本文比對的845例標本中，有53例HBsAg低濃度的標本由TRFIA法檢出，而ELISA法為陰性，它們的濃度均在0.25～0.62ng／mL之間。

抗-HBs的定量測定能夠對抗體是否真正具有“中和”HBV的免疫力作出正確評估，對乙型肝炎的預防起到監督作用。抗-HBs的含量在10mU／mL以上感染者ELISA檢測即可呈陽性結果，但并不提示機體都一定具有免疫力，而抗-HBs的含量在10～100mU／mL之間的樣本，定性雖為陽性，但此時機體對HBV的免疫力較弱，甚至不能預防HBV感染。只有抗-HBs的含量達到100mU／mL以上時才可確定具有抵抗HBV入侵的作用［4］。作定量檢測，可根據抗-HBs的含量判斷機體對HBV的免疫狀態及乙肝疫苗的免疫效果。因此定量測定對乙肝疫苗免疫力的評介和高危人群預防免疫具有重要意義。

資料顯示，HBV含量不僅能較好地反應HBV攜帶者的病毒血清水平和感染強弱程度，對動態觀察治療前后HBV含量變化以及評價和預測療效均有重要意義［5］。因此，對乙型肝炎血清標志物進行定量檢測和動態觀察是臨床觀察療效和判斷預后的有效指標［6］。在治療過程中，若 HBsAg和 HBeAg濃度降低，說明病情好轉，治療有效。如果治療過程中HBsAg和HBeAg濃度不降反升，說明治療無效或效果欠佳，應考慮更改治療方案［7－8］。

總之，TRFIA法檢測乙型肝炎標志物具有可定量、特異性強、靈敏度高等優點，臨床可根據定量檢測結果進行療效判斷和選擇治療方案，具有良好的臨床應用價值。

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