外界因素對新生兒疾病篩查檢測結(jié)果影響的研究＊

陳碧艷，鄧建平，黃金林，李金花

（廣西壯族自治區(qū)百色市婦幼保健院檢驗科 533000）

本市處在邊遠山區(qū)、交通不便、經(jīng)濟欠發(fā)達，醫(yī)療條件差，不是每個接產(chǎn)單位都能按標準操作規(guī)程進行新生兒疾病篩查的血樣采集、儲存和送檢。外界因素（采血部位、儲存條件及檢測時間）對新生兒疾病篩查的檢測結(jié)果影響大小，成為本市新生兒疾病篩查中心面臨解決的難題。本市每年有5萬多名新生兒出生，保證篩查質(zhì)量才能提高陽性檢出率，避免漏診誤診的發(fā)生，新生患兒才能在篩查中早期發(fā)現(xiàn)，早期治療，避免患兒智力損害的發(fā)生［1－5］。本市新生兒疾病篩查中心為做好新生兒疾病篩查工作，進行了外界因素對新生兒疾病篩查檢測結(jié)果影響因素的研究，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 日常檢測組：選擇2010年1月至2011年6月，本市各接產(chǎn)單位送檢的30 000例新生兒疾病篩查樣本中具有代表性的17 274份，按采血部位、儲存條件及檢測時間分為三組進行比對：（1）采血部位 ①靜脈采血（血斑大邊緣整齊，血斑兩面圖形一致）；②足跟末梢采血（血斑小邊緣不整），各1895份。（2）儲存條件：①按規(guī)范要求血樣保存在4℃冰箱（條件優(yōu)越的醫(yī)院采血5d內(nèi)送檢的）；②在室溫下保存（條件較差的鄉(xiāng)鎮(zhèn)衛(wèi)生采集10d后送檢的），各3 371份靜脈采集樣本。（3）檢測時間：①5d內(nèi)檢測（按采血日期計數(shù)）；②10d后檢測（按采血日期計數(shù)），各3 371份4℃冰箱規(guī)范保存的靜脈采集樣本。進行甲狀腺功能減退（CH）、苯丙酮尿癥（PKU）的篩查結(jié)果統(tǒng)計分析。

1.2 實驗室對照組 實驗室對在本院出生的新生兒家長進行動員，嬰兒出生72h，充分哺乳后采血，按各接產(chǎn)單位血樣采集方法，每個新生兒采集靜脈、足跟末梢血各三個血斑共89例，按以上日常檢測組三個分組條件進行人為的分組，檢測結(jié)果與日常檢測組進行比對。

1.3 血片采集 新生兒為足月出生、無畸形的健康兒，出生72h后，吃足6次母乳（或混合乳）的新生兒，采取足跟末梢血或靜脈血，滴于S＆S903專用濾紙片上，滲透正反兩面，形成3個直徑約0.8cm的血斑。室溫下自然干燥后放入塑料袋，置4℃冰箱保存，5d內(nèi)送實驗室檢驗。

1.4 檢驗方法、儀器、設(shè)備和試劑 采用時間分辨熒光免疫法進行CH、PKU檢測。儀器：芬蘭Wallac時間分辨熒光免疫測定儀1420，及其TSH（CH檢測）、PKU試劑盒，內(nèi)帶有標準質(zhì)控血片，其輔助儀器配置的程序可直接打印結(jié)果。

1.5 質(zhì)量控制 參加國家衛(wèi)生部臨床檢驗中心的新生兒篩查室間質(zhì)量評價。同時以試劑盒提供的內(nèi)質(zhì)控血片進行室內(nèi)質(zhì)量控制，計算每批（次）實驗的變異系數(shù)（CV）和標準（s）。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS17.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理，計量資料以x±s表示，各組間數(shù)據(jù)比較用t檢驗、方差分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 日常檢測組

2.1.1 5d內(nèi)4℃保存的靜脈與末梢血采集樣本各1 895份，TSH和PKU檢測結(jié)果比較。

表1 5d內(nèi)4℃保存靜脈和末梢血樣本TSH與PKU的各自成對樣本比較（n＝1 895）

2.1.2 10d后室溫與4℃保存的靜脈血采集樣本各3 371份，TSH和PKU檢測結(jié)果比較。

2.1.3 靜脈血5d內(nèi)、10d后4℃和室溫保存樣本間的TSH、PKU測定結(jié)果進行多重比較（第1組為4℃保存5d內(nèi)測定結(jié)果；第2組為4℃保存10d后測定結(jié)果；第3組為室溫保存10 d后測定的結(jié)果）。（1）三組間TSH測定結(jié)果比較：第1組與第2組、第1組與第3組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），第2組與第3組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。（3）三組間PKU測定結(jié)果比較：第1組與第2組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），第1組與第3組、第2組與第3組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

表2 靜脈10d（4℃和室溫）后TSH與PKU的各自成對樣本的比較（n＝3 371）

2.2 實驗室對照組

2.2.1 靜脈血與末梢血采集樣本各89份，TSH和PKU檢測各組結(jié)果比較。

表3 5d內(nèi)4℃保存靜脈和末梢血樣本TSH與PKU的各自成對樣本比較（n＝89）

2.2.3 靜脈血5d內(nèi)、10d后4℃和室溫保存樣本間的TSH、PKU測定結(jié)果進行多重比較（第1組為4℃保存5d內(nèi)測定結(jié)果；第2組為4℃保存10d后測定結(jié)果；3組為室溫保存10d后測定的結(jié)果）。各組間TSH、PKU測定結(jié)果比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

3 討 論

國家衛(wèi)生部制定的《新生兒疾病篩查技術(shù)規(guī)范》要求，新生兒疾病篩查采血部位為新生兒足跟內(nèi)或外側(cè)，采集前應(yīng)按摩或熱敷，用75%乙醇消毒皮膚后，使用一次性采血針刺足跟，用干棉球拭去第1滴血后取第2滴血；將濾紙片接觸血滴，使血自然滲透至濾紙背面，采集3個血斑；將血片置于清潔空氣中，自然晾干；再將濾紙干血片置于塑料袋內(nèi)，保存在4℃冰箱中；在5d內(nèi)將濾紙干血片遞送至新生兒疾病篩查實驗室檢測。但是本市各接產(chǎn)單位并未能完全按照要求進行末梢血樣本的采集，采集前未按摩或熱敷新生兒足跟，采血針刺足跟深度太淺，血液不能自然流出，大都是靠大力擠壓才勉強取到三個血斑，造成血液中都有含有一定量的組織液。另外多數(shù)接產(chǎn)單位覺得足跟血難于采集，都采集了靜脈血［6－8］，所以本次主要以靜脈采集血樣為研究主體。

3.1 從以上表1、2、3可見，日常檢測和實驗室對照兩組TSH、PKU測定結(jié)果：4℃保存5d內(nèi)靜脈、末梢血樣測定結(jié)果兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），說明靜脈和末梢不同采血部位影響測定結(jié)果。但在日常檢測組中靜脈血所測結(jié)果相對標準偏差較小，實驗結(jié)果重現(xiàn)性較好。末梢血檢測結(jié)果相對標準偏差較大，實驗結(jié)果重現(xiàn)性較差。所以接產(chǎn)單位在人員或其他原因等條件限制下，如不能嚴格按照《新生兒疾病篩查技術(shù)規(guī)范》末梢血血片采集法采集血樣的，應(yīng)選擇采集靜脈血來進行新生兒疾病篩查檢測。

3.2 日常檢測組靜脈血5d內(nèi)、10d后4℃和室溫保存的樣本TSH、PKU測定結(jié)果進行多重比較。（1）5d內(nèi)、10d后4℃保存樣本TSH、PKU測定結(jié)果比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），說明規(guī)范貯存樣本不影響檢測結(jié)果。各采血單位應(yīng)配備普通2～8℃冰箱用于保存樣本。（2）10d后4℃與室溫保存樣本檢測結(jié)果兩者比較，TSH測定結(jié)果比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），PKU測定結(jié)果比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。說明雖然10d后室溫保存樣本的TSH檢測受儲存條件的影響不大，但PKU測定結(jié)果受儲存條件的影響較大。因此為保證檢測質(zhì)量，采集好的樣本應(yīng)按規(guī)范置于塑料袋內(nèi)，保存在2～8℃冰箱中。

3.3 實驗室對照組靜脈血5d內(nèi)、10d內(nèi)4℃和室溫保存的樣本測定結(jié)果各組結(jié)果進行多重比較，組間TSH、PKU檢測結(jié)果差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。實驗室各組間檢測結(jié)果較穩(wěn)定，與日常檢測組比較存在一定的差異。后經(jīng)過查找原因，發(fā)現(xiàn)新生兒疾病篩查中心實驗室除冬天溫度較低外，夏天溫度均保持在25℃左右，樣本存放在實驗室25℃恒溫下10d對檢測結(jié)果的影響不大。

總之，根據(jù)邊遠山區(qū)、交通不便、經(jīng)濟欠發(fā)達等實際情況設(shè)計合理化的血片采集、送檢、篩查、診斷、治療等設(shè)計簡單可行的服務(wù)流程，使篩查工作簡單易行，適合于山區(qū)開展，才能真正地推廣應(yīng)用新生兒疾病篩查工作［9－10］，提高篩查質(zhì)量和篩查率，出生缺陷兒才能得到早期診治，才能降低本市出生人口缺陷發(fā)生率，達到提高出生人口素質(zhì)。

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