敏篩定量過敏原檢測系統和皮內試驗檢測過敏原的對比分析

劉春威，萬京梅，玄春艷

（佳木斯大學附屬第一醫院，黑龍江 佳木斯154003）

過敏反應即I型變態反應，發生速度快，可在接觸抗原后數分鐘內出現反應，亦稱速發型變態反應。其主要特點：①發生快，幾秒鐘至幾十分鐘內出現癥狀，消退亦快，為可逆性反應；②由IgE抗體所介導；③主要表現為血管擴張、通透性增加及平滑肌收縮；④有明顯個體差異和遺傳背景；⑤過敏反應的免疫學機制復雜，涉及過敏原、IgE抗體[1]、因此明確過敏原是診斷與治療變應性疾病的首要問題，過敏性疾病的診斷流程是從一般檢查到過敏反應學特殊檢查。一般檢查包括病史、體格檢查、實驗室檢查、輔助檢查。特殊檢查包括體內試驗、體外試驗。體內試驗包括皮膚試驗和激發試驗，是傳統的診斷方法。所謂體外特異性診斷法是指從受試者體內采集血液或其他體液，在實驗室里進行實驗檢測的方法，患者只需提供檢測樣本，其他試驗過程均在患者體外進行。體外特異性診斷的目的是：明確患者是否是I型過敏體質或I型變態反應病，并找出患者的過敏原。本文主要介紹我科室新引進德國Mediwiss公司敏篩定量過敏原檢測系統與傳統的皮試方法對常見過敏原作比較分析。

1 資料與方法

1.1 病例選擇

為我科2012年5～9月210例有較典型的病史及臨床表現的患者，（支氣管哮喘、變應性鼻炎、蕁麻疹、濕疹、過敏性紫癜、食物過敏等）。其中男100例，女110例，年齡7～68歲。

1.2 檢測方法

1.2.1 先進行皮膚皮內試驗：消毒皮膚后，1mL注射用26或27號針頭將變應原提取液分別注入皮內，注入量為0.01～0.02mL或注入變應原液使形成直徑約2～3mm的皮丘。兩種皮試間距為2.5～5cm，皮試后15～20min看結果，有無風團和紅暈反應。

1.2.2 敏篩過敏原檢測系統檢測：用促凝管靜脈采血2～3mL放置試管架上30min，然后上4000轉的離心機進行離心15min。

1）試劑盒恢復到室溫（20～22℃）。2）用蒸餾水以1：25比例稀釋洗脫液。3）用清洗液濕潤硝酸纖維素膜，在檢測板上加入200～250μL的血清標本，在混勻器（120振／分）上室溫孵育45min。4）沖洗，手持反應槽上下翻轉讓清洗液充分流過，輕晃增加效果。5）加入250μL抗抗體，在混勻器上室溫孵育45min。6）沖洗（同4）。7）加250μL鏈霉親和素標記物，在混勻器上室溫孵育20min。8）沖洗（同4）。9）加入250μL底物，在混勻器上室溫孵育20min。10）流水沖洗終止底物酶反應。11）完全干燥后，敏篩過敏原檢測儀讀數。

2 結果

皮試以其中一種過敏原風團直徑≥5mm，紅暈直徑≥10mm即為陽性；敏篩法以結果≥0.35KU／L為陽性。

在檢測的210例過敏性疾病的患者中，皮試陽性186例，陽性率為88.6%，與敏篩法進行對比分析結果見表1。

表1 敏篩定量過敏原檢測與皮膚皮內試驗診斷變應性疾病患者的比較

敏篩定量過敏原檢測系統的各項診斷指標較高，與確診標準和皮試的符合程度較好。

3 討論

在本研究中，以陽性病史、癥狀、體征聯合皮內試驗結果作為過敏性疾病診斷的參考標準，將敏篩試驗與皮試進行對比研究發現，兩種不同方法之間有著一定的符合性，它們之間各有優缺點，皮膚試驗是目前常見應用的方法，優點是易于操作，15min出結果，臨床相關性較好，而且成本較低，適合對可疑過敏原的檢測，對于藥物過敏，皮膚試驗是首選的快速診斷方法。其缺點是每種過敏原都須做一個點刺，有疼痛感，有些患者尤其是兒童不愿接受。應用組胺受體拮抗藥等藥物后可能掩蓋陽性結果，因此試驗前1周應停用可能抑制皮膚試驗反應的藥物，如腎上腺糖皮質激素和抗組胺藥物。

敏篩系統是指采集患者血液進行體外實驗檢測，主要是檢測血清中的特異性IgE（sIgE），特異性IgE是機體專一對某一種特定的變應原發生反應的抗體，是檢查變態反應疾病體外試驗最重要的方法。環境中能引起I型變態反應的物質即過敏原有很多種，每種過敏原都能使對其過敏者體內產生過敏原特異性IgE。血清中特異性IgE的水平可反映個體對何種過敏原過敏及過敏的嚴重程度。由于血清特異性IgE水平比血清總IgE水平更低，需要應用敏感性更高的專門儀器設備進行檢測，而我科室引進的敏篩定量過敏原檢測系統可以進行極微量的抗原檢測，靈敏快速，各項診斷指標較高，與確診標準和皮試的符合程度較好。針對患者安全，特異性好，即來即查，無需停藥，且無任何危險性，實驗結果表明敏篩系統與皮膚皮內實驗結果相比較，性能良好，具有很好的應用前景，由于所需標本量少，在低IgE水平范圍時檢測性能好，對兒童尤為適用。皮膚試驗是體內試驗，屬于生物測定的范疇，若體內有致敏的肥大細胞，變應原與細胞膜上的免疫球蛋白IgE結合后，激活肥大細胞釋放血管活性物質，使皮膚出現風團和紅斑[2]皮膚試驗的結果判定具有一定的主觀性，與施行者的經驗有關，介于陽性和陰性之間的皮膚反應難以判斷為弱陽性還是陰性，某些嚴重過敏者還可能出現強烈過敏反應甚至過敏性休克，具有一定風險，故皮膚試驗應在具備急救復蘇條件的醫療單位進行。體外試驗屬于免疫化學測定，是對SigE的直接測定。檢測過敏原特異性IgE只需要少量血清即可進行多種過敏原檢查，結果準確，不受患者服用藥物的影響，對患者幾乎沒有皮肉痛苦，患者樂于接受，尤其適合于兒童、有彌漫性皮疹和嚴重過敏反應而藥物治療不能中斷者。因此敏篩系統不受藥物的影響，患者可在進行正常治療的同時接受檢查，敏篩系統作為一種操作簡單的方法，可對眾多變應原進行篩查檢測，消耗成本低，與皮內試驗有較好的一致性，特異度高，在過敏性疾病的診斷中，其作為一種較好的臨床血清學特異性IgE半定量篩查試驗，能夠與皮膚皮內試驗互為補充，應用于變應原特異性IgE的血清學檢查中。針對脫敏患者，要結合體內、體外試驗共同評價、判定。

[1]魏慶宇，黃建林.過敏反應門診手冊[M].北京：人民軍醫出版社，2009

[2]葉世泰.變態反應學[M].北京：科學出版社，1998