AMA-M2陽性的原發性膽汁性肝硬化患者生物化學指標特點分析

王 晗，徐 軍，劉 佳，郭靜霞，謝 娜，趙 靜，陳 霖，宋永繼，楊麗華，劉愛霞，李伯安，毛遠麗

解放軍第302醫院，北京 100039 1臨床檢驗醫學中心 全軍感染病臨床實驗診斷中心；2感染性疾病研究與診療中心

原發性膽汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis，PBC)是一種自身免疫性肝病，多見于中年女性，主要表現為肝內小膽管的非化膿性炎癥和梗阻，門脈周圍炎癥及肝實質碎屑狀壞死，最終進展為肝硬化。早期發現和早期治療是延緩病情發展的有效方法。PBC患者具有典型的免疫學自身抗體特點，也是目前臨床診斷的重要依據[1-2]。具有不同自身抗體的患者可能具有不同的PBC發病機制。本文檢測280例AMA-M2陽性的原發性膽汁性肝硬化患者生物化學等實驗室指標，作為免疫學指標特點的重要補充，為臨床PBC的診治提供依據。

對象和方法

1 對象 連續納入 2010年8月-2012年3月確診的AMA-M2陽性PBC住院患者280例。所有患者診斷均符合美國肝臟病學會(AASLD)2009年推薦的PBC診斷指南[3]：1)存在膽汁淤積癥的生化學證據，主要是堿性磷酸酶升高；2)AMA陽性；3)組織學上存在非化膿性破壞性膽管炎以及小葉間膽管毀損的表現(Ⅰ類，B級)。以上3條標準，滿足2條即可診斷。

2 血清生物化學指標檢測 利用酶比色法、礬酸鹽氧化法、雙縮脲比色法等方法，采用OLYMPUS AU5400全自動生化分析儀及其配套試劑，分別檢測患者血清丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉移酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰基轉移酶(GGT)、膽堿脂酶(CHE)、亮氨酸氨基肽酶(LAP)、直接膽紅素(DB)、總膽紅素(TB)、總膽汁酸(TBA)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)血清生物化學指標。

3 血清蛋白電泳檢測 采用毛細電泳技術，應用BIO-RAD毛細電泳儀及其配套試劑。分析患者6種血清蛋白變化情況。指標包括：白蛋白、α1球蛋白、α2球蛋白、β1球蛋白、β2球蛋白、γ球蛋白和白/球比值。

4 臨檢血液學指標檢測 采用光電比色法和發色(吸光度)法，分別應用Sysmex XE2100血細胞分析儀和ACL TOP全自動凝血分析儀及其配套試劑，檢測患者白細胞(WBC)、紅細胞(RBC)、血紅蛋白(HGB)、血小板(PLT)，以及凝血酶原時間(PT)、凝血酶原活動度(PA)等指標。采用魏氏法，應用DRAGONMED 2010全自動血沉分析儀檢測患者血沉變化。

結 果

1 一般資料 280例AMA-M2陽性PBC患者中，女性242例，男性38例，女∶男=6.4∶1。年齡36~71歲，平均49.5歲。主要臨床癥狀：納差190例(68%)，乏力172例(61%)，皮膚瘙癢112例(40%)，黃疸98例(35%)。

2 蛋白及脂類變化 52%(145例)患者ALB降低，40%(112例)TC升高，24%(67例)TG升高蛋白及脂類檢測平均值見表1。

3 膽紅素及酶類指標變化 96%(269例)GGT、93%(260例)ALP、81%(227例)TBA升高、73%(204例)AST升高、66%(185例)患者DB升高、63%(176例)LAP升高、61%(171例)ALT升高、54%(151例)TB升高，66%(185例)CHE降低。在變化程度上，DB、GGT、TBA出 現 2倍 ULN以 上 升 高，ALP、TB、ALT、AST出現1倍ULN升高，LAP出現低于1倍ULN升高。酶學等生化指標平均值見表2。

4 血清蛋白電泳指標變化 57%(160例)患者白蛋白百分比降低，71%(199例)PBC患者γ球蛋白百分比升高。在變化程度上，白蛋白僅出現略微降低，而γ球蛋白出現低于1倍ULN升高。血清各蛋白百分比平均值見表3。

5 臨床血液學檢測指標變化 39%(110例)患者WBC和41%(115例)患者PLT降低，但兩者整體平均值變化均未超出正常參考范圍。此外，有46%(129例)患者RBC降低，49%(137例)患者HGB降低。凝血功能檢測，44%(123例)患者PT延長。84%(235例)患者ESR升高。變化程度上，RBC、HGB、PT均呈低于 1倍 ULN變化，而ESR出現1倍ULN升高。臨床血液學指標平均值見表4。

討 論

PBC的發病機制尚不明確，可能與家族遺傳易感性、PBC的免疫機制、感染和化學因素有關[3-4]。其起病隱匿，生存期縮短，及時正確診斷和治療對延長患者生存期和為肝移植爭取寶貴時間具有重要意義。

本研究收集280例典型PBC患者AMA-M2陽性PBC患者的臨床標本進行檢測。血清蛋白及脂類檢測可以判斷患者肝臟合成能力、脂肪代謝、營養及免疫狀況。近50%或超過50%的PBC患者會出現ALB、TC異常，其中以免疫球蛋白變化幅度最高。超過50%的PBC患者出現多種酶類升高，而GGT、ALP升高最普遍，其次是AST、CHE、LAP、ALT。除GGT外，PBC患者的多種酶類變化程度均在1倍ULN以內。ALP及GGT不僅有助于膽汁淤積性肝病的診斷，而且對預測PBC患者的熊去氧膽酸治療效果等判斷具有重要價值[3]。此外，血清膽紅素和總膽汁酸均可用于膽汁淤積性肝病的判斷。血清膽紅素與肝病患者的預后及生存率有關[5]，分別有54%和66%的PBC患者TB和DB異常，且升高幅度在1~2 ULN，說明PBC患者若不及時治療預后多較差。而有超過80%的PBC患者血清TBA濃度增高，升高幅度超過2 ULN，說明TBA反映膽汁淤積的敏感度高于血清TB及DB，是PBC肝功能損傷重要特點。血清亮氨酸氨基轉肽酶同樣對淤膽性肝炎及肝道梗阻具有診斷價值，超過60%的PBC患者該指標升高。PBC患者體液免疫異常，血清蛋白電泳γ球蛋白百分比明顯升高，特征表現為血清IgM增高。雖然PBC白蛋白可無明顯變化，但中、晚期白蛋白常減低，球蛋白升高，白蛋白/球蛋白比值下降，甚至倒置。

血沉升高是患者臨床血液學變化最突出的特點，異常率高達84%。另外，由于肝功能受損凝血因子合成減少，脾臟腫大，脾功能亢進，血小板破壞增多，故近50%的患者PT延長。肝纖維化、肝硬化的出現還直接導致貧血和白系的降低。

2009年美國肝臟病學會對2000年版PBC診斷指南作了修訂，臨床醫生可直接通過實驗室診斷結果確診PBC，而可不再通過病理結果。“存在膽汁淤積癥等生化學證據”成為臨床免疫學AMA檢測的重要補充。AMA-M2陽性PBC患者除GGT、ALP、TBA等膽汁淤積類指標超過80%患者異常外，同樣有超過80%的患者ESR明顯升高，超過70%的患者AST和γ球蛋白異常。超過50%的患者ALB、DB、CHE、LAP、ALT、TB、 白 蛋 白 百 分 比等異常。變化幅度上，DB、GGT、TBA等最高，均超過2倍ULN，而其他指標浮動均在2倍ULN以內。

PBC患者具有典型的自身抗體譜，有90%以上的患者AMA或AMA-M2檢測呈陽性，近年來多種PBC肝抗原的篩查研究也為PBC的診斷提供了幫助[6-11]。但大量PBC患者可出現不同的肝抗原，且一直存在AMA陰性的PBC患者，證明PBC存在不同的誘發機制，不同免疫學檢測結果的PBC患者均可引起如肝內小膽管的非化膿性炎癥、梗阻，門脈周圍炎癥等相同或相似的臨床癥狀及肝功能損傷。因此，分析PBC患者的生化指標變化，結合臨床血液學特點，將為臨床和尚未開展自身抗體檢測醫療機構的PBC診斷提供幫助。

表1 PBC患者血清蛋白及脂類檢測結果Tab.1 Serum protein and lipoid levels in PBC patients(, n=280)

表1 PBC患者血清蛋白及脂類檢測結果Tab.1 Serum protein and lipoid levels in PBC patients(, n=280)

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表2 PBC患者膽紅素等代謝及酶類指標檢測結果Tab.2 Metabolism of bilirubin and enzymes in PBC patients(, n=280)

表2 PBC患者膽紅素等代謝及酶類指標檢測結果Tab.2 Metabolism of bilirubin and enzymes in PBC patients(, n=280)

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表3 PBC患者血清蛋白電泳結果Tab.3 Serum protein electrophoresis of PBC patients(, n=280)

表3 PBC患者血清蛋白電泳結果Tab.3 Serum protein electrophoresis of PBC patients(, n=280)

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表4 PBC患者臨床血液學指標Tab.4 Clinical hematologic indicators of PBC patients(, n=280)

表4 PBC患者臨床血液學指標Tab.4 Clinical hematologic indicators of PBC patients(, n=280)

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