155例血培養金黃色葡萄球菌耐藥分析

郝秀紅，趙強元，郭建巍，李艷君，錢揚會，劉力娟

海軍總醫院 檢驗科，北京 100048

金黃色葡菌球菌(staphylococcus aureus)是臨床最常見的致病菌，主要引起皮膚及軟組織化膿性感染，當宿主免疫功能低下時，該菌可侵入機體引起呼吸道等感染，嚴重者可致敗血癥。文獻報道[1-3]耐甲氧西林金黃色葡菌球菌(methicillinresistant staphylococcus aureus，MRSA)的分離率呈逐年增高趨勢，尤其是該菌引起的感染位居革蘭陽性菌檢出率榜首[4-7]，因此了解我院血培養中金葡菌感染分布和耐藥狀況，加強對MRSA的檢測，對于控制和預防院內感染的流行及指導臨床治療具有重要意義。

材料和方法

1 材料 菌株來源：155株金黃色葡萄球菌分離自2003-2011年從本院臨床送檢的血培養標本。細菌分離鑒定按照《全國臨床檢驗操作規程》進行。質控菌株：金黃色葡萄球菌ATCC25923。儀器與試劑：血培養瓶為北京伯泰技術開發中心產品；BacT ALERT 3D血培養儀、VITEK微生物分析儀及GPI卡和藥敏培養基為法國生物梅里埃產品；BIOMIC藥敏測試儀為威士達公司產品。藥敏紙片部分購于中國天壇生物制品鑒定所，部分為英國OXOID產品。抗生素：利奈唑胺((LNZ)、萬古霉素(VAN)、苯唑西林(OXA)、阿齊霉素(AZM)、呋喃妥因(NIT)、復方新諾明(SXT)、四環素(TCY)、頭孢唑啉(CZO)、環丙沙星(CIP)、左氧氟沙星(LVX)、克林霉素(CLX)、紅霉素(ERY)、青霉素(PEN)。數據分析：病原菌耐藥性分析采用WHONET5.4軟件進行分析。

2 方法 無菌條件下采集靜脈血，成人8~10 ml、兒童3~5 ml、嬰幼兒1~2 ml，注入相應可中和抗生素的血培養瓶，置BacT/ALERT 3D血培養儀中進行連續振蕩培養和監測，儀器報警有陽性瓶時，立即轉種于中國蘭和血平板(如厭氧瓶報警同時轉種厭氧血平板)，置35℃培養24~48 h，有菌生長則繼續鑒定，接種同時作涂片染色；如5 d儀器未報陽性，則按陰性報告。

結 果

1 MRSA檢出情況 從2003-2011年我院血培養檢出革蘭陽性球菌604株，金葡菌155株，其中MRSA 110株，MRSA在金葡菌中平均發生率為70.9%，每年檢出情況見表1。

2 金葡菌耐藥情況 2007年以前金葡菌所做藥敏抗生素種類有7種，2007年增至9種，2008年以后增加到12種。幾年來一直沿用的萬古霉素對金葡菌敏感性較好，沒有發現耐藥株；對呋喃妥因敏感性次之，平均耐藥率為2.0%，對青霉素平均耐藥率最高為93.9%，對其他幾種抗生素耐藥情況見表2。

3 金葡菌多藥耐藥情況 金葡菌對抗生素的多藥耐藥以七重耐藥平均檢出率最高，其中MRSA多藥耐藥率明顯高于甲氧西林敏感的金黃色葡萄球菌(methicillin sensitive staphylococcus aureus，MSSA)，檢出情況見表3。

表1 血培養中金葡菌檢出情況Tab.1 Staphylococcus aureus detected in blood culture

表2 2003-2011年血培養中金葡菌耐藥情況Tab.2 Drug resistance of Staphylococcus aureus in blood culture from 2003 to 2011

表3 血培養中155株金葡菌對常用抗生素多重耐藥情況Tab.3 Multiple drug resistance of 155 Staphylococcus aureus srains to commonly used antibiotics from 2003 to 2011(n, %)

討 論

金葡菌在血培養中分離率較高，多年來該菌一直位居我院前3位[8]，僅次于大腸埃希氏菌和表皮葡萄球菌。統計顯示連續9年金葡菌和MRSA在我院血培養檢測中的檢出數量除個別年份(2005年和2007年)外，呈逐年增長趨勢，尤其是2008年以后增長較為明顯，但每年MRSA在金葡菌中的發生率有所不同，9年來我院血培養中MRSA平均發生率為70.9%，2005-2008年MRSA發生率相對較低。金黃色葡萄球菌體外藥敏試驗顯示，多年來萬古霉素、利奈唑胺對其敏感性較好，沒有發現耐藥株，是治療MRSA重癥病人的首選藥物，呋喃妥因對金葡菌的敏感性次之，2008-2011年耐藥率均在10%以下，平均耐藥率為2.0%；復方新諾明對金葡菌的耐藥率(除2009年外)9年來均在40%以下，平均耐藥率為25.7%；青霉素耐藥率連年高達80%以上，平均耐藥率為93.9%，幾乎無抗菌活性；金葡菌對常用抗生素的耐藥性從低到高依次為利奈唑胺、萬古霉素、呋喃妥因、復方新諾明、四環素、左氧氟沙星、克林霉素、環丙沙星、頭孢西丁、頭孢唑啉、阿齊霉素、紅霉素、青霉素。表3顯示金葡菌對抗生素常呈現多藥耐藥，以七重耐藥率最高，占21.6%。MRSA和MSSA相比，二者對多藥耐藥有明顯的差別，MRSA對各類受試抗菌藥物的多藥耐藥率較MSSA顯著升高，前者以八重耐藥最高(34.6%)，后者以一、二重耐藥最高(41.5%)。

MRSA的多藥耐藥已成為臨床治療金葡菌感染的一大難題，雖然目前我院萬古霉素對金葡菌抗菌活性較好，無耐藥性，但近年來國外陸續出現的萬古霉素中介和耐藥的金葡菌隨時讓我們提高警惕，特別是國內己出現異質性耐萬古霉素葡萄球菌感染的報道[9]，應引起臨床足夠的重視。

1 Panlilio AL， Culver DH， Gaynes RP， et al. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus in U.S. hospitals， 1975-1991［J］. Infect Control Hosp Epidemiol， 1992， 13（10）： 582-586.

2 NNIS System. National Nosocomial Infections Surveillance （NNIS）System Report， data summary from January 1992 through June 2003，issued August 2003［J］. Am J Infect Control， 2003， 31（8）：481-498.

3 李家泰，齊慧敏，李耘. 2002-2003年中國醫院和社區獲得性感染革蘭陽性細菌耐藥監測研究［J］.中華檢驗醫學雜志，2005，28（3）：254-265.

4 樓玲莉，楊瑩，吳都．綜合重癥監護病房病原菌分布及耐藥情況分析［J］.現代實用醫學，2011，23（6）：667-669．

5 郝秀紅，陸季蘅，馬驄，等. 2007年我院細菌耐藥性監測［J］.軍醫進修學院學報，2009，30（4）：495-497.

6 簡翠，孫自鏞，張蓓，等．2008年武漢同濟醫院細菌耐藥性監測［J］.中國感染與化療雜志，2009，9（6）：421-426．

7 王賀，張小江，劉文靜，等．2009年北京協和醫院細菌耐藥性監測［J］.中國感染與化療雜志，2011，11（3）：161-167．

8 郝秀紅，馬驄，陸季蘅，等．血培養分離菌5年變遷與耐藥性分析［J］.軍醫進修學院學報，2009，30（2）：158-160．

9 謝憶虹，彭梅，糜祖煌，等．一株攜帶VanB基因的異質性耐萬古霉素表皮葡萄球菌的發現［J］.中國醫院藥學雜志，2006，26（5）：582-585．