微柱凝膠法檢測ABO血型正反定型不符37例原因分析

王嬌華，伍燕，吳燕

(海口市人民醫院輸血科，海南海口570208)

·論著·

微柱凝膠法檢測ABO血型正反定型不符37例原因分析

王嬌華，伍燕，吳燕

(海口市人民醫院輸血科，海南海口570208)

目的探討微柱凝膠法檢測技術在血型鑒定中的應用。方法采用微柱凝膠法對海口市人民醫院實驗室6 560例血型標本進行檢測。結果正反定型不一致的標本有37例。其中生理因素影響4例占10.8%，臨床治療影響7例占18.9%，疾病因素影響26例占70.3%。結論檢測中遇到ABO血型正反定型不一致時，應善于分析，認真復查，正確鑒定血型，以保證輸血安全。

微柱凝膠法；ABO血型；正反定型

正確的血型是臨床輸血安全的保障，選擇一種準確度和靈敏度高、且操作簡便快速的方法尤為重要。微柱凝膠法是在傳統血型血清學基礎上發展起來的一項免疫學檢測技術，它應用分子篩技術、離心技術和特異的免疫反應技術，把血型血清學技術與凝膠分子篩技術有機結合起來，可靈敏地檢測出可能存在的微弱血型抗原抗體[1]，但對于某些特殊病例會出現正反定型結果不一致，造成定型困難。我院實驗室對6 560例血型標本進行鑒定中出現37例正反定型結果不一致的現象，現整理分析如下：

1 資料與方法

1.1 標本來源2011年10月至2012年1月我院住院患者(年齡1～75歲)6 560例標本進行ABO血型檢測，正反定型不符的標本為37例。

1.2 試劑抗A、抗A1、抗B、抗H、抗AB標準血清由長春博德生物技術有限責任公司提供；反定型A1型、A2型、B型、O型標準紅細胞和不規則抗體篩選紅細胞由上海血液生物醫藥有限責任公司提供；微柱凝膠血型卡由瑞士達亞美有限公司提供。

1.3 儀器珠海市保亞美投資有限公司Tech-no508型(TwinStation)

1.4 檢測方法微柱凝膠卡氏法，試管法，吸收放散試驗，亞型鑒定試驗，抗人球蛋白試驗。所有試驗操作參照文獻[2]。

2 結果

通過一系列血型血清學的檢測，37例ABO血型正反定型不一致結果見表1。

表1 37例ABO正反定型不符原因分類

3 討論

ABO血型正反不符的原因很多，除了標本本身的特殊性外，還與實驗室的試劑和設備、技術人員的水平和經驗等多種因素有關。首先應排除人為因素和試劑因素，然后再逐一進行下列分析。

3.1 生理因素影響(1)亞型：試驗中正反定型不合的一例為A2B型，由于紅細胞上ABO抗原位點過少，導致細胞正定型會干擾，出現定型困難，A抗原的主要亞型有A1和A2，約占A型血的99.9%[3]，可采用吸收放散試驗進行檢測，同時取受檢者的唾液進行檢測。(2)自身冷凝集素：自身冷凝集素引起正反定型不符3例。冷凝集素為IgM抗體，該抗體通常在20℃左右時作用于自身及供者紅細胞，出現全凝集現象。可采用37℃生理鹽水洗滌受檢者紅細胞，可去除紅細胞表面附著的冷凝集素，鑒定血型時再37℃孵育15 min后離心檢測，可得到準確的結果。

3.2 臨床治療影響(1)消化道大出血：消化道大出血引起正反定型不符5例。臨床在治療大出血時靜脈輸入高分子藥物，如甘露醇、右旋糖苷和羥乙基淀粉等，主要為血漿擴容劑[4]，這些藥物附著在紅細胞表面，可導致紅細胞成串錢狀，干擾結果判斷，判讀時加等滲鹽水1滴混勻，往往串錢狀現象會消失，可用生理鹽水洗滌紅細胞后再檢測。(2)造血干細胞移植：造血干細胞移植引起正反定型不符2例，均為ABO異基因的造血干細胞移植，鑒定時正定型呈混合凝集，出現一度呈嵌合體，可進行臨床追蹤和DNA鑒定。

3.3 疾病因素影響(1)急性白血病：急性白血病引起正反定型不符9例。紅細胞A或B抗原的弱化是ABO血型正反定型不一致的常見原因[5]。白血病可影響N-乙酰半乳糖轉移酶或半乳糖轉移酶，導致患者A抗原或B抗原弱化[6]，在正定型時誤定為O型，因此檢測時應該適當增加紅細胞的量，結合反定型結果判定，或采用吸收放散試驗檢測。(2)多發性骨髓瘤：多發性骨髓瘤引起正反定型不符7例。多發性骨髓瘤時血漿中蛋白紊亂出現非特異性凝集，影響反定型結果，我們在血型初步判讀時以正定型為主。(3)自身免疫溶血性貧血：自身免疫性溶血性貧血引起正反定型不符6例。自身免疫性溶血性貧血時，自身或同種抗體干擾時我們可進行抗人球蛋白試驗，自身抗體時直抗試驗和間抗試驗均為陽性，同種抗體時直抗試驗陰性而間抗試驗陽性。存在自身抗體時進行吸收放散試驗，存在同種抗體時進行譜紅細胞鑒定即利用譜紅細胞與待檢者的血清反應來檢測出機體產生的同種抗體的類別[7]。(4)腸道G-菌：腸道感染G-菌引起正反定型不符4例。腸道感染G-細菌時可導致獲得性B抗原，可通過吸收試驗檢測出抗B弱和放散試驗檢測出抗B強的結果，再進一步進行臨床追蹤，當感染控制后類B現象消失。

筆者認為，使用微柱凝膠技術鑒定血型給血型鑒定工作帶來了很大的方便[8]，它具有靈敏度高、結果穩定可靠、能長期保存等優點。在日常工作中遇到正反定型不一致時，我們應當結合臨床和血清學特點，善于分析原因，通過相關的試驗作出正確的判定，更好的保障臨床輸血安全。

[1]肖倩,辛榮傳,周益強,等.微柱凝膠法檢測ABO疑難血型的臨床應用及方法學探討[J].中國實驗診斷學,2009,13(7):932-934.

[2]葉應嫵,王毓三.全國臨床檢驗操作規程[M].3版.南京:東南大學出版社，2006:246-247.

[3]熊立凡,劉成玉.臨床檢驗基礎[M].4版.北京:人民衛生出版社, 2011:77-78.

[4]周湘靜,陳碧樂,謝作聽,等.37例血漿因素引起正反定型不符原因分析[J].重慶醫學,2006,35(5):452-454.

[5]徐新蓉,龔國富.微柱凝膠法檢測ABO血型正反定型不符的原因分析與處理[J].檢驗醫學與臨床,2012,9(2):227.

[6]董曉鋒.腫瘤患者ABO血型鑒定正反定型結果不符原因分析[J].中國誤診學雜志,2006,6(8):1462-1463.

[7]夏琳.臨床輸血診療技術[M].北京:人民衛生出版社,2008:84.

[8]孫利,方宏安,莫丹,等.凝聚胺法與微柱凝膠法在交叉配血中的應用比較[J].實用醫學雜志,2008,24(6):1035.

Analysis on the causes of unconformity of positive and reverse ABO blood typing using micro-column gel agglutination assay:an analysis of 37 cases.

WANG Jiao-hua,WU Yan,WU Yan.Department of Transfusion Blood, Haikou People's Hospital,Haikou 570208,Hainan,CHINA

ObjectiveTo investigate the application of micro-column gel agglutination assay(MGAA)in blood typing.MethodsMGAAwas applied to detect the blood type of 6 560 blood specimens in this laboratory.ResultsThirty-seven specimens showed unconfirmed results in positive typing and reverse typing.Causes for the unconformity included physiological factors(4 samples,10.8%),clinical treatment(7 samples,18.9%),disease factors(26 samples, 70.3%).ConclusionIn order to ensure the safety of blood transfusion,we should carefully analyze and reexamine the blood type when the results of positive typing do not conform to that of the reverse typing in ABO blood typing.

Microcolum geltest;ABO blood group;Positive typing and reverse typing

R446.11

A

1003—6350(2013)01—0058—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2013.01.0024

2012-08-27)

王嬌華。E-mail:jiaohuaW@163.com