乙型肝炎患者血清標志物與HBV-DNA含量的相關性研究

趙衛，周盛杰

（1.中山市沙溪隆都醫院，廣東中山528471；2.廣東省第二中醫院，廣東廣州510095）

·論著·

乙型肝炎患者血清標志物與HBV-DNA含量的相關性研究

趙衛1，周盛杰2

（1.中山市沙溪隆都醫院，廣東中山528471；2.廣東省第二中醫院，廣東廣州510095）

目的探討乙型肝炎患者血清標志物與HBV-DNA定量檢測之間的關系及其臨床意義。方法選擇258例經我院確診的乙肝患者，采用酶聯免疫吸附試驗法檢測患者體內血清標志物，采用熒光定量聚合酶鏈反應檢測HBV-DNA含量，比較血清標志物與HBV-DNA檢測量之間的關系。結果HBsAg+/HBeAg+組與HBsAg+/ HBeAg+/抗-HBc+組HBV-DNA陽性檢出率與含量最高；HBsAg+/抗-HBe+/抗-HBc+、HBsAg+/HBc+、抗-HBs+/抗HBe+/抗-HBc+、抗-HBe+/抗-HBc+、抗-HBs+5種感染模式下HBV-DNA陽性檢測率分別為62.96%、52.94%、37.50%、27.27%、4.35%。結論乙肝患者血清HBV-DNA陽性率與血清標志物存在相關性；同時進行血清標志物的檢測與HBV-DNA定量檢測能較準確直接地反應病毒復制程度及傳染強度，對于早期診斷、治療及預后判斷具有指導意義。

乙肝患者；血清標志物；HBV-DNA；ELISA；FQ-PCR；相關性

乙型肝炎(簡稱“乙肝”)是一種以肝臟炎性病變為主累及器官損害的傳染性病癥疾病，常用的診斷指標有HBV-DNA與血清標志物(乙肝二對半)。為探討乙肝患者體內血清標志物與HBV-DNA定量之間的關系，本文選擇258例乙肝患者，采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清標志物，采用熒光定量聚合酶鏈反應(FQ-PCR)技術檢測其血清HBV-DNA的含量，旨在為臨床診斷、治療及預后判斷提供參考數據。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2008年2月至2009年4月經我院確診的258例乙肝患者，男165例，女93例，年齡18～65歲，平均(45.2±9.8)歲；所有患者均符合2000年西安修訂的《病毒性肝炎防治方案》診斷標準[1]。抽取空腹靜脈血2 ml，分離血清后冷凍保存待測。根據HBV血清標志物感染模式的不同，分為HBsAg+/HBeAg+/抗-HBc+、HBsAg+/抗-HBe+/抗-HBc+、HBsAg+/HBc+、HBsAg+/HBeAg+、抗-HBs+/抗HBe+/抗-HBc+、抗-HBe+/抗-HBc+、抗-HBs+7組。

1.2 方法HBV血清標志物采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)方法檢測，選擇上海科華生物公司生產的試劑，嚴格按照說明書要求操作；HBV-DNA檢測選用美國ABI公司生產的7300型PCR儀，選用中山醫科大學達安公司生產的試劑(批號：2003010)，檢測嚴格按照PCR儀和試劑說明操作，陽性結果＞1×103copies/ml。

1.3 統計學方法采用Excel數據庫和SPSS13.0統計軟件，計量結果用HBV-DNA對數表示，計量數量用均數±標準差表示，行t檢驗和χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 HBV-DNA水平比較檢驗結果顯示，不同感染模式下，HBV-DNA含量表現是不一樣的，HBsAg+/HBeAg+、HBsAg+/HBeAg+/抗-HBc+平均值較高，均在7 coppies/ml以上，其次為HBsAg+/HBc+、HBsAg+/抗-HBe+/抗-HBc+二種感染模式，平均值在4.5 coppies/ml左右，最少為抗-HBs+/抗HBe+/抗-HBc+、抗-HBe+/抗-HBc+、抗-HBs+三種模式，平均值在4 coppies/ml以上，見表1。

表1 7種感染模式下HBV-DNA水平檢測結果

表1 7種感染模式下HBV-DNA水平檢測結果

注：HBsAg+/HBeAg+/抗-HBc+、HBsAg+/HBeAg+與HBsAg+/抗-HBe+/抗-HBc+、HBsAg+/HBc+比較，P＜0.05；HBsAg+/HBeAg+/抗-HBc+、HBsAg+/HBeAg+與抗-HBs+/抗HBe+/抗-HBc+、抗-HBe+/抗-HBc+、抗-HBs+比較，P＜0.01；BsAg+/抗-HBe+/抗－HBc+、HBsAg+/HBc+與抗-HBs+/抗HBe+/抗-HBc+、抗-HBe+/抗-HBc+、抗－HBs+比較，P＜0.05。

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2.2 HBV-DNA陽性率比較HBsAg+/HBeAg+/抗-HBc+、HBsAg+/HBeAg+陽性檢出率最高，HBsAg+/抗-HBe+/抗-HBc+、HBsAg+/HBc+陽性檢出率次之，抗-HBs+23例中僅檢測出1例，陽性檢出率最低，見表2。

表2 7種感染模式下HBV-DNA陽性率檢測結果比較

3 討論

乙肝血清標志物反映出機體免疫狀態以及病毒結構蛋白成分，難以準確表述乙肝病毒的復制活躍程度。采用熒光定量聚合酶鏈反應檢測技術能夠準確地檢測出乙肝病毒的復制數，可以定量測量乙肝病毒核酸含量[2]，同時PCR管理力度的加強以及嚴格的準入制度，使得檢測結果更加可靠。拉米夫定的應用，誘發了乙肝病毒變異株的產生[3]，導致乙肝血清標志物檢測越來越復雜。因此準確地檢測出乙肝病毒感染的HBV-DNA含量，對于臨床早期診斷、判定以及治療有著非常重要的意義。

本組資料中，16例HBsAg+/HBeAg+組HBeAg陽性患者，HBV-DNA檢測均呈陽性，HBV-DNA對數值(7.85±2.12)copies/ml；HBsAg+/HBeAg+/抗-HBc+組HBV-DNA陽性檢出率為95.45%(84/88)，HBV-DNA對數值為(7.08±2.65)copies/ml，與武堅銳等[4]報道的97.1%基本一致，顯示出HBeAg陽性與HBV-DNA檢出率的一致性，證實了HBeAg陽性可以作為反應病毒復制的指標。4例沒有檢出HBV-DNA，可能與病毒未釋放到血清中有關；二組HBV-DNA對數值比較，差異有統計學意義(P＜0.05)，表明病毒感染開始模式為HBsAg+、HBeAg+、抗-HBc+[5]。

27例HBsAg+/HBc+感染模式中陽性檢出率為62.96%，HBV-DNA對數值為(4.68±1.52)copies/ml；85例HBsAg+/抗-HBe+/抗-HBc+感染模式中陽性檢出率為52.94%，HBV-DNA對數值為(4.42±2.14)copies/ml。表明患者體內病毒復制的同時，也存在病毒變異、免疫耐受等現象，說明抗-HBc的出現只能證實HBV復制水平的降低，而不能代表HBV復制的停止[6]。

11例抗-HBs+/抗HBe+/抗-HBc+、8例抗-HBe+/抗-HBc+、23例抗-HBs+不同感染模式陽性檢出率與HBV-DNA對數值檢測表明，不同的血清標志模式均有一定的陽性檢出率，也就是說只要有HBV-DNA+，就有誘發HBV感染的可能，同時也說明，DNA既可能存在于血清中，也可能存在于肝細胞中，僅僅通過血清標志物的檢測作為診斷、治療HBV指標有一定的局限性，需要同時定量測量HBV-DNA[7]。

綜上所述，乙肝病患者血清HBV-DNA陽性率與血清標志物呈現一定的狀態關系，可以用作判斷乙肝病毒復制的指標。在乙肝患者的早期診斷、判別、治療過程特別是療效觀察中，僅僅憑血清標志物并不能準確判斷HBV復制程度以及傳染性強度，需要同時進行HBV-DNA檢測，定量檢測HBV-DNA對于臨床診斷治療以及預后判斷有著十分重要的意義。

[1]中華醫學會傳染病與寄生蟲病學分會,肝病學分會.病毒性肝炎防治方案[J].中華傳染病雜志,2001,19(1):56-62.

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[3]朱映華,鄭煜煜,李異,等.拉米夫定聯合干擾素-α2b治療慢性乙型肝炎療效觀察[J].中華現代醫學雜志,2001,11(8):53-54.

[4]武堅銳,祁春茹.乙型肝炎患者血清標志物與HBV-DNA含量關系的研究[J].臨床醫學實踐,2012,21(3):211-212.

[5]劉宏景,李沛,劉寶根,等.電化學發光法檢測乙型肝炎患者血清標志物與HBV-DNA定量關系的研究[J].中國實驗診斷學, 2004,8(5):535-536.

[6]馬健平,余暉.乙型肝炎血清標志物聯合病毒DNA檢測在臨床應用中的意義[J].中華醫護雜志,2006,3(1):43-44.

[7]Peng XM,Gu L,Chen XJ.Optim ization of competitively differentiated polymerase chain reaction in detection of HBV basalcore promoter mutation[J].World J Gastroenterol,2005,11(23):3614-3618.

Correlation study of serum markers and HBV-DNA levels in hepatitis B patients.

ZHAO Wei1,ZHOU Sheng-jie2. 1.Shaxilongdu Hospital of Zhongshan City,Zhongshan 528471,Guangdong,CHINA;2.Guangdong Second Provincial Traditional Chinese Medicine Hospital,Guangzhou 510095,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo investigate the correlation of serum markers and HBV-DNA levels in hepatitis B patients and its clinical significance.MethodsTwo hundred and fifty-eight hepatitis B patients was detected for serum markers by ELISA and HBV-DNA levels by quantitative fluorescent polymerase chain reaction(QF-PCR).The correlation between serum markers and HBV-DNA levels were investigated.ResultsIn HBsAg+/HBeAg+group and HBsAg+/ HBeAg+/anti-HBc+group,the positive rate of HBV-DNA and the levels of HBV-DNA were the highest.For the five infection modes of HBsAg+/anti-HBe+/anti-HBc+,HBsAg+/HBc+,anti-HBs+/anti-HBe+/anti-HBc+,anti-HBe+/anti-HBc+,anti-HBs+,the HBV-DNA positive rates were 62.96%,52.94%,37.50%,27.27%,4.35%,respectively.ConclusionThere is a correlation between the positive rate of HBV-DNA and the serum markers in hepatitis B patients.The detection serum markers combined with the quantitative detection of HBV-DNA can accurately reflect the extent of virus replication and infection intensity,which is of great significance for the early diagnosis,treatment and prognosis of hepatitis B.

Hepatitis B patients;Serum markers;HBV-DNA;ELISA;FQ-PCR;Correlation

R512.6+2

A

1003—6350(2013)01—0049—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2013.01.0020

2012-05-25)

趙衛。E-mail：1778132958@qq.com