非小細(xì)胞肺癌化療前后血清VEGF和MMP-9水平的對(duì)照觀察

錢海紅

非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)是一種最常見的惡性腫瘤，近年來發(fā)病率不斷增高。NSCLC的早期診斷尚有困難，大多數(shù)患者確診時(shí)已是晚期。處于相同階段的非小細(xì)胞肺癌患者，其疾病進(jìn)展程度也有顯著差異。NSCLC的治療目標(biāo)是減慢疾病的進(jìn)展，緩解患者的癥狀，提高總體生存率。以鉑類為基礎(chǔ)的化療藥物是晚期NSCLC治療的一線用藥，據(jù)報(bào)道，含鉑類的化療方案應(yīng)答率達(dá)20% ～35%，中位生存時(shí)間約10個(gè)月［1］。但是許多患者接受一線化療后，病情依然惡化，因此尋找新的作用靶點(diǎn)成為NSCLC的研究趨勢(shì)，而在肺癌的治療過程中，也需要能夠客觀有效地評(píng)價(jià)其化療效果的指標(biāo)作為觀察依據(jù)。本研究通過

觀察NSCLC化療前后血清VEGF和MMP-9水平的變化，以及與NSCLC患者化療療效之間的關(guān)系，探索二者在化療療效評(píng)價(jià)中的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集我院2008年2月至2010年12月住院的晚期非小細(xì)胞肺癌患者54例，其中男37例，女17例;年齡38～74歲，平均年齡(63±7)歲;鱗癌32例，腺癌22例。所有患者化療前均經(jīng)病理組織學(xué)或細(xì)胞學(xué)檢查確診，并均為未接受手術(shù)或放、化療的初診病例。臨床TNM分期按照2002年國(guó)際抗癌聯(lián)盟(UICC)標(biāo)準(zhǔn):ⅢB期29例，Ⅳ期25例。

1.2 治療方法 所有入組患者治療前均行胸部 CT，血清VEGF和MMP-9檢測(cè)。采用以鉑類為基礎(chǔ)的化療方案(GP、TP、NP)，連續(xù)治療2個(gè)周期后，再次復(fù)查胸部 CT，血清VEGF和MMP-9，以評(píng)價(jià)臨床近期療效及兩個(gè)因子的血清水平變化。

1.3 療效判斷標(biāo)準(zhǔn) 參照RECIST評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)分為完全緩解(CR)，部分緩解(PR)，無(wú)變化或穩(wěn)定(SD)和進(jìn)展(PD)，CR+PR視為治療有效，SD+PD視為治療無(wú)效。

1.4 血清VEGF和MMP-9的檢測(cè) 分別于化療第一周期前和第二周期結(jié)束后在空腹?fàn)顟B(tài)下抽取靜脈血，離心分離血清，分裝后貯存于－20℃待測(cè)。VEGF和MMP-9采用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測(cè)。試劑盒購(gòu)自R＆D Systems公司，各步驟均嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。用酶標(biāo)儀依試劑盒的要求，在一定波長(zhǎng)的紫外燈下讀取各樣品的OD值。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品濃度得出校準(zhǔn)曲線和換算公式，最后計(jì)算出待測(cè)樣品的濃度。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以±s表示，采用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 臨床近期療效比較 所有入組的54例患者，CR 0例，PR 34 例(62.96%)，SD 9 例(16.67%)，PD 11 例(20.37%)。有效34 例(62.96%)，無(wú)效20 例(37.04%)。

2.2 治療前后血清VEGF和MMP-9變化比較 與化療前相比，化療后血清VEGF水平無(wú)明顯降低(P ＞0.05)，而MMP-9與化療前相比有顯著降低(P＜0.05)。有效組化療后血清VEGF水平與化療前相比有所降低，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);血清 MMP-9水平與化療前相比明顯下降(P＜0.05)。無(wú)效組血清VEGF和MMP-9水平的變化差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＞0.05)。見表1、2。

表1 化療前后血清VEGF和MMP-9變化比較n=54，pg/ml，±s

表1 化療前后血清VEGF和MMP-9變化比較n=54，pg/ml，±s

指標(biāo) 化療前 化療后 P值VEGF 296 ±124 288 ±104 1.045 MMP-9 585 ±135 406 ±89 0.038

表2 有效組和無(wú)效組血清VEGF和MMP-9化療前后變化比較pg/ml，±s

表2 有效組和無(wú)效組血清VEGF和MMP-9化療前后變化比較pg/ml，±s

3 討論

腫瘤的形成、生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移都依賴于血管生成。VEGF在腫瘤血管生成中發(fā)揮重要作用，VEGF可刺激肺癌組織微血管生長(zhǎng)和促使血管通透性增加而促進(jìn)肺癌的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移。VEGF過表達(dá)對(duì)NSCLC，尤其是腺癌患者的生存期產(chǎn)生不利影響［2］。MMP-9可激活形成Ⅳ型膠原酶，降解與血管生成相關(guān)的Ⅳ型膠原蛋白，在細(xì)胞外基質(zhì)的降解和再塑造中發(fā)揮作用。MMP-9可能參與腫瘤進(jìn)展的許多過程，如基質(zhì)膜的降解、腫瘤細(xì)胞進(jìn)入血液循環(huán)、局部遷移、腫瘤生長(zhǎng)和血管生成的微環(huán)境的形成等［3］。有研究證實(shí)，VEGF和MMP-9在非小細(xì)胞肺癌中表達(dá)增高，而且與分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期相關(guān)［4］。也有研究發(fā)現(xiàn)MMP-9的療前水平與NSCLC的預(yù)后相關(guān)［5］。

雖然大量研究表明療前VEGF和MMP-9水平與NSCLC患者的生存相關(guān)，但是化療與VEGF、MMP-9血清水平的變化之間的關(guān)系卻知之甚少。Yoshimoto等［6］用吉非替尼治療晚期非小細(xì)胞肺癌患者52例后，發(fā)現(xiàn)MMP-9與療前相比無(wú)顯著變化。本研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過以鉑類為基礎(chǔ)的一線化療后，總有效率為62.96%。測(cè)定化療前后VEGF與MMP-9血清水平的變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)VEGF血清水平在化療前后無(wú)顯著差異，可能由于樣本量較少，研究本身存在一定局限性，因此還有待于進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量進(jìn)行觀察。化療有效組MMP-9血清水平明顯降低，提示MMP-9可以作為判斷疾病進(jìn)展的重要指標(biāo)。

MMP-9是一個(gè)功能復(fù)雜的分子，在腫瘤進(jìn)展過程中發(fā)揮重要作用。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，MMP-9可以介導(dǎo)Kit配體釋放，從而誘導(dǎo)骨髓造血細(xì)胞的動(dòng)員，它可以重構(gòu)細(xì)胞外基質(zhì)，促使VEGF與內(nèi)皮細(xì)胞表面的受體結(jié)合，從而促進(jìn)新血管的生成［7］。此外，有研究發(fā)現(xiàn)MMP-9與一些皮膚腫瘤的進(jìn)展或預(yù)后相關(guān)，如惡性黑色素瘤［8］，基底細(xì)胞癌［9］等。近來有研究報(bào)道，通過雙磷酸鹽抑制MMP-9作為惡性血管內(nèi)皮細(xì)胞瘤的支持治療，可以抑制腫瘤血管生成，誘導(dǎo)抗腫瘤免疫［10］。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)化療有效的NSCLC患者血清MMP-9水平較化療前顯著降低，提示MMP-9可以反映患者病情的變化，為病情的進(jìn)展和預(yù)后提供依據(jù)。MMP-9和VEGF對(duì)NSCLC療效評(píng)價(jià)的意義尚未完全揭示，有待于進(jìn)一步的研究。

1 Waters JS，O’Brien MER.The case for the introduction of new chemotherapy agents in the treatment of advanced non small cell lung cancer in the wake of the findings of The National Institute of Clinical Excellence(NICE).Br J Cancer，2002，87:481-490.

2 Cox G，Jones JL，O’Byrne KJ.Matrix metalloproteinase 9 and the epidermal growth factor signal pathway in operable non-small cell lung cancer.Clin Cancer Res，2000，6:2349-2355.

3 Ertan E，Soydinc H，Yazar A.Matrix metalloproteinase-9 decreased after chemotherapy in patients with non-small cell lung cancer.Tumori，2011，97:286-289.

4 付偉，高楊，劉愛東.VEGF、MMP29和E2cadherin在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及其關(guān)系.腫瘤防治研究，2010，37:226-228.

5 Zheng S，Chang Y，Hodges KB.Expression of KISS1 and MMP-9 in nonsmall cell lung cancer and their relations to metastasis and survival.Anticancer Res，2010，30:713-718.

6 Yoshimoto A，Kasahara K，Nishio M.Changes in angiogenic growth factor levels after gefitinib treatment in non-small cell lung cancer.Jpn J Clin Oncol，2005，35:233-238.

7 Heissig B，Hattori K，Dias S.Recruitment of stem and progenitor cells from the bone marrow niche requires MMP-9 mediated release of kit-ligand.Cell，2002，109:625-637.

8 Vihinen PP，Hernberg M，Vuoristo MS.A phase II trial of bevacizumab with dacarbazine and daily low-dose interferon-alpha2a as first line treatment in metastatic melanoma.Melanoma Res，2010，20:318-325.

9 Monhian N，Jewett BS，Baker SR.Matrix metalloproteinase expression in normal skin associated with basal cell carcinoma and in distal skin from the same patients.Arch Facial Plast Surg，2005，7:238-243.

10 Ishibashi M，F(xiàn)ujimura T，Hashimoto A.Successful Treatment of MMP-9 Expressing Angiosarcoma with Low-Dose Docetaxel and Bisphosphonate.Case Rep Dermatol，2012，4:5-9.