在銀屑病發病機制中Th22細胞及其細胞因子的作用分析

【摘要】 目的 探究Th22細胞及其細胞因子在銀屑病發病機制中的作用，為銀屑病提供新的治療方向。方法 選取銀屑病靜止期患者34例作為觀察一組、進行期患者32例作為觀察二組，選取正常獻血員35例作為對照組，用流式細胞術檢測所有對象外周血Th22細胞表達水平，用酶聯免疫吸附方法（ELISA）檢測IL-22、TNF-α、IL-13的表達，比較三組細胞及細胞因子表達水平。結果 觀察一組和二組Th22細胞、IL-22、TNF-α、IL-13表達水平均高于對照組，且觀察二組高于觀察一組，P<005。結論 Th22細胞及其細胞因子在銀屑病的發病機制中有一定的作用，以此可以尋找治療銀屑病新的突破口。

【關鍵詞】 銀屑病；Th22細胞；細胞因子；發病機制

doi：103969/jissn1004-7484（s）201306077 文章編號：1004-7484（2013）-06-2876-02

銀屑病是一種多基因遺傳疾病，它是由T細胞介導的一種自身免疫性疾病，其主要臨床癥狀表現為表皮過度增生，皮損部位炎癥細胞浸潤，從而導致皮膚浸潤性鱗屑性紅斑發生。銀屑病的臨床診斷不難，但其病程較長，易反復發作，治療上存在一定的困難。以往認為銀屑病的發生機制多與Th17細胞及其相關因子有關，但是近些年對于Th22細胞及其分泌的細胞因子的研究有了一定的進展，Th22細胞是一類新發現的T輔助細胞，能夠激活其他免疫細胞，調節機體的免疫功能[1]。現筆者通過研究發現Th22細胞及其分泌的細胞因子在銀屑病的發病機制中有著一定的特殊作用，現報道如下：

1 資料與方法

11 資料 選取2011年2月——11月我院皮膚科收治的66例銀屑病患者，其中尋常型銀屑病患者45例，關節型銀屑病患者21例。依據患者的病情嚴重程度分為觀察一組，由34例靜止期患者組成，男性19例，女性15例，年齡18-47歲，平均年齡（3282±549）歲，病程7-10年；觀察二組由32例進行期患者組成，男性16例，女性16例，年齡19-49歲，平均年齡（3391±693）歲，病程7-105年；選取同期我院門診部的正常獻血員35例作為對照組，男性19例，女性16例，年齡19-48歲，平均年齡（3252±658）歲。所以患者均經過我院皮膚科的相關檢查明確診斷為銀屑病，根據PASI積分法評分評判患者病情的嚴重程度。排除患有其他皮膚病、自身免疫性疾病的患者。

12 研究方法 于清晨早餐前采取所有研究對象的外周靜脈血10ml，加入肝素鈉抗凝，用人淋巴細胞分離液（生產廠家：上海研謹生物科技有限公司）獲取外周血單個核細胞，接種于24孔培養板，分別加入刺激劑佛波醇乙酯（60μg/L）（生產廠家：A-LEXIS公司）、離子霉素（20μmol/L）（生產廠家：湖北隆泰醫藥化工公司）、莫能霉素（500μg/L）（湖北巨龍堂生物科技發展有限公司），放入細胞培養箱（5%CO2、37℃）培養4h后加入鼠抗人CD4單抗（生產廠家：eBioscience公司），避光在4℃下孵育30min。經過2次PBS洗滌后離心棄上清，加入破膜劑，離心棄上清，進行胞內細胞因子染色后4℃避光孵育30min后經過2次PBS洗滌后可上機檢測Th22細胞表達水平。應用酶聯免疫吸附方法ELISA檢測外周血Th22細胞相關因子IL-22、TNF-α、IL-13的表達水平。IL-22ELISA試劑盒，TNF-αELISA試劑盒，IL-13ELISA試劑盒均購自BenderMedSystems公司[2]。

13 統計學分析 應用SPSS160軟件分析，計量數據采用均數±標準差（χ±s）表示，組間比較采用t檢驗，P>005，差異無統計學意義，P<005，差異具有統計學意義。

2 結 果

通過流式細胞術和酶聯免疫吸附方法（ELISA）檢測三組研究對象外周血中Th22細胞及其細胞因子IL-22、TNF-α、IL-13的表達水平，結果見表1，得出觀察一組和二組Th22細胞、IL-22、TNF-α、IL-13表達水平均高于對照組，且觀察二組高于觀察一組，P<005，差異具有統計學意義。說明Th22細胞及其分泌的相關因子在銀屑病的發病機制中有一定的作用，且其表達水平與病情嚴重程度相關。

3 討 論

銀屑病是一種常見的多基因遺傳疾病，其發病機制較為復雜，目前的研究顯示其主要是由T細胞介導的一種自身免疫性疾病，主要臨床癥狀表現為表皮過度增生，皮損部位炎癥細胞浸潤，從而導致皮膚浸潤性鱗屑性紅斑發生。銀屑病的臨床特征較典型，一般診斷不難，但由于其發病機制尚不是十分清楚，導致疾病難以根治，病程較長，易反復發作，使得患者飽受疾病痛苦[3]。

以往的研究多提示銀屑病的發生多與Th17細胞及其相關因子有關，但是2009年Duhen T 等采用流式細胞術發現了Th22細胞，Th22細胞是一類新發現的T輔助細胞，能夠分泌IL-22、TNF-α、IL-13、IL-10，但不產生IL-4、IL-17和IFN-γ，通過研究顯示其能穩定地選擇性地表達特異性轉錄因子，可以說明Th22細胞是一種獨立于已知的Th1、Th2及Th17細胞的終末分化及獨立穩定的CD4+記憶性T細胞亞群[4]。通過研究表明Th22細胞能夠激活體內其他免疫細胞，調節自身免疫系統，其分泌的IL-22、TNF-α、IL-13等相關細胞因子以及成纖維細胞生長因子（FGF）在疾病的發生發展中有著重要作用，其中IL-22在很多研究中已被證實在人體多種生理病理反應中均有著重要作用，如先天性免疫性疾病、慢性炎癥性疾病、感染性疾病、組織修復等。但也有研究顯示，不同疾病中IL-22的來源也是有所不同的，而Th22細胞所分泌的IL-22與其他一些細胞所分泌的IL-22有著不同的功能作用，這也提示了Th22細胞及其細胞因子在銀屑病的發病機制中有著一定特殊的作用，值得進一步探究[5]。

現本文通過流式細胞術和酶聯免疫吸附方法（ELISA）檢測銀屑病患者和正常人外周血中Th22細胞及其細胞因子IL-22、TNF-α、IL-13的表達水平，得出銀屑病患者外周血中Th22細胞、IL-22、TNF-α、IL-13表達水平均高于正常人，且進行期銀屑病患者Th22細胞及其細胞因子的表達水平高于靜止期的銀屑病患者，P<005，差異具有統計學意義，提示Th22細胞及其分泌的相關因子在銀屑病的發病機制中有一定的作用，且其表達水平與病情嚴重程度呈正相關。

綜上所述，Th22細胞及其分泌的相關細胞因子IL-22、TNF-α、IL-13在銀屑病的發病機制中具有重要作用，值得進一步探究，為臨床治療銀屑病提供新的治療方向。

參考文獻

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[2] 劉昀，吳長有Th22細胞的研究進展[J]中國免疫學雜志，2010，26（4）：372-373

[3] 丁曉嵐，王婷琳，沈佚葳中國六省市銀屑病流行病學調查[J]中國皮膚性病學雜志，2010，24（7）：598-599

[4] 陳穎，張秀明Th22細胞生物學功能及臨床應用的研究進展[J]實用醫學雜志，2012，28（17）：2970-2972

[5] 楊雪琴銀屑病的整體治療研究[J]解放軍醫學雜志2009，34（3）：246-247