葛根醇提物對H22小鼠的抑癌作用的效果觀察

【摘要】 目的 通過探討葛根醇提物抗腫瘤作用和作用機(jī)制。方法 檢測了葛根醇提物抑瘤作用及小鼠H22肝癌血清中白介素-8（IL-8）和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的含量（ELISA法）。結(jié)果 不同劑量葛根醇提物能不同程度抑制荷瘤小鼠H22肝癌的生長，能增加TNF-α和降低IL-8的含量。結(jié)論 葛根醇提物對荷瘸小鼠H22肝癌具有抑制作用。

【關(guān)鍵詞】 葛根醇提物；荷瘤小鼠；白細(xì)胞介素-8（IL-8）；腫瘤壞死因子-α（TNF-α）

doi：103969/jissn1004-7484（s）201306025 文章編號：1004-7484（2013）-06-2827-02

葛根（radix pueraiae）性味歸經(jīng)：甘、辛，涼。入脾、胃經(jīng)。功效與主治：①發(fā)表解肌主治外感表邪，尤宜于伴有項(xiàng)背強(qiáng)直者。②升陽生津治瀉痢，津傷口渴，消渴證。③透發(fā)斑疹用于麻疹初起不透等。化學(xué)成分：葛根含多種黃酮類成分，主要活性成分為大豆素（daidzein）、大豆甙（daidzin）、葛根素（puerarin）、葛根素-7-木糖甙（puerarin-7-xyloside）等。以及多量淀粉等。藥理作用：①所含黃酮成分能增加腦及冠脈血流量。②有解熱、解痙及降血糖作用。③有雌激素樣作用。[1]

一旦確診為惡性腫瘤，臨床上局部切除后還需要對患者進(jìn)行長期的放療和化療，放化療是把雙刃劍，對人體的傷害極大，患者依從性差。因此，尋找天然無毒的抗腫瘤藥物成為近年研究的熱點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)旨在研究以H22肝癌荷瘤小鼠為對象[2]，對葛根醇提物對荷瘤小鼠的抗癌作用進(jìn)行簡單的效果觀察。

1 材料和方法

11 動(dòng)物 昆明種小鼠，普通飼養(yǎng)，6周齡，體重18-22克，共50只，雌雄各半，：室溫（20±2），顆粒飼料喂養(yǎng)，自由飲水。

12 材料 取葛根1000g用10倍量50%、60%、70%乙醇回流提取lh，各三次，合并濾液，回收溶劑，減壓干燥至恒重得干膏33046g。環(huán)磷酰胺購買于：江蘇恒瑞制藥股份有限公司。蘇木素和伊紅來自 Sigma化學(xué)試劑公司。腫瘤壞死因子-α-和白介素-8 以及ELISA試劑盒購于上海江萊生物科技有限公司。

13 儀器 真空干燥箱、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、溫濕度計(jì)、超純水儀、超速冷凍離心機(jī)、超低溫冰箱、制冰機(jī)、生物安全柜、高壓滅菌箱、電子天平、酶標(biāo)儀（熱電上海儀器有限公司）。

14 方法

141 昆明種小鼠被隨機(jī)分成四組，每組10只（蒸餾水組、環(huán)磷酰胺組、葛根醇提物低劑量組、葛根醇提物高劑量組）。無菌條件實(shí)驗(yàn)室，于小鼠左前肢腋下注射稀釋后的H22肝癌細(xì)胞株02ml/只。24小時(shí)后，小鼠灌胃給葛根醇提物，藥物劑量分別為450和900mg/kg，連續(xù)15d。蒸餾水組灌服蒸餾水。環(huán)磷酰胺組（每公斤體重25mg腹腔注射）。第16天，所有動(dòng)物被處死，稱重小鼠和腫瘤。腫瘤抑制率按下式計(jì)算：

抑瘤率=對照組平均瘤重一劑量組平均瘤重）/對照組平均瘤重×100%。

142 葛根醇提物對血清中TNF-α和IL-8 的影響 處死實(shí)體瘤小鼠以前，小鼠被摘右眼球取血。血樣4℃情況下靜置lh，然后與室溫3OOOr/min離心5min，分離血清。TNF-α和1L-8按ELISA試劑盒說明程序進(jìn)行。

15 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)用 χ±s。

2 結(jié) 果

21 葛根醇提物對腫瘤有明顯抑制的作用 給予葛根醇提物和環(huán)磷酰胺能減少腫瘤的重量，劑量越大效果越好，見表1。

3 討 論

通過以上實(shí)驗(yàn)效果觀察顯示，葛根醇提物組能顯著抑制腫瘤的發(fā)展，隨著葛根劑量的增大抗腫瘤作用也隨之增強(qiáng)。葛根醇提物可以提高小鼠的TNF-α含量，而降低lL-8的含量。這可能是由于葛根總黃酮成分可以增強(qiáng)體內(nèi)的免疫力促進(jìn)免疫細(xì)胞的繁殖，從而增強(qiáng)機(jī)體細(xì)胞的免疫功能而達(dá)到扼制、殺傷癌細(xì)胞的作用。本實(shí)驗(yàn)為中西藥結(jié)合，聯(lián)合抗腫瘤提供了科學(xué)依據(jù)。為腫瘤的治療開拓了新的思路。TNF-α是一種能夠直接殺傷腫瘤細(xì)胞而對正常細(xì)胞無明顯毒性的細(xì)胞因子，是迄今為止所發(fā)現(xiàn)的直接殺傷腫瘤作用最強(qiáng)的生物活性因子之一。白介素-8，Interleukin-8，IL-8），又稱為趨化因子CXCL8是巨噬細(xì)胞和上皮細(xì)胞等分泌的細(xì)胞因子。白細(xì)胞介素-8結(jié)合趨化因子受體白細(xì)胞介素-8受體α（IL8RA，又叫CXCR1）和白細(xì)胞介素-8受體β（IL8RB，又叫CXCR2）而對中性粒細(xì)胞有細(xì)胞趨化作用而實(shí)現(xiàn)其對炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)。本實(shí)驗(yàn)為中西藥結(jié)合，聯(lián)合抗腫瘤提供了科學(xué)依據(jù)。為腫瘤的治療開拓了新的思路。全面提高了患者治療期的生活質(zhì)量。

參考文獻(xiàn)

[1] 宋立人等，主編現(xiàn)代中藥學(xué)大辭典（上冊）[M]北京：人民衛(wèi)生出版社，2001：301-302

[2] 朱彩平，張聲華枸杞多糖對H22肝癌小鼠的抑瘤作用[J]中國公共衛(wèi)生雜志，2006，22（6）：717-718

[3] Tilg H，Shapiro L，Atkins MB，et alInduction of circulating and erythrocyte-bound IL-8 by IL-2 immunotherapy and suppression fits in vitro production by IL-l receptor antagonist and soluble tumor necrosis factor receptor（p75）chimera[J]The Journal oflmmunology，1993，24（2）：3299-3307