miR—29在妊娠期肝內膽汁淤積癥中的表達及意義

【摘要】 目的 研究miR-29在妊娠期肝內膽汁淤積癥（ICP）患者中的表達及其在妊娠期肝內膽汁淤積癥中的作用。方法 提取50例ICP患者及50例同期正常妊娠婦女外周血RNA，Realtime PCR檢測表達。結果 miR-29在ICP患者中明顯高于正常妊娠婦女。血清miR-29水平與ICP患者的年齡、孕周、經產與否、胎數無關，但是與圍產兒預后相關。結論 血清miR-29在ICP的診斷和圍產兒預后預測中發揮重要作用。

【關鍵詞】 妊娠期肝內膽汁淤積癥；miR-29；臨床意義

doi：103969/jissn1004-7484（s）201306040 文章編號：1004-7484（2013）-06-2840-02

妊娠期肝內膽汁淤積癥（ICP）是發生在晚期妊娠的肝臟疾病，產后可治愈。發病最初伴有瘙癢，有時出現黃疸，血膽汁酸、膽紅素、丙氨酸氨基轉移酶和天冬氨酸氨基轉移酶升高。患者的預后一般較好，但是血膽汁酸升高引起的代謝毒性可能引起早產、死胎、死產。據統計，ICP的發生率約為1%。ICP的發病原因尚不十分清楚，但研究表明，環境、激素水平及遺傳因素發揮了重要作用。ICP有家族遺傳性，可能與種族、地理位置相關[1]。雌激素和孕激素可能與ICP發病相關[3-4]。

microRNA是微小非編碼RNA，能負調控基因的表達及mRNA的穩定性。許多研究表明miRNA在肝臟疾病中發揮著重要的作用。miR-29在膽道閉鎖小鼠血清中表達增加[5]。本研究旨在探討miR-29在ICP患者中的表達及在ICP中的臨床作用。

1 材料與方法

11 臨床資料 以2011年5月——2012年4月在我院診斷為妊娠期肝內膽汁淤積癥的孕婦20例為研究組，年齡22-40歲，平均（281±70）歲，孕周31+1-40周，平均（35±43）周。配對同期住院30例正常產婦作為對照，年齡20-39歲，平均（275±83）歲，孕周31+5-41周，平均（376±24）周。

12 妊娠期肝內膽汁淤積癥的診斷依據[2-3] ①中晚期妊娠有全身瘙癢，伴或不伴有黃疸，排除其他皮膚疾病或藥敏性皮炎；②血清膽汁酸大于等于16μmol/L，或者血清丙氨酸和天冬氨酸氨基轉移酶大于31U/L；③分娩后癥狀及體征消失；④排除其他肝臟疾病。

13 外周血RNA提取 利用RNA抽提試劑盒（QIAGEN）提取5ml外周血的RNA存于-80°C。

14 miRNA檢測 逆轉錄RNA1μg（Invitrogen試劑）。16℃30min，42℃30min，85℃10min，4℃10min，-20℃保存。Realtime PCR檢測（上海吉瑪生物公司），置于Realtime PCR儀內，950°C，3分鐘；950°C，12秒；620°C，35秒，40循環；熔解曲線分析從620°C開始至950°C停止。

15 統計學分析 用SPSS130軟件，采用t檢驗，P<005，差異有統計學意義。

2 結 果

21 miR-29在ICP患者及正常妊娠婦女外周血的表達 Realtime PCR結果表明，50例ICP患者血清中miR-29的表達為對照組的2316±0753倍，差異有統計學意義（P<001）。

22 血清miR-29水平與ICP患者臨床參數的關系 血清miR-29在年齡≥28歲ICP患者中的表達為對照組的2334±0753倍，<28歲患者miR-29的表達為2266±0864倍；孕周≥35的患者miR-29表達為1974±0653倍，<35的患者表達為2527±0855倍；經產婦及未產婦中的表達分別為2403±0563倍和2154±0763倍；在多胎和單胎患者中的表達分別為2215±0651和2412±0583倍，統計學分析顯示血清miR-29與ICP患者的年齡、孕周、經產與否及胎數無關（P>005）。血清miR-29在圍產兒正常的ICP患者中表達為1493±0571倍，在有圍產兒早產、死胎、死產的ICP患者中的表達為2874±0553倍，差異有統計學意義（P<001）。

3 討 論

ICP在不同國家對圍產兒的影響不一樣。ICP發病機制研究已取得了一定進展，但是仍不十分明確。miRNA在多種疾病的發生發展中發揮著重要作用，但無研究表明miRNA與ICP發病相關。本研究通過檢測血清中miR-29的表達分析其在正常妊娠婦女和ICP患者中的表達差異。結果表明，血清miR-29水平在ICP患者中明顯升高。隨后我們分析了miR-29與ICP患者臨床參數的關系。miR-29與ICP患者的年齡、孕周、經產與否及胎數無關，但與ICP患者圍產兒預后相關，圍產兒正常的ICP患者miR-29的水平明顯低于圍產兒早產、死胎、死產的ICP患者的表達。因此，血清miR-29的表達可作為ICP診斷的輔助檢測指標，也可作為ICP圍產兒預后預測的潛在靶點。

參考文獻

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