子宮內膜癌組織中過氧化物酶體增生物激活受體γ的表達及意義

王三鋒，李 沫，柳曉春，周東華，左 越，潘淑芬，陳 瑩，鄭玉華

(1佛山市婦幼保健院，廣東佛山528000;2廣東省中醫院)

近年研究表明，激素受體和其他核受體在子宮內膜癌的發生、發展中具有重要作用［1］。過氧化物酶體增殖體激活受體γ(PPARγ)是核激素受體超家族中的成員，與配體結合后可啟動核內靶基因的轉錄，發揮重要的核轉錄因子功能，在炎癥、動脈粥樣硬化、脂類代謝、糖尿病和腫瘤的形成機制中扮演重要角色。2006年1月～2010年1月，我們觀察了子宮內膜癌組織中PPARγ的表達情況，并分析其在子宮內膜癌發生、發展中的可能機制。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇在佛山市婦幼保健院手術切除的子宮內膜癌組織及癌旁0.4 cm組織標本各40份，并選取同期因子宮良性病變行全子宮切除術的30份正常子宮內膜(增生期、分泌期各15份)作對照。所選患者臨床病理資料完整，術前均未行放療、化療或孕激素治療。根據FIGO手術病理分期:Ⅰ期23例、Ⅱ期12例、Ⅲ期5例;術后病理確診肌層浸潤＜1/2有21例，肌層浸潤≥1/2有19例;27例術中行淋巴結清掃患者中，9例有淋巴結轉移。

1.2 方法

1.2.1 免疫組織化學染色 取組織標本，石蠟包埋，連續4μm切片，常規脫蠟、水化后，3%H2O2室溫孵育;抗原加熱修復，滴加一抗工作液，室溫下孵育，加入適量生物素標記二抗工作液，顯色劑顯色，自來水充分沖洗、復染、脫水、透明、封片。用已知陽性切片作陽性對照，用PBS液代替一抗作為陰性對照。

1.2.2 結果判讀 PPARγ陽性細胞定位于細胞核內，呈棕黃色。隨機計數5個不重疊的200倍視野，每個視野選擇200個目標細胞，共計1 000個細胞進行評分。綜合染色強度和陽性細胞所占比例進行評分。陽性細胞所占比例評分標準:陽性細胞數＜10%者0分，10% ～40%者1分，＞40% ～70%者2分，＞70%者3分。染色強度評分標準:不著色0分，黃色1分，棕黃色2分，黃褐色3分。兩者評分相加，0～1分者為陰性，2分為弱陽性，3～4分為陽性，5～6分為強陽性。雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)判讀:腫瘤細胞的細胞核內出現棕黃色細顆粒狀物質為陽性，細胞必須結構清晰，定位好;將染色結果分為4級:①陰性:無染色或染色弱，染色范圍＜25%;②弱陽性:染色弱，染色范圍≥25%且＜50%;③陽性:染色強，染色范圍≥50%且≤75%;④強陽性:染色強，染色范圍＞75%。

1.2.3 統計學方法 采用SPSS13.0統計軟件，計數資料以百分數表示，比較采用協方差分析、單因素方差分析或 Fisher確切概率法，相關性分析采用Pearson相關分析。檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 PPARγ在不同子宮內膜組織中的表達 見表1。以PPARγ陽性表達作為因變量，分組因素作為自變量，年齡、是否絕經等作為協變量進行協方差分析，子宮內膜癌組織中的PPARγ蛋白陽性表達率高于正常子宮內膜組織(P＜0.01);而采用單因素方差分析后發現，正常子宮內膜中PPARγ蛋白陽性表達率低于子宮內膜癌組織及癌旁組織(P均＜0.05);但子宮內膜癌與癌旁組織中PPARγ蛋白陽性表達率比較差異無統計學意義(P＞0.05)。

2.2 ER、PR在子宮內膜癌中的表達 在子宮內膜癌中，ER的陽性表達率為72.5%，PR的陽性表達率為82.5%，兩者的表達存在正相關(r=0.617 7，P＜0.01)。

表1 PPARγ在正常組織、癌旁組織、子宮內膜癌組織中表達

2.3 PPARγ與子宮內膜癌患者臨床病理學特征的關系 見表2。

表2 PPARγ與子宮內膜癌患者臨床病理學特征的關系

2.4 PPARγ在子宮內膜癌組織中的表達與ER、PR表達的關系 Pearson相關分析顯示，PPARγ的表達與ER 的表達呈正相關(r=0.421 9，P ＜0.05)，與PR 的表達呈正相關(r=0.505 1，P ＜0.05)。見表3、4。

表3 PPARγ、ER在子宮內膜癌中的表達(例)

表4 PPARγ、PR在子宮內膜癌中的表達(例)

3 討論

子宮內膜是雌激素的靶器官，長期受到無孕激素拮抗的雌酮的影響，可導致內膜由增生到癌變。ER、PR是子宮內膜接受激素調節的物質基礎。細胞癌變后，ER、PR的產生和作用受到損傷，當癌細胞惡變達到一定程度時，組織就會失去ER、PR［2］。國內外眾多學者認為，子宮內膜癌是激素依賴性腫瘤，ER、PR與子宮內膜癌的發生、發展密切相關［3，4］;在內膜癌變過程中，部分細胞受體會喪失對性激素的識別功能，由激素依賴性轉化為非依賴性，當腫瘤惡性程度達到一定階段就會失去ER、PR。因此，ER、PR可以作為子宮內膜癌診斷、治療及預后的指標之一，在臨床有重要意義。

PPARγ對脂質代謝、脂肪形成、細胞分裂和凋亡等多種生物學過程具有調節作用。PPARγ位于機體多種信號傳導通路的交叉點，若被配體激活不僅可誘導多種腫瘤分化，并抑制其惡性增殖，而且可導致腫瘤細胞的凋亡，從而成為新的腫瘤治療靶點。PPARγ激動劑抗腫瘤的可能機制在于:活化的PPARγ可通過調節細胞周期使腫瘤細胞停滯于G1期，并抑制其增殖，主要途徑有促進p21的表達，誘導細胞分化，誘導瘤細胞凋亡、抑制腫瘤血管發生等［5，6］。

PPARγ表達在脂肪組織和免疫系統中最多，在子宮內膜癌等組織中也有表達。Oko等［7］研究發現，PPARγ在子宮內膜增生組織的陽性率遠高于正常子宮內膜組織，也高于子宮內膜癌組織。本研究發現，在子宮內膜癌組織中存在PPARγ的陽性表達，且正常子宮內膜中PPARγ表達低于子宮內膜癌及癌旁組織，提示PPARγ的表達在子宮內膜癌組織上調，顯然是從正常內膜組織中的沉默狀態轉化為腫瘤組織中的激活狀態，但其分子機理有待進一步探討。Suzuki等［8］研究發現，乳腺癌組織PPARγ陽性表達率為42%，且與腫瘤組織的組織學分級呈負相關;低分化乳腺癌組織中PPARγ表達顯著減少，在高分化乳腺癌組織中表達明顯升高。本研究發現，在子宮內膜癌中，PPARγ蛋白的陽性表達率為67.50%，且與組織學分級、FIGO分期呈正相關。

近年研究發現，PPARγ激動劑可抑制激素依賴性的子宮肌瘤增殖，提示PPARγ受體與ER存在交互聯系。乳腺癌細胞株的PPARγ表達被激活后，PPARγ配體可阻礙雌激素的局部生物合成;PPARγ配體TGZ可阻礙致癌物誘導的鼠乳腺組織轉化，而且聯合維甲酸受體配體(LG10068)可顯著增強這種效應，從而起到很好的預防腫瘤的作用。Gunin等［9］體外實驗發現，PPARγ配體可改變增生期子宮內膜的形態，逆轉子宮內膜的不典型增生，下調ER-α和ER-β的表達。本研究發現，子宮內膜癌組織中PPARγ的表達與ER以及PR的表達量呈正相關，這與乳腺癌組織的研究結果一致。據此推測，PPARγ可能參與雌激素致癌過程的部分分子機制。

綜上所述，PPARγ的過表達是子宮內膜癌發生、發展過程的早期事件，PPARγ激動劑用于子宮內膜癌變的治療，可有效逆轉不典型增生向子宮內膜癌的發展。

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