斑嘴鴨采精技術及精液品質研究

韓衛杰　黃曉鳳　劉曉華

摘要：以人工養殖的斑嘴鴨（Anas poecilorhyncha）為研究對象，建立適于斑嘴鴨的人工采精技術，通過感官評定和顯微鏡鏡檢，對斑嘴鴨精液品質進行評價，并對其精液稀釋液進行篩選。結果表明，斑嘴鴨的人工采精可采用背腹式按摩法，采精成功率可達80%以上。斑嘴鴨精液呈乳白色，采精量約0.08 mL，精子密度約8.0億個/mL，活力0.7。1號稀釋液的精子有效存活時間、生存指數及總存活時間優于其他稀釋液（P<0.05）。

關鍵詞：斑嘴鴨（Anas poecilorhyncha）；人工采精；精液品質

中圖分類號：S864.3 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2013）07-1610-03

斑嘴鴨（Anas poecilorhyncha）又名谷鴨、黃嘴尖鴨、火燎鴨，屬雁形目鴨科鴨屬，其肉質鮮美、營養豐富、野味濃郁，且有一定的保健功效，受到廣大消費者的青睞，是集食用、保健和觀賞于一體的經濟鳥類。2000年斑嘴鴨被中國列入“三有”動物名錄。近年來，由于過度獵取，加之生境條件惡化，野生斑嘴鴨種群數量日趨減少[1]。為了緩減野生斑嘴鴨的保護壓力、開辟農村致富新途徑，斑嘴鴨人工養殖得到政府的扶持，在中國快速發展起來，已成為農村產業結構調整、農民快速致富的重要途徑之一。

目前，斑嘴鴨的人工養殖管理粗放、培育程度低，所養殖群體的優良性狀需要進一步選育。另外，由于斑嘴鴨是家鴨的祖先之一[2，3]，可利用其脂肪沉積少、肉質細嫩、抗病力強等特點對家鴨品種進行改良[4]。但斑嘴鴨與家鴨體型差異過大、自然交配存在一定困難是制約其雜交利用的技術瓶頸。為充分發揮優秀斑嘴鴨個體的遺傳優勢，加快斑嘴鴨良種選育及雜交利用，本試驗對斑嘴鴨人工采精技術及精液稀釋液進行研究，以期為斑嘴鴨優良性狀基因利用奠定技術基礎。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗動物及日糧 10只成年健康雄性斑嘴鴨由江西省林業科學院野生動物馴養繁育基地提供，平均體重1 100 g。供試斑嘴鴨采取地面平養，與雌性隔離；自由采食、飲水；日糧采用全價顆粒飼料，含粗蛋白16%，消化能10.8 MJ/kg。

1.1.2 試驗儀器及試劑 生物顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、試管、精密試紙（pH 5.5～9.0）、血球計數器、移液器、紗布、氯化鈉、葡萄糖、果糖、谷氨酸鈉、醋酸鈉、檸檬酸鈉、氯化鎂、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉。

1.2 方法

1.2.1 斑嘴鴨人工采精 根據目前禽類常用的人工采精技術，在電刺激采精法和背腹式按摩采精法的基礎上探索適合斑嘴鴨的采精技術和方法。

1.2.2 精液品質檢測評定方法 采用感官評定和顯微鏡檢查對精液品質進行評定。感官評定指標主要有采精量、色澤、氣味等。顯微鏡檢查主要確定精子活力和精子密度，精子活力檢查方法采用0～1.0的10級評分法，即滴1滴精液于載玻片上，蓋上蓋玻片置于顯微鏡下，觀察做直線運動的精子所占的比例，確定活力。精子密度評定方法為取10 μL精液緩慢注入含1.99 mL 3%NaCl的溶液中，搖勻，靜置2 h以殺死精子，隨后取1滴稀釋均勻的精液于血細胞計數板的計數室邊緣靜置2 min后鏡檢，統計精子數，計算精子密度。精液pH用精密試紙測定。

1.2.3 精液稀釋液篩選試驗 采用已報道的家禽精液常用稀釋液配方[5-7]，將不同稀釋液與精液按2∶1比例稀釋，在室溫下保存，每2 h進行一次鏡檢，記錄精子總存活時間、有效存活時間并計算精子生存指數。所用稀釋液的配方見表1。

有效存活時間：精子活力在0.5以上的維持時間[8]。

精子生存指數=t1×[（m1+m2）/2]+t2×[（m2+m3）/2]+…+tn×[（mn+mn+1）/2]，式中t為2次檢查的間隔時間，m為檢查時精子活力。

1.3 數據處理與統計分析

數據分析處理采用SPSS 16.0進行單因素方差分析，利用LSD法進行多重比較。

2 結果與分析

2.1 斑嘴鴨采精技術

進行人工采精的斑嘴鴨應具備體格健壯、羽毛鮮亮整潔、性反射良好等特征，與雌性斑嘴鴨隔離飼養。采精前2 h應停止喂食，并清除泄殖腔附近的羽毛，以防止污染精液。

采精過程由一人完成。采精時，采精員坐在凳子上，將公鴨放于膝上，頭向下，用雙腿對公鴨進行固定，用右手固定公鴨雙腳，右手中指與無名指之間夾住集精管，管口向外。左手掌心向下緊貼公鴨背腰部，并向尾部方向撫摸20～30次，同時用右手輕輕擠壓其腹部。公鴨泄殖腔出現性反射，生殖器將要外翻時，左手向外壓尾羽，用食指和拇指擠壓泄殖腔基部；同時也用右手食指和拇指擠壓泄殖腔基部，使生殖器外翻。再擠壓數次后可見乳白色精液流出，此時用右手所夾的集精管收集精液。采精完成后將斑嘴鴨放回。

斑嘴鴨經2周人工采精的調教能夠形成良好的性反射。利用上述采精技術，可一個人完成斑嘴鴨采精過程，每次采精用時大約3 min左右，采精成功率達80%以上，大大提高了工作效率。采精后斑嘴鴨恢復良好，未見異常反應。采精頻率以2次/周為宜，每次間隔3～4 d。

2.2 斑嘴鴨精液感官評定和精液生理指標

2012年4月中旬至5月中旬，對10只斑嘴鴨進行了總計60次的背腹式按摩法采精，每只每次采精時間約2～3 min，采精成功率達80%以上。斑嘴鴨精液呈乳白色，采精量介于0.05～0.12 mL之間，平均為0.08 mL。精子密度為6.0億～10.0億個/mL，平均為8.0億個/mL，活力0.7級以上。精液pH為6～7，偏酸性。

2.3 斑嘴鴨精液稀釋液的篩選結果

將經過鏡檢精子活力在0.9以上的斑嘴鴨精液與稀釋液按1∶2比例稀釋，常溫保存。記錄精液被不同稀釋液處理后的有效存活時間、生存指數及總存活時間，結果見表2。由表2可見，經不同稀釋液稀釋處理后的精子有效存活時間、總存活時間和生存指數也不盡相同。1號稀釋液在有效存活時間、生存指數和總存活時間方面優于其他稀釋液；6號稀釋液處理效果次之，其他稀釋液只能在短時間內保存精液。

3 討論

3.1 斑嘴鴨采精技術

鳥類的人工授精是從家禽養殖業發展起來的。家禽的人工授精技術經改進后在金雕、鴕鳥、草原隼、蒼鷹、波斑鴇、角雉、褐馬雞等非家禽鳥類得到廣泛應用。目前，鳥類的人工采精方法主要有按摩法、電刺激法、假陰道法和順應法，其中按摩法最為常用[9]。

關于斑嘴鴨人工授精技術的研究迄今尚未見相關報道。本研究嘗試使用電刺激法和人工按摩法對斑嘴鴨進行人工采精。成年雄性斑嘴鴨個體較小，體重約1 kg左右。采用電刺激法時，需要將電極棒由泄殖腔插入，但由于其生殖器相對較小，插入的電極棒對生殖器充血外翻有一定的阻礙作用，致使采精效果不理想。在采用按摩法采精時，由于斑嘴鴨個體較小，采精人員容易固定，采精成功率較高。人工養殖的雄性經2周左右調教后，可形成良好的性反射，采精成功率可達80%以上。另外，由于鳥類的尿酸呈白色，在采精時要注意與精液區分，防止污染。

3.2 斑嘴鴨精液稀釋液的篩選

精液稀釋液主要用于擴大精液容量和為精子提供營養物質。精液稀釋液的種類很多，不同的稀釋液保存精子的效果也不盡相同。配制精液稀釋液常用的試劑有氯化鈉、葡萄糖、蔗糖、果糖、谷氨酸鈉、檸檬酸鈉等[10]。

本試驗以已報道的家禽精液稀釋液作為參考，配制了6種精液稀釋液，進行斑嘴鴨精液保存試驗。在精子活力和有效存活時間方面，1號稀釋液最好，6號次之。這與稀釋液的組成成分有較大關系。1號和6號稀釋液中含有葡萄糖和果糖等營養成分，可為精子活動提供能量；并且其中的緩沖成分可有效緩解因精子進行無氧酵解引起的pH變化，維持總體環境穩定，有利于精子存活。2號稀釋液同樣包含營養和緩沖物質，但配制后經高壓高溫消毒易出現顏色變黃，溶質改變，精液保存效果不理想。其他稀釋液因溶質種類使用較少，易于配制，可用于短時間內的精液保存。

參考文獻：

[1] 韓衛杰，劉曉華，黃曉鳳，等.斑嘴鴨生長規律研究[J].黑龍江畜牧獸醫，2011（12）：4-6.

[2] 蘇 瑛，劉 寧，曹五七，等.鴨mtDNA控制區遺傳變異與進化研究[J].中國家禽，2008，30（23）：29-32.

[3] 李慧芳，朱文奇，楊 寧，等.家鴨、媒鴨和野鴨mtDNA D-loop區的遺傳變異[J].畜牧獸醫學報，2011，42（9）：1213-1219.

[4] 李助南，唐登華，程澤信.綠頭野鴨與櫻桃谷鴨雜交效果的觀測[J].湖北農業科學，2007，46（2）：276-278.

[5] 張兆旺，張進邦.雞精液稀釋液篩選試驗[J].甘肅農業大學學報，1992，27（4）：333-338.

[6] 陳元明，廖紀朝，黃美玉，等.雞精液稀釋保存技術的研究[J].中國農業科學，1987，20（6）：52-57.

[7] 黃仁術.低溫下基于Lakes液的皖西白鵝精液稀釋液研究[J].畜牧與獸醫，2009，41（3）：62-64.

[8] 安芳蘭，楊保田，張兆旺，等.磁場對低溫保存雞精液品質的影響[J].安徽農業科學，2009，37（6）：2504-2505.

[9] 張雁云.鳥類的人工授精[A].中國鳥類學研究—第四屆海峽兩岸鳥類學術研討會文集[C]，昆明：中國動物學會，2000.

[10] 權 凱，黃炎坤.雞精液稀釋液研究進展[J].養禽與禽病防治，2006（2）：4-5.