血清不明抗體干擾TPPA試驗一例

隆維東，劉萬彬，李堅

（重慶市巴南區人民醫院檢驗科，重慶401320）

·短篇報道·

血清不明抗體干擾TPPA試驗一例

隆維東，劉萬彬，李堅

（重慶市巴南區人民醫院檢驗科，重慶401320）

TPPA；干擾；不明抗體，明膠顆粒

梅毒是由梅毒螺旋體感染引起的一種慢性全身性性傳播疾病。當人體感染梅毒螺旋體后，經淋巴系統及血液循環播散到全身，幾乎可以侵犯全身所有臟器和組織，并產生各種各樣的癥狀和體征，嚴重者甚至危及生命[1-2]。患者患病4～10周后，體內即可產生一定數量抗體[3]。臨床實驗室可以通過檢測血清標本中的抗體來判斷是否感染梅毒螺旋體。本院收治1例血清不明抗體干擾梅毒螺旋體抗體明膠顆粒凝集(TPPA)試驗患者，介紹如下：

1 病例簡介

患者，女，38歲，孕1產1，因急性上消化道出血于2012年4月25日入院。入院后因為需要輸注懸浮紅細胞，故抽血送我科進行輸血前常規免疫檢查。實驗中發現該患者TPPA試驗陰性對照孔和實驗孔均為弱陽性凝集(±)，故不能判斷患者是否感染梅毒。為進一步明確實驗結果，我們先將患者血清樣品進行了吸收試驗，然后再做梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗。

2 吸收試驗

2.1 標本及試劑該患者血清標本3 ml，未加任何抗凝劑。梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試劑，日本富士瑞必歐株式會社提供，批號：VN11220。

2.2 操作步驟取已溶解好的未致敏粒子試劑950μl至小試管中，加入患者血清樣品50μl（即1：20稀釋），充分混勻后，室溫放置30 min，以充分吸收患者血清樣品中的不明抗體。再離心5 min，吸取上清液待用。在反應板第1孔加入25μl上清液，作為陰性對照孔（即1：20稀釋）；在反應板第2孔加入25 μl血清稀釋液，并加入上清液25 μl，充分混勻（即1：40稀釋），然后吸棄25 μl混合液，將第2孔作為患者血清樣品的實驗孔。最后在第1孔加入未致敏粒子25 μl，第2孔加入致敏粒子25 μl，置平板混合器振蕩30 s，室溫靜置2 h。

2.3 結果第一孔（陰性對照孔）出現陰性反應，第2孔（實驗孔）出現陰性反應，故最后判定該患者為抗梅毒螺旋體抗體陰性。

3 討論

梅毒血清學試驗包括非特異性梅毒螺旋體試驗和特異性梅毒螺旋體試驗。非特異性梅毒螺旋體試驗如梅毒血漿反應素快速試驗(RPR)，是將VDRL抗原吸附于活性碳顆粒表面，若待測血清中存在反應素，即可發生凝集，該方法在基層醫院臨床實驗室廣泛使用。但因其特異性較低，假陽性率較高，故只能作為梅毒感染的初篩實驗[4]。特異性梅毒螺旋體試驗如TPPA試驗，其以明膠顆粒為載體，吸附梅毒螺旋體(Niohols)株菌抗原，檢測的是梅毒特異性抗體，同時可避免因血細胞自溶而引起的假陰性。故臨床實驗室常以TPPA陽性作為確診梅毒的依據[5]。我們在TPPA試驗中，出現陰性對照孔和實驗孔均為弱陽性凝集(±)后，查詢了該患者病歷，發現患者10年前懷孕分娩時有輸血史，分別輸注4 U懸浮紅細胞和400 ml血漿；3年前做過顱腦手術，分別輸注5 U懸浮紅細胞和400 ml血漿，同時有大量臨床用藥史，具體不詳。陰性對照孔加入的試劑是未致敏粒子，若出現陽性反應，一方面可能是未致敏粒子被致敏粒子污染，另一方面可能是血清中存在某種不明抗體，而該抗體恰好能夠匹配未致敏粒子的抗原決定簇，發生抗原抗體反應，從而出現假陽性結果。因為該患者之前有大量輸血史和臨床用藥史，可能在之前的輸血或用藥過程中產生了不明抗體。而梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗中的未致敏粒子采用的是經單寧酸處理調制濃度為1%的明膠粒子，所以針對這種血清不明抗體，我們主要考慮是抗明膠粒子抗體或抗單寧酸抗體。我們通過吸收試驗，在血清樣品中加入大量未致敏粒子，為血清不明抗體提供了大量的不明抗體結合位點。抗原抗體充分反應后，通過離心，極大程度降低或消除了血清中不明抗體含量，從而避免血清不明抗體結合到明膠粒子上，出現假陽性反性。

因此，我們在TPPA試驗，若陰性對照孔出現陽性反應，在排除了未致敏粒子被致敏粒子污染的情況后，則要考慮血清中是否存在不明抗體[6]。通過吸收試驗清除不明抗體，從而使檢驗結果更加準確可靠。

[1]梁雙吟,李小云,莊祥龍．三種梅毒血清學試驗的適用性分析[J].海南醫學,2005,16(11):112．

[2]李廣兵,羅燕,許金萍．兩種梅毒檢測方法的比較分析[J].中國社區醫師·醫學專業,2012,14(305):256．

[3]王珍,蔡志凌,彭華．梅毒孕產婦對妊娠梅毒危害性認知情況調查分析[J].海南醫學,2009,20(07):285-286．

[4]勾宗蓉,呂連華.兩種梅毒血清試驗對梅毒診斷及療效的價值分析[J].中外醫學研究,2012,10(1):49-50．

[5]孫慈惠,鄧紅櫻.梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗不確定結果相關因素分析[J].中國國境衛生檢疫雜志,2007,30(1):18-19．

[6]胡偉華.梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗假陽性1例[J].沈陽部隊醫藥,2011,24(4):99.

R759.1

D

1003—6350(2013)01—0142—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2013.01.0064

2012-05-21）

通迅作者：李堅。E-mai：lijian701029@126.com