RhD血型鑒定在臨床輸血中的應用

張曉飛

為有效防止急慢性溶血性輸血反應以及新生兒溶血病的發生，確保臨床輸血安全，降低輸血反應率，減少醫療糾紛。自2003年起，本院以及來本院申請輸血和備血的患者除繼續進行ABO血型鑒定外，還同時進行了RhD血型鑒定。現將4146例RhD血型鑒定結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年1月至6月期間在本院申請備血、輸血的各科患者及新生兒共4146例。其中內科963例，外科1394例，婦產科2340例，新生兒17例。所有標本均為新鮮采集的血液。所用試劑RhD(lgM)血型定型試劑(單克隆抗體)，RhD血型鑒定卡(微柱凝膠)。分別購自上海血液生物醫藥有限責任公司和長春博迅生物技術有限責任公司。均在有效期內使用。使用FYQ型免疫微柱孵育器(長春博研科學儀器有限責任公司生產)。

1.2 方法 對送檢血樣同時采用微柱凝膠法及試管法進行RhD血型鑒定。(1)紅細胞標本的制備:將采集的標本配制成0.5%～8%和3%～5%紅細胞生理鹽水懸液。(2)微柱凝膠法:①將微柱凝膠試劑卡編號;②將待檢的紅細胞標本50μl加入編號的微管中;③即刻使用微柱凝膠專用離心機離心5 min，2 min 900rpm;3 min 1500rpm;④取出肉眼觀察結果。⑤結果判定標準按試劑盒說明書。陽性:紅細胞抗原與相應抗體在微柱凝膠中形成的特異性抗原抗體復合物浮在凝膠表面或膠中。反應強度:特異性紅細胞抗原抗體復合物位于凝膠表面為強陽性反應，復合物在膠中為弱陽性反應;愈靠近膠底部顆粒愈小，反應愈弱。陰性:被檢紅細胞抗原無相應的抗原與抗體結合，不出現特異性抗原抗體復合物，紅細胞沉于微柱凝膠的尖底部。(3)試管法:①加一滴抗D試劑于預先標記號的試管中;②再加一滴約3%～5%的被檢紅細胞懸液于試管中，混勻。③以15 s 3400rpm離心;取出檢查是否溶血(溶血可能是陽性結果，或者是細菌污染)，然后輕輕搖晃，使細胞再懸浮起來。觀察凝集情況，并立即記錄結果。必要時可借助顯微鏡。凝集者為陽性，若是陰性結果，需在37℃孵育15～30 min，然后再離心觀察結果，結果若呈陰性需進一步確認是否是弱D。

2 結果

本組4146例中檢出Rh(D)抗原陰性者9例，男2例，女7例;均為漢族，Rh(D)陰性率為0.22%，9例Rh(D)陰性者，

3 討論

人類Rh血型系統自1939年被發現以來，因可導致新生兒溶血病(HDA)、溶血性輸血反應而成為紅細胞血型中僅次于ABO的重要系統［1］。Rh系統內有45種不同的抗原，D抗原最為重要，根據紅細胞上D抗原的有無，可分類紅細胞為Rh陽性或Rh陰性。大約85%白種人為Rh陽性(中國人約為99.6%)，其余 15% 為 Rh 陰性(中國人約為 0.4%)［2］。RH血型系中，D抗原的抗原性為最強，約50% ～75%的Rh陰性的個體，通過輸血和妊娠，可受D抗原陽性紅細胞免疫而產生抗D，因此在輸血治療和新生兒溶血病的診斷、治療中，D抗原的重要性僅次于A和B抗原［3］。

RH血型系在輸血治療和胎母免疫引起的新生兒溶血病的臨床醫學中有著很重要的意義。近年來，臨床上因Rh血型不合引起的輸血反應和母嬰Rh血型不合的妊娠所引起的新生兒溶血病時有報道，因此，在血庫的實踐工作中對患者進行ABO血型鑒定的同時也進行RhD血型鑒定，并將其作為血庫的常規檢查項目是十分必要的，因為醫院血庫一般沒有貯備和制備Rh陰性血液的條件而血站對Rh陰性血液的貯備也是少量的。又由于我國漢族人群中RhD陰性者僅占0.2%～0.5%左右，這就導致了RhD陰性血源緊張的現實，如果在術前2 h(急診除外)檢測受血者的Rh抗原和ABO血型，一旦發現Rh陰性，可由充足的時間尋找血源，對危、重、急患者以及需要輸血治療的RhD陰性患者，在初次輸血時，給予RhD相配合的血液，以避免多次輸血后產生同種抗體，給今后的輸血工作帶來困難和風險，對于保證患者的安全輸血具有深遠的意義。

總之，RhD血型系統在臨床輸血中應受到醫務人員的高度重視，將Rh血型鑒定作為血型篩查的常規檢驗，對有效預防溶血性輸血反應和新生兒溶血病的發生以及臨床輸血安全具有重要意義。

［1］陸松松，陳靜嫻.Rh(D)變異體的研究進展.臨床輸血與檢驗，2010，12(4):374-377.

［2］高峰.臨床輸血與檢驗.人民衛生出版社，2007，7:71.

［3］王培華.輸血技術學.人民衛生出版社，2002:155.