4—羥基苯乙酸對酪氨酸酶作用機理研究

摘 要：本實驗研究了4-羥基苯乙酸對酪氨酸酶的作用機理。實驗結果表明：在低濃度條件下，4-羥基苯乙酸對酪氨酸酶具有激活抑制作用；在高濃度條件下，4-羥基苯乙酸對酪氨酸酶具有抑制作用。

關鍵詞：酪氨酸酶 4-羥基苯乙酸 激活作用

中圖分類號：Q356.1 文獻標識碼：A 文章編號：1674-098X（2013）01（a）-00-01

酪氨酸酶（Tyrosinase），又稱多酚氧化酶，是一種含銅金屬酶，廣泛存在于細菌、真菌、裸子植物、被子植物、哺乳動物等生物中，并存在于生物界系統發育階段的各個水平。一般認為，羽毛，毛發，眼睛，昆蟲表皮，種子等呈現出黑色、褐色、淺黃色等色素，都是酪氨酸酶作用的結果。酪氨酸酶的產物黑色素具有抗紫外線、清除自由基、抗病毒等重要功能。最新研究結果表明，可利用黑色素制備相應的抗體來治療與酪氨酸酶表達相關的疾病。因此，國內外很多學者都致力于尋找具有特異的、高效的酪氨酸酶作用物，研究其抑制或激活的作用機理和動力學。該文以4-羥基苯乙酸作為效應物，研究其對酪氨酸酶催化反應的影響及作用動力學，得到有關動力學參數，為酪氨酸酶抑制劑和激活劑的分子設計的實際應用提供理論依據。

1 實驗方法

1.1 材料及儀器

蘑菇酪氨酸酶（Mushroom tyrosinase）購于Sigma公司，總活力為50 KU。L-3，4-二羥基苯丙氨酸（L-DOPA）購于上海斯高勒生物技術有限公司。對羥基苯乙酸、磷酸氫二鈉（Na2HPO4）和磷酸二氫鈉（NaH2PO4）等試劑均為國產分析純。儀器為上海UNICO公司UV-2102PC型紫外可見分光光度計。

1.2 酪氨酸酶酶活測定

以1.0 mM L-DOPA為底物。先將0.6 mL 5 mM的L-酪氨酸……